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公开(公告)号：CN101717825B
公开(公告)日：2012-05-23
申请号：CN200910234386.1
申请日：2009-11-24
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及“一种快速检测转基因烟草外源基因拷贝数的方法”，属于基因工程领域。人工合成一条95bp中间短截片段，克隆到含有目的基因的植物双元表达载体pCAMBIA-1301，转化至大肠杆菌DH5α菌株，再转化至农杆菌EHA105菌株，PCR检测后获得阳性菌株再转化至烟草‘K326’。将获得的阳性植株，进行PCR扩增，根据扩增获得的片段‘SSR-168’和‘SSR-95’电泳条带的亮度比较就可以确定与片段‘SSR-95’一同转入的外源基因的拷贝数。本发明只需采用一对SSR特异引物对转基因植物进行PCR检测，就可以快速检测转基因株系的拷贝数，简单易行，尤其是对插入单拷贝和双拷贝外源基因株系的检测。
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公开(公告)号：CN101418350A
公开(公告)日：2009-04-29
申请号：CN200810155215.5
申请日：2008-10-28
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及“超低温技术脱除草莓轻型黄边病毒(SMYEV)的方法”，属于生物工程领域。在病毒脱除过程中，预培养蔗糖浓度为0.5mol/L，处理3d；装载处理为25℃，60min；玻璃化处理为0℃，120min；液氮处理60min后，进行40℃水浴2min，草莓茎尖的存活率为76％，草莓轻型黄边病毒的脱毒率达到95％。只有通过液氮处理才可以脱除该病毒，液氮处理前的玻璃化处理脱毒率为0％。与茎尖培养脱毒法和热处理脱毒法等传统的脱毒法相比，超低温脱毒法不仅脱毒率很高，而且简单易行，便于操作，更不需要昂贵的仪器。从而为草莓无毒苗的示范推广及其产业化提供强有力的技术支持。
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公开(公告)号：CN1944656A
公开(公告)日：2007-04-11
申请号：CN200610085395.5
申请日：2006-06-13
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N15/87
Abstract: 本发明“一种利用超声波直接转化苹果属植物获得转基因苗木的方法”属于生物工程育种领域。超声波直接转化法是将苹果属八棱海棠叶片切成小块在含有5％DMSO和20μl·ml－1质粒DNA的超声波缓冲液中用功率为80w的超声波处理后，放在再生培养基上培养进行抗性筛选，在超声波最佳处理条件下转化486个八棱海棠叶片，共得到237个抗性愈伤组织和9株抗性苗，转化率为1.85％，大大高于普通农杆菌介导法0.1～0.8％的转化效率。GUS染色、PCR及Southernblotting检测结果显示，有8个八棱海棠株系的基因组中整合了完整的外源rolC基因。
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公开(公告)号：CN113994844A
公开(公告)日：2022-02-01
申请号：CN202111307088.8
申请日：2021-11-05
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种葡萄WH垂枝型的整形修剪技术，该整形修剪技术步骤如下：a、定植当年，苗木萌芽后选留两个新稍生长后、选一个生长健壮的新稍生长；b、生长健壮的新稍生长后摘心作为主干，且摘心时留两个副稍培养形成两个臂的主枝；c、主枝继续生长远离主干L后摘心，且摘心时留两个二级副稍培养作结果母枝；d、主枝的延长枝再继续生长1.9L～2.05L后摘心，且摘心时留两个二级副稍培养作结果母枝；e、结果母枝每隔6片叶摘心，结果母枝上的三级副稍培养成为结果枝；f、结果枝长到80～95cm时，将枝条垂直放下架面向下生长。本发明的整形修剪技术简单、便捷，能够实现配套栽培技术、模式、产品质量控制的程序化、标准化。
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公开(公告)号：CN102121031A
公开(公告)日：2011-07-13
申请号：CN201010598338.3
申请日：2010-12-21
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于生物工程育种领域，公开了利用口蹄疫病毒2A序列构建植物三价融合基因表达载体的方法。该方法包含如下步骤：(1)序列分析引物合成，(2)MhTGA2、MhNPR1、MhChit1基因的扩增及其酶切，(3)合成含有口蹄疫病毒2A序列的两条序列，(4)植物双元表达载体的改造，(5)中间载体的构建，(6)植物三价双元表达载体的构建。通过本发明构建方法进行三价或者多价融合表达载体构建，大大提高了载体构建成功的概率，可以很大程度上缩小工作量，节约构建载体的时间，对今后通过多基因遗传转化改良品种具有重要意义。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN1860857A
