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公开(公告)号：CN104152468A
公开(公告)日：2014-11-19
申请号：CN201410243418.5
申请日：2014-06-03
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于基因工程领域，涉及‘南通小方柿’DkGA2ox1基因及其表达载体和应用。本发明首次从‘南通小方柿’克隆得到了一个新的DkGA2ox1基因，将其导入烟草，DkGA2ox1在烟草中过量表达；DkGA2ox1转基因烟草具有较强的矮化能力，可使植株矮化至野生型植株的41.54％。
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公开(公告)号：CN101717825B
公开(公告)日：2012-05-23
申请号：CN200910234386.1
申请日：2009-11-24
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及“一种快速检测转基因烟草外源基因拷贝数的方法”，属于基因工程领域。人工合成一条95bp中间短截片段，克隆到含有目的基因的植物双元表达载体pCAMBIA-1301，转化至大肠杆菌DH5α菌株，再转化至农杆菌EHA105菌株，PCR检测后获得阳性菌株再转化至烟草‘K326’。将获得的阳性植株，进行PCR扩增，根据扩增获得的片段‘SSR-168’和‘SSR-95’电泳条带的亮度比较就可以确定与片段‘SSR-95’一同转入的外源基因的拷贝数。本发明只需采用一对SSR特异引物对转基因植物进行PCR检测，就可以快速检测转基因株系的拷贝数，简单易行，尤其是对插入单拷贝和双拷贝外源基因株系的检测。
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公开(公告)号：CN101418350A
公开(公告)日：2009-04-29
申请号：CN200810155215.5
申请日：2008-10-28
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及“超低温技术脱除草莓轻型黄边病毒(SMYEV)的方法”，属于生物工程领域。在病毒脱除过程中，预培养蔗糖浓度为0.5mol/L，处理3d；装载处理为25℃，60min；玻璃化处理为0℃，120min；液氮处理60min后，进行40℃水浴2min，草莓茎尖的存活率为76％，草莓轻型黄边病毒的脱毒率达到95％。只有通过液氮处理才可以脱除该病毒，液氮处理前的玻璃化处理脱毒率为0％。与茎尖培养脱毒法和热处理脱毒法等传统的脱毒法相比，超低温脱毒法不仅脱毒率很高，而且简单易行，便于操作，更不需要昂贵的仪器。从而为草莓无毒苗的示范推广及其产业化提供强有力的技术支持。
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公开(公告)号：CN1952161A
公开(公告)日：2007-04-25
申请号：CN200610085396.X
申请日：2006-06-13
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明“一种利用超声波提高农杆菌介导的苹果属植物转化效率的方法”属于生物工程育种领域。将苹果属八棱海棠叶片切成小块在OD600为0.6且含有75mg.L－1As的农杆菌悬浮液中浸泡2分钟后，用功率为100w的超声波处理后，转移到再生培养基上进行抗性筛选，转化八棱海棠叶片，得到抗性愈伤组织和抗性苗，转化率为2.2％。本发明首次将超声波技术应用在苹果属植物的遗传转化上，大大提高了苹果属植物转基因的效率。应用超声波辅助农杆菌介导法转导rolC基因转化苹果砧木八棱海棠，分别获得了2.2％的转化效率，均大大高于普通农杆菌介导法0.1～0.8％的转化效率。
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公开(公告)号：CN118406787A
公开(公告)日：2024-07-30
申请号：CN202410506473.2
申请日：2024-04-25
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6858 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种鉴定苹果果糖含量的dCAPS分子标记及应用。与苹果果肉果糖含量相关的dCAPS分子标记，包含特异性检测苹果基因组第15号染色体全长序列的第15,484,856位的SNP位点，SNP的变异位点为C/A；所述dCAPS分子标记的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。所述dCAPS分子标记的引物对特异性正向引物如SEQ ID NO:2所示；特异性反向引物如SEQ ID NO:3所示。本发明开发出的dCAPS分子标记可以用于苗期鉴定苹果果实果糖含量高低这一特性。利用该标记方法不仅节约了田间育种成本，同时缩短了育种周期，加速了苹果育种进程。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102499270B
