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公开(公告)号：CN118592262A
公开(公告)日：2024-09-06
申请号：CN202410405613.7
申请日：2024-04-07
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种柿树矮化栽培的方法，该方法包括：第一年3月中旬，基砧的种子经沙藏后播种到穴盘中，放至温室控温保湿；4月中下旬，当基砧幼苗长出3‑5片真叶时带土坨移栽至田间，实行双行定植，栽后灌透水一次，后视苗情管理；第二年2月中下旬，取矮化中间砧砧木作接穗与基砧苗嫁接，并在嫁接后第30‑45天时筛除嫁接失败的中间砧，对嫁接成功的苗木进行松土和施肥；第三年2月中下旬，选取树龄为4‑6年的栽培品种的接穗嫁接到矮化中间砧苗上，并在嫁接后第30‑45天时筛除嫁接失败的栽培品种，对嫁接成功的苗木进行松土和施肥。利用本发明的栽培技术，可大幅度减少甜柿管理用工量，节约管理成本，提高果实产量和品质，从而提高经济效益。
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公开(公告)号：CN103988776B
公开(公告)日：2016-03-30
申请号：CN201410124082.0
申请日：2014-03-28
Applicant: 南京农业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明涉及一种南通小方柿组培快繁方法，属于农作物快繁技术领域。研究了休眠芽消毒方法，确定了适于小方柿早期和中期继代增殖的培养基成分，分析了不同细胞分裂素、生长素对组培苗生长的影响。将取自南通小方柿一年生枝条上的休眠芽剥掉外层鳞片，用流水冲洗2小时后分别用75%酒精、10%双氧水消毒，将消毒处理好的休眠芽接种于基本培养基中，待萌发后转接到继代增殖培养基上。本方法基本解决了南通小方柿初代褐化严重的问题，初代成活率达到80%。通过添加适量赤霉素解决了南通小方柿继代增殖问题。促进了矮生型柿品种南通小方柿的快速繁育和生产推广工作。
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公开(公告)号：CN102776224B
公开(公告)日：2014-05-21
申请号：CN201210222766.5
申请日：2012-06-29
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于基因工程领域，公开了湖北海棠MhSGT1b基因的应用。受低温胁迫的诱导，MhSGT1b在植物中过量表达；在植物受到低温胁迫时，过量表达的MhSGT1b可诱导NtRbohD基因在植株中高水平表达、增强NtPIN1基因和NtSOD基因表达、短暂增强NtSPS的表达水平，从而共同抵御胁迫。MhSGT1b转基因烟草具有较强的抵御低温胁迫的能力，植株可在4℃低温条件下正常生长长达24h，同时也证明了MhSGT1b基因具有提高植物抗寒能力的功能。因此，MhSGT1b基因及含有所述的MhSGT1b基因的重组表达载体可在创制耐低温新种质和/或植物品种改良中应用。
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公开(公告)号：CN102115742A
公开(公告)日：2011-07-06
申请号：CN201010585828.X
申请日：2010-12-14
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N15/10
Abstract: 本发明属于生物技术领域，公开了一种植物中总核酸的同步提取方法。将生物材料粉碎后与CTAB裂解液混合，水浴45-60min，加入与CTAB裂解液等体积的由氯仿和异戊醇组成的混合试剂，混匀；离心，取上清，加入等体积的由水饱和酚、氯仿及异戊醇组成的混合试剂，混匀；离心，取上清，加入1/30体积的NaAc和1/10体积的无水乙醇，混匀，在冰上静置5min后，再加入等体积的由氯仿和异戊醇组成的混合试剂；离心，取上清，加入1/10体积的NaAc和两倍体积的无水乙醇，-20℃静置1h；离心，弃上清，用70％的乙醇洗涤沉淀1～5次，干燥得到包含基因组DNA和总RNA的总核酸。该发明同步提取烟草总核酸，对于今后开展基因克隆、表达分析等一系列分子生物学研究具有非常重要的意义。
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公开(公告)号：CN113584024B
公开(公告)日：2023-05-26
申请号：CN202110797328.0
申请日：2021-07-14
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/82 , A01H5/00 , A01H6/74
Abstract: 本发明属于基因工程领域，涉及‘小金海棠’Mx‑miR175‑5p基因及其应用。‘小金海棠’Mx‑miR175‑5p，其前体序列如SEQ ID NO.1所示，其编码基因序列如SEQ ID NO.2所示。本发明首次从‘小金海棠’鉴定到一个新的Mx‑miR175‑5p基因，RLM‑5’RACE验证其靶基因是BTB4蛋白；通过转基因技术，发现过表达Mx‑miR175‑5p能够提高苹果愈伤组织的铁III还原酶活性及铁吸收和转运相关基因的表达，说明其能够调节苹果对铁的吸收和转运能力，提升对缺铁胁迫的耐受性。因此，可利用其培育出具有高抗缺铁能力的转基因苹果。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN107667857B
