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公开(公告)号:CN117121809A
公开(公告)日:2023-11-28
申请号:CN202210543449.7
申请日:2022-05-19
Applicant: 南京农业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明公开了一种培育不结球白菜小孢子植株的方法。该方法包括如下步骤:(1)取样及花蕾挑选;(2)小孢子培育:用次氯酸钠对花蕾消毒,灭菌水清洗2遍,NLN‑13培养基润洗;润洗后的花蕾进行研磨、过滤、离心,黄绿色沉淀用NLN‑13培养基稀释并添加活性炭,加入伏立诺他分装到35mm培养皿,32.5℃热激24h,暗培养7~14天形成胚状体;(3)植株再生:胚状体补光振荡培养后移到改良固体1/2MS培养基中培育60d,炼苗移栽。(4)倍性鉴定:再生植株使用改良流式细胞仪倍性鉴定方法进行倍性鉴定。本发明所述方法能够提高不结球白菜小孢子出胚率,简化操作步骤缩短试验时间,提高再生植株存活率。
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公开(公告)号:CN116083476A
公开(公告)日:2023-05-09
申请号:CN202211095616.2
申请日:2022-09-08
Applicant: 南京农业大学 , 南京囿圆生物工程有限公司
Abstract: 本发明公开了一种豆瓣菜遗传转化方法,包括以下步骤:(1)豆瓣菜茎段选取;(2)茎段预培养;(3)农杆菌侵染;(4)茎段农杆菌共培养;(5)诱导形成愈伤组织;(6)诱导愈伤组织形成芽;(7)诱导生根再生植株。本发明弥补了国内外豆瓣菜高效遗传转化方法的空白;能够在一个半月左右获得转基因豆瓣菜,较其他园艺作物而言极大的缩短了基因功能验证的时间;使用该遗传转化方法得到的豆瓣菜植株再生率达到100%,转基因阳性率达到10%,成功率远远高于以往的方法。
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公开(公告)号:CN115380820A
公开(公告)日:2022-11-25
申请号:CN202210865825.4
申请日:2022-07-22
Applicant: 南京农业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明公开了一种诱导豆瓣菜芽脱分化的高效再生的方法,包括以下步骤:(1)选取带有叶柄基部的茎段;(2)将茎段接种到含细胞分裂素和植物生长素的培养基上,暗培养至产生畸形膨大芽;(3)将畸形膨大芽绿色组织切除形成创伤,然后接种到含细胞分裂素和植物生长素的培养基上,暗培养至畸形膨大芽伤口形成愈伤团;(4)将整体接种到培养基上,培养至形成丛芽;(5)将整体接种到培养基上,培养至形成不定根,成为完整植株;该方法选择畸形膨大芽来诱导愈伤,畸形膨大芽相对于传统的根、茎或叶而言更加幼嫩,细胞分裂更加旺盛,形成愈伤时间短,培养形成完整植株整个周期37~43天。
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公开(公告)号:CN113549617A
公开(公告)日:2021-10-26
申请号:CN202110618334.5
申请日:2021-06-03
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开编辑不结球白菜CENH3基因的sgRNA及其CRISPR/Cas9载体和应用,本发明设计了不结球白菜CENH3基因的sg RNA,构建CRISPR/Cas9基因编辑载体,将连接了目的DNA片段的CRISPR/Cas9载体转入不结球白菜基因组中,通过基因编辑实现对不结球白菜CENH3基因的定点突变。本发明使用花粉纳米磁转化技术结合CRISPR/Cas9技术对不结球白菜内源基因CENH3进行编辑,通过植株抗性筛选、PCR检测、基因测序筛选得到CENH3单倍体诱导系,为在不结球白菜双单倍体育种中利用CENH3介导的染色体消除机制获得单倍体奠定基础。
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公开(公告)号:CN108513908B
公开(公告)日:2021-09-14
申请号:CN201810442975.8
申请日:2018-05-10
Applicant: 南京农业大学
IPC: A01H1/08