公开(公告)日：2006-11-15
申请号：CN200610085257.7
申请日：2006-06-07
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及魏可葡萄无核处理方法，适用于魏可葡萄无核处理。选择魏可葡萄树于盛花期进行无核处理；处理前先进行花序修剪、整穗，保留15～17段小穗，处理赤霉素浓度为40mg.L－1～60mg.L－1，处理后常规管理；盛花后第2周，用浓度为20mg.L－1～30mg.L－1的赤霉素处理一次。本发明所提供的无核处理方法培育的魏可葡萄不但无核率达到了100％，而且单粒重提高20％以上，通过GA3对魏可葡萄的无核化处理，生产无核、大粒的鲜食葡萄有很大的市场前景，可取得可观的经济效益。
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公开(公告)号：CN113711826A
公开(公告)日：2021-11-30
申请号：CN202111164119.9
申请日：2021-09-30
Applicant: 南京农业大学
IPC: A01G13/02
Abstract: 本发明公开了一种无拱管轻简化葡萄避雨设施，该避雨设施至少包括一避雨单元，避雨单元包括至少四个作为四角的边杆（2），边杆（2）的中上部采用低横杆（5）固定连接且边杆（2）的顶部采用高横杆（6）连接，在低横杆（5）的上侧设置有两端固定在对应边杆（2）上的压膜槽（10），覆盖在高横杆（6）上的塑料薄膜的四边分别固定在对应的压膜槽（10）上；所述的边杆（2）、低横杆（5）、高横杆（6）皆采用镀锌钢管且低横杆（5）的长度不超过2.5m。本发明的避雨设施采用小跨度镀锌钢管组装，安装简单快速且劳动量小，坚固耐用、寿命长且造价低廉，搭建成的避雨设施不易造成局部温度过高，减少其对植株和果实生长的影响。
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公开(公告)号：CN102115742A
公开(公告)日：2011-07-06
申请号：CN201010585828.X
申请日：2010-12-14
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N15/10
Abstract: 本发明属于生物技术领域，公开了一种植物中总核酸的同步提取方法。将生物材料粉碎后与CTAB裂解液混合，水浴45-60min，加入与CTAB裂解液等体积的由氯仿和异戊醇组成的混合试剂，混匀；离心，取上清，加入等体积的由水饱和酚、氯仿及异戊醇组成的混合试剂，混匀；离心，取上清，加入1/30体积的NaAc和1/10体积的无水乙醇，混匀，在冰上静置5min后，再加入等体积的由氯仿和异戊醇组成的混合试剂；离心，取上清，加入1/10体积的NaAc和两倍体积的无水乙醇，-20℃静置1h；离心，弃上清，用70％的乙醇洗涤沉淀1～5次，干燥得到包含基因组DNA和总RNA的总核酸。该发明同步提取烟草总核酸，对于今后开展基因克隆、表达分析等一系列分子生物学研究具有非常重要的意义。
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公开(公告)号：CN113711826B
公开(公告)日：2024-12-27
申请号：CN202111164119.9
申请日：2021-09-30
Applicant: 南京农业大学
IPC: A01G13/02
Abstract: 本发明公开了一种无拱管轻简化葡萄避雨设施，该避雨设施至少包括一避雨单元，避雨单元包括至少四个作为四角的边杆（2），边杆（2）的中上部采用低横杆（5）固定连接且边杆（2）的顶部采用高横杆（6）连接，在低横杆（5）的上侧设置有两端固定在对应边杆（2）上的压膜槽（10），覆盖在高横杆（6）上的塑料薄膜的四边分别固定在对应的压膜槽（10）上；所述的边杆（2）、低横杆（5）、高横杆（6）皆采用镀锌钢管且低横杆（5）的长度不超过2.5m。本发明的避雨设施采用小跨度镀锌钢管组装，安装简单快速且劳动量小，坚固耐用、寿命长且造价低廉，搭建成的避雨设施不易造成局部温度过高，减少其对植株和果实生长的影响。
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公开(公告)号：CN101418350B
公开(公告)日：2011-06-15
申请号：CN200810155215.5
申请日：2008-10-28
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及“超低温技术脱除草莓轻型黄边病毒(SMYEV)的方法”，属于生物工程领域。在病毒脱除过程中，预培养蔗糖浓度为0.5mol/L，处理3d；装载处理为25℃，60min；玻璃化处理为0℃，120min；液氮处理60min后，进行40℃水浴2min，草莓茎尖的存活率为76％，草莓轻型黄边病毒的脱毒率达到95％。只有通过液氮处理才可以脱除该病毒，液氮处理前的玻璃化处理脱毒率为0％。与茎尖培养脱毒法和热处理脱毒法等传统的脱毒法相比，超低温脱毒法不仅脱毒率很高，而且简单易行，便于操作，更不需要昂贵的仪器。从而为草莓无毒苗的示范推广及其产业化提供强有力的技术支持。
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