公开(公告)日：2020-12-01
申请号：CN201710920265.7
申请日：2017-09-30
Applicant: 南京农业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明公开一种茎尖玻璃化超低温脱除苹果病毒的方法，包括以下步骤：(1)携带病毒无菌组培苗的获得；(2)继代扩繁培养；(3)茎尖玻璃化超低温处理脱毒：取继代扩繁培养后的组培苗，切取茎尖，接种于预培养基上进行预培养；将预培养过的茎尖放在装载溶液中，20～25℃条件下装载5～120min；然后转至PVS‑2溶液中，0～2℃下进行5～150min PVS‑2玻璃化处理；然后进行液氮冷冻处理；最后进行水浴解冻处理；将解冻处理后的茎尖放入MS+1.2mol/L的蔗糖溶液中浸泡处理；(4)后期增殖扩繁培养。本发明的优点在于：①使脱毒效率大为提高，操作简单，快速有效；②提供了从材料选取到获得无病毒茎尖再生植株整个详细过程的高效技术体系；③具有很好的技术效果和推广前景。
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公开(公告)号：CN104152468A
公开(公告)日：2014-11-19
申请号：CN201410243418.5
申请日：2014-06-03
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于基因工程领域，涉及‘南通小方柿’DkGA2ox1基因及其表达载体和应用。本发明首次从‘南通小方柿’克隆得到了一个新的DkGA2ox1基因，将其导入烟草，DkGA2ox1在烟草中过量表达；DkGA2ox1转基因烟草具有较强的矮化能力，可使植株矮化至野生型植株的41.54％。
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公开(公告)号：CN101717825B
公开(公告)日：2012-05-23
申请号：CN200910234386.1
申请日：2009-11-24
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及“一种快速检测转基因烟草外源基因拷贝数的方法”，属于基因工程领域。人工合成一条95bp中间短截片段，克隆到含有目的基因的植物双元表达载体pCAMBIA-1301，转化至大肠杆菌DH5α菌株，再转化至农杆菌EHA105菌株，PCR检测后获得阳性菌株再转化至烟草‘K326’。将获得的阳性植株，进行PCR扩增，根据扩增获得的片段‘SSR-168’和‘SSR-95’电泳条带的亮度比较就可以确定与片段‘SSR-95’一同转入的外源基因的拷贝数。本发明只需采用一对SSR特异引物对转基因植物进行PCR检测，就可以快速检测转基因株系的拷贝数，简单易行，尤其是对插入单拷贝和双拷贝外源基因株系的检测。
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公开(公告)号：CN101418350A
公开(公告)日：2009-04-29
申请号：CN200810155215.5
申请日：2008-10-28
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及“超低温技术脱除草莓轻型黄边病毒(SMYEV)的方法”，属于生物工程领域。在病毒脱除过程中，预培养蔗糖浓度为0.5mol/L，处理3d；装载处理为25℃，60min；玻璃化处理为0℃，120min；液氮处理60min后，进行40℃水浴2min，草莓茎尖的存活率为76％，草莓轻型黄边病毒的脱毒率达到95％。只有通过液氮处理才可以脱除该病毒，液氮处理前的玻璃化处理脱毒率为0％。与茎尖培养脱毒法和热处理脱毒法等传统的脱毒法相比，超低温脱毒法不仅脱毒率很高，而且简单易行，便于操作，更不需要昂贵的仪器。从而为草莓无毒苗的示范推广及其产业化提供强有力的技术支持。
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公开(公告)号：CN1952161A
公开(公告)日：2007-04-25
申请号：CN200610085396.X
申请日：2006-06-13
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明“一种利用超声波提高农杆菌介导的苹果属植物转化效率的方法”属于生物工程育种领域。将苹果属八棱海棠叶片切成小块在OD600为0.6且含有75mg.L－1As的农杆菌悬浮液中浸泡2分钟后，用功率为100w的超声波处理后，转移到再生培养基上进行抗性筛选，转化八棱海棠叶片，得到抗性愈伤组织和抗性苗，转化率为2.2％。本发明首次将超声波技术应用在苹果属植物的遗传转化上，大大提高了苹果属植物转基因的效率。应用超声波辅助农杆菌介导法转导rolC基因转化苹果砧木八棱海棠，分别获得了2.2％的转化效率，均大大高于普通农杆菌介导法0.1～0.8％的转化效率。
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