Abstract: 本发明公开了一种四倍体不结球白菜的培育方法,采用细胞微管抑制剂氨磺灵混合水溶液点滴不结球白菜幼苗的生长点,使细胞染色体加倍,苗期进行气孔鉴定,开花期进行花粉鉴定,再通过流式细胞仪鉴定,筛选获得四倍体植株。同时在氨磺灵水溶液中加入吐温80和Silwet L‑77,吐温80能够增强氨磺灵的溶解性,并提高了氨磺灵水溶液的稳定性,而Silwet L‑77能极大降低水的表面张力,利于溶液与叶面的附着,从而提高了四倍体诱变率。该方法利用氨磺灵混合水溶液抑制细胞有丝分裂后期纺锤丝的形成,从而实现染色体加倍,为创造丰富的不结球白菜四倍体新种质和培育四倍体新品种提供了技术支持。
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公开(公告)号:CN113079746A
公开(公告)日:2021-07-09
申请号:CN202110546325.X
申请日:2021-05-19
Applicant: 南京农业大学
IPC: A01C1/06
Abstract: 本发明公开了一种黑塌菜种子丸粒化配方及加工方法,包括粘合剂、惰性添加物质、引发剂、杀虫剂、染色剂。粘合剂以百分比为0.5%‑8%的粘合剂水溶液的形式添加,本发明优选的浓度为4.5%聚乙烯醇溶液;惰性添加物质为滑石粉、皂土、高岭土中的一种或几种,本发明优选的为滑石粉。另外,添加了引发剂Vc以及杀虫剂苦参碱和染色剂氧化铁黄。本发明使用的材料环保、安全,丸粒化后种子的发芽势、发芽率以及产量和品质都得到了提高。
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公开(公告)号:CN110590729A
公开(公告)日:2019-12-20
申请号:CN201910904189.X
申请日:2019-09-24
Applicant: 南京农业大学
IPC: C07D311/62 , A61K47/42 , A61K31/352
Abstract: 本发明属于提高白菜花色苷热稳定性领域,涉及一种采用核桃肽提高白菜花色苷热稳定性的方法。包括以下步骤:选择生长状况良好的白菜,洗净备用;选取酸化的乙醇作为提取剂,将提取液和白菜在超声条件下提取花色苷,获得提取液;提取液离心来,分离上清液得到花色苷的粗提取液;浓缩来,得到花色苷粗提取浓缩液;将花色苷粗提取浓缩液中浸泡2.5-4小时,后再用蒸馏水冲洗大孔树脂,再用解吸液解吸大孔树脂,收集解吸液并浓缩,得到纯化的花色苷溶液;花色苷溶液中加入核桃肽溶液并加热来。本发明通过低浓度的核桃肽的作用来保存花色苷,并且能够较为显著的提高花色苷在一定温度的保存率,这对未来花色苷的保存和开发利用具有积极的作用。
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公开(公告)号:CN110089426A
公开(公告)日:2019-08-06
申请号:CN201810085112.X
申请日:2018-01-29
Applicant: 南京农业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明公开一种培育不结球白菜小孢子植株的方法,具体包括如下步骤:(1)花蕾的选取:选取花瓣与花药数量比为1:1的花蕾;(2)培育小孢子胚胎:将步骤(1)采集的花蕾用次氯酸钠溶液消毒10-15分钟,灭菌水清洗,NLN-13培养基润洗;将润洗后的花蕾充分研磨,过滤,离心,含有10-30mg/L硼物质的NLN-13培养基稀释,分装到培养皿中加入活性炭,热激处理,24-26℃暗培养14-16天,形成胚状体;(3)成熟胚萌发成植株:将胚状体进行振荡培养,将其中转绿的成熟胚转移到固体MS培养基中进行培养,培育38-42d后即可直接进行炼苗移栽。本发明所述方法在能够保证出胚率的情况下,简化操作步骤,大大减少了操作时间,提高了植株生产效率。
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公开(公告)号:CN109769587A
公开(公告)日:2019-05-21
申请号:CN201910167291.6
申请日:2019-03-06
Applicant: 南京农业大学 , 南京浩福新材料科技有限公司 , 江苏农林职业技术学院
Abstract: 本发明公开了一种简便易行的姬菇增产方法,涉及农业技术领域,所述简便易行的姬菇增产方法包括以下步骤:将已接种过的姬菇菌袋置于菇房的食用菌承放支架上;在支架上布设远红外发热线对姬菇进行辐射处理;期间按照常规生产方法对姬菇进行管理;其中,所述远红外发热线的工作电压为24V,远红外线波长为8-14μm,辐射直径为30cm。本发明易于操作,通过远红外发热线进行热能辐射使姬菇生长速度加快,有效增加了姬菇产量;由于发热线的电压为24V,有效保证了操作的安全性,无碳环保,低耗能,易于维护。
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