公开(公告)日：2014-02-12
申请号：CN201110322351.0
申请日：2011-10-21
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种果梅果实浸提液的提取方法和应用，属于农业微生物病害防治领域，该方法包括：将成熟果梅果实的果肉榨成匀浆，加入有机溶剂浸提得到浸提液，将浸提液在低于100℃温度下加热后离心取上清液得到果梅果实浸提液。本发明还公开了一种用上述方法制得的果梅抑菌剂。本发明还公开了上述果梅抑菌剂在真菌抑制上的应用。
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公开(公告)号：CN102115742A
公开(公告)日：2011-07-06
申请号：CN201010585828.X
申请日：2010-12-14
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N15/10
Abstract: 本发明属于生物技术领域，公开了一种植物中总核酸的同步提取方法。将生物材料粉碎后与CTAB裂解液混合，水浴45-60min，加入与CTAB裂解液等体积的由氯仿和异戊醇组成的混合试剂，混匀；离心，取上清，加入等体积的由水饱和酚、氯仿及异戊醇组成的混合试剂，混匀；离心，取上清，加入1/30体积的NaAc和1/10体积的无水乙醇，混匀，在冰上静置5min后，再加入等体积的由氯仿和异戊醇组成的混合试剂；离心，取上清，加入1/10体积的NaAc和两倍体积的无水乙醇，-20℃静置1h；离心，弃上清，用70％的乙醇洗涤沉淀1～5次，干燥得到包含基因组DNA和总RNA的总核酸。该发明同步提取烟草总核酸，对于今后开展基因克隆、表达分析等一系列分子生物学研究具有非常重要的意义。
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公开(公告)号：CN102499270A
公开(公告)日：2012-06-20
申请号：CN201110322351.0
申请日：2011-10-21
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种果梅果实浸提液的提取方法和应用，属于农业微生物病害防治领域，该方法包括：将成熟果梅果实的果肉榨成匀浆，加入有机溶剂浸提得到浸提液，将浸提液在低于100℃温度下加热后离心取上清液得到果梅果实浸提液。本发明还公开了一种用上述方法制得的果梅抑菌剂。本发明还公开了上述果梅抑菌剂在真菌抑制上的应用。
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公开(公告)号：CN102121031A
公开(公告)日：2011-07-13
申请号：CN201010598338.3
申请日：2010-12-21
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于生物工程育种领域，公开了利用口蹄疫病毒2A序列构建植物三价融合基因表达载体的方法。该方法包含如下步骤：(1)序列分析引物合成，(2)MhTGA2、MhNPR1、MhChit1基因的扩增及其酶切，(3)合成含有口蹄疫病毒2A序列的两条序列，(4)植物双元表达载体的改造，(5)中间载体的构建，(6)植物三价双元表达载体的构建。通过本发明构建方法进行三价或者多价融合表达载体构建，大大提高了载体构建成功的概率，可以很大程度上缩小工作量，节约构建载体的时间，对今后通过多基因遗传转化改良品种具有重要意义。
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公开(公告)号：CN100523201C
公开(公告)日：2009-08-05
申请号：CN200610085396.X
申请日：2006-06-13
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明“一种利用超声波提高农杆菌介导的苹果属植物转化效率的方法”属于生物工程育种领域。将苹果属八棱海棠叶片切成小块在OD600为0.6且含有75mg.L-1As的农杆菌悬浮液中浸泡2分钟后，用功率为100w的超声波处理后，转移到再生培养基上进行抗性筛选，转化八棱海棠叶片，得到抗性愈伤组织和抗性苗，转化率为2.2%。本发明首次将超声波技术应用在苹果属植物的遗传转化上，大大提高了苹果属植物转基因的效率。应用超声波辅助农杆菌介导法转导rolC基因转化苹果砧木八棱海棠，分别获得了2.2%的转化效率，均大大高于普通农杆菌介导法0.1～0.8%的转化效率。
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