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公开(公告)号：CN101418350A
公开(公告)日：2009-04-29
申请号：CN200810155215.5
申请日：2008-10-28
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及“超低温技术脱除草莓轻型黄边病毒(SMYEV)的方法”，属于生物工程领域。在病毒脱除过程中，预培养蔗糖浓度为0.5mol/L，处理3d；装载处理为25℃，60min；玻璃化处理为0℃，120min；液氮处理60min后，进行40℃水浴2min，草莓茎尖的存活率为76％，草莓轻型黄边病毒的脱毒率达到95％。只有通过液氮处理才可以脱除该病毒，液氮处理前的玻璃化处理脱毒率为0％。与茎尖培养脱毒法和热处理脱毒法等传统的脱毒法相比，超低温脱毒法不仅脱毒率很高，而且简单易行，便于操作，更不需要昂贵的仪器。从而为草莓无毒苗的示范推广及其产业化提供强有力的技术支持。
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公开(公告)号：CN102787123B
公开(公告)日：2014-06-11
申请号：CN201210222829.7
申请日：2012-06-29
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于基因工程领域，公开了湖北海棠MhSGT1a基因及其应用。‘湖北海棠’MhSGT1a基因，核苷酸序列如SEQIDNO.1。所述的MhSGT1a基因在创制耐低温新种质和/或植物品种改良中的应用。本发明首次从‘湖北海棠’克隆得到了一个新的MhSGT1a基因，该基因与大麦、烟草、水稻、马铃薯、小麦、中间偃麦草、拟南芥的同源性分别为66.34%、71%、63.59%、69.38%、61.36%、62.93%、62.98%。MhSGT1a转基因烟草具有较强的抵御低温胁迫的能力，植株可在4℃低温条件下正常生长长达24h，同时也证明了MhSGT1a基因具有提高植物抗寒能力的功能。
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公开(公告)号：CN102121031A
公开(公告)日：2011-07-13
申请号：CN201010598338.3
申请日：2010-12-21
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于生物工程育种领域，公开了利用口蹄疫病毒2A序列构建植物三价融合基因表达载体的方法。该方法包含如下步骤：(1)序列分析引物合成，(2)MhTGA2、MhNPR1、MhChit1基因的扩增及其酶切，(3)合成含有口蹄疫病毒2A序列的两条序列，(4)植物双元表达载体的改造，(5)中间载体的构建，(6)植物三价双元表达载体的构建。通过本发明构建方法进行三价或者多价融合表达载体构建，大大提高了载体构建成功的概率，可以很大程度上缩小工作量，节约构建载体的时间，对今后通过多基因遗传转化改良品种具有重要意义。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102787123A
公开(公告)日：2012-11-21
申请号：CN201210222829.7
申请日：2012-06-29
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于基因工程领域，公开了湖北海棠MhSGT1a基因及其应用。“湖北海棠”MhSGT1a基因，核苷酸序列如SEQ ID NO.1。所述的MhSGT1a基因在创制耐低温新种质和/或植物品种改良中的应用。本发明首次从“湖北海棠”克隆得到了一个新的MhSGT1a基因，该基因与大麦、烟草、水稻、马铃薯、小麦、中间偃麦草、拟南芥的同源性分别为66.34%、71%、63.59%、69.38%、61.36%、62.93%、62.98%。MhSGT1a转基因烟草具有较强的抵御低温胁迫的能力，植株可在4℃低温条件下正常生长长达24h，同时也证明了MhSGT1a基因具有提高植物抗寒能力的功能。
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公开(公告)号：CN102776224A
公开(公告)日：2012-11-14
申请号：CN201210222766.5
申请日：2012-06-29
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于基因工程领域，公开了湖北海棠MhSGT1b基因的应用。受低温胁迫的诱导，MhSGT1b在植物中过量表达；在植物受到低温胁迫时，过量表达的MhSGT1b可诱导NtRbohD基因在植株中高水平表达、增强NtPIN1基因和NtSOD基因表达、短暂增强NtSPS的表达水平，从而共同抵御胁迫。MhSGT1b转基因烟草具有较强的抵御低温胁迫的能力，植株可在4℃低温条件下正常生长长达24h，同时也证明了MhSGT1b基因具有提高植物抗寒能力的功能。因此，MhSGT1b基因及含有所述的MhSGT1b基因的重组表达载体可在创制耐低温新种质和/或植物品种改良中应用。
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公开(公告)号：CN101418350B
公开(公告)日：2011-06-15
申请号：CN200810155215.5
申请日：2008-10-28
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及“超低温技术脱除草莓轻型黄边病毒(SMYEV)的方法”，属于生物工程领域。在病毒脱除过程中，预培养蔗糖浓度为0.5mol/L，处理3d；装载处理为25℃，60min；玻璃化处理为0℃，120min；液氮处理60min后，进行40℃水浴2min，草莓茎尖的存活率为76％，草莓轻型黄边病毒的脱毒率达到95％。只有通过液氮处理才可以脱除该病毒，液氮处理前的玻璃化处理脱毒率为0％。与茎尖培养脱毒法和热处理脱毒法等传统的脱毒法相比，超低温脱毒法不仅脱毒率很高，而且简单易行，便于操作，更不需要昂贵的仪器。从而为草莓无毒苗的示范推广及其产业化提供强有力的技术支持。
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公开(公告)号：CN102776224B
公开(公告)日：2014-05-21
申请号：CN201210222766.5
申请日：2012-06-29
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于基因工程领域，公开了湖北海棠MhSGT1b基因的应用。受低温胁迫的诱导，MhSGT1b在植物中过量表达；在植物受到低温胁迫时，过量表达的MhSGT1b可诱导NtRbohD基因在植株中高水平表达、增强NtPIN1基因和NtSOD基因表达、短暂增强NtSPS的表达水平，从而共同抵御胁迫。MhSGT1b转基因烟草具有较强的抵御低温胁迫的能力，植株可在4℃低温条件下正常生长长达24h，同时也证明了MhSGT1b基因具有提高植物抗寒能力的功能。因此，MhSGT1b基因及含有所述的MhSGT1b基因的重组表达载体可在创制耐低温新种质和/或植物品种改良中应用。
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公开(公告)号：CN102115742A
公开(公告)日：2011-07-06
申请号：CN201010585828.X
申请日：2010-12-14
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N15/10
Abstract: 本发明属于生物技术领域，公开了一种植物中总核酸的同步提取方法。将生物材料粉碎后与CTAB裂解液混合，水浴45-60min，加入与CTAB裂解液等体积的由氯仿和异戊醇组成的混合试剂，混匀；离心，取上清，加入等体积的由水饱和酚、氯仿及异戊醇组成的混合试剂，混匀；离心，取上清，加入1/30体积的NaAc和1/10体积的无水乙醇，混匀，在冰上静置5min后，再加入等体积的由氯仿和异戊醇组成的混合试剂；离心，取上清，加入1/10体积的NaAc和两倍体积的无水乙醇，-20℃静置1h；离心，弃上清，用70％的乙醇洗涤沉淀1～5次，干燥得到包含基因组DNA和总RNA的总核酸。该发明同步提取烟草总核酸，对于今后开展基因克隆、表达分析等一系列分子生物学研究具有非常重要的意义。
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