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公开(公告)号：CN115894109A
公开(公告)日：2023-04-04
申请号：CN202210650054.7
申请日：2022-06-10
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明提供一种苹果钙肥及其使用方法和应用，所述苹果钙肥包括1.0mg/L2,4‑表油菜素内酯(EBR)和1g/L CaCl2。使用时，将所述的苹果钙肥在苹果幼果期进行整树叶果喷施，以整树聚水而不滴下为度，每周一次，一共处理5次；每次喷施所用苹果钙肥均现配现用。所述苹果钙肥能够提高苹果品质包括提高单果重量、提高果实可溶性固形物含量、提高果实硬度、提高果实可溶性糖含量、提高果实总花青苷含量、提高果实着色、提高叶片中钙含量、提高果皮中钙含量、提高果肉中钙含量，进而促进苹果果实维持正常生理活动以及抵御生物或非生物胁迫。
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公开(公告)号：CN113584024B
公开(公告)日：2023-05-26
申请号：CN202110797328.0
申请日：2021-07-14
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/82 , A01H5/00 , A01H6/74
Abstract: 本发明属于基因工程领域，涉及‘小金海棠’Mx‑miR175‑5p基因及其应用。‘小金海棠’Mx‑miR175‑5p，其前体序列如SEQ ID NO.1所示，其编码基因序列如SEQ ID NO.2所示。本发明首次从‘小金海棠’鉴定到一个新的Mx‑miR175‑5p基因，RLM‑5’RACE验证其靶基因是BTB4蛋白；通过转基因技术，发现过表达Mx‑miR175‑5p能够提高苹果愈伤组织的铁III还原酶活性及铁吸收和转运相关基因的表达，说明其能够调节苹果对铁的吸收和转运能力，提升对缺铁胁迫的耐受性。因此，可利用其培育出具有高抗缺铁能力的转基因苹果。
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公开(公告)号：CN110749699A
公开(公告)日：2020-02-04
申请号：CN201910956514.7
申请日：2019-10-10
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种从白沙枇杷实生苗筛选三倍体新种质的方法。该方法包含(1)通过形态学观测，根据白沙枇杷三倍的形态学特征从实生苗群体中初筛三倍体，满足以下条件的为疑似白沙枇杷三倍体；(2)通过流式细胞仪进一步鉴定疑似沙枇杷三倍体白的倍性。本发明溶液配制简单，操作步骤易上手筛选成功率高，结果可靠，与目前应用在枇杷流式倍性筛选上的其他方法相比优势明显。与传统的染色体计数技术相比，应用该方法筛选效率可以提高4-5倍。通过本发明方法，能实现白沙枇杷三倍体实生苗的大规模快速鉴定。
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公开(公告)号：CN104560727A
公开(公告)日：2015-04-29
申请号：CN201410803330.4
申请日：2014-12-22
Applicant: 南京农业大学
CPC classification number: C12N1/14
Abstract: 本发明属于试验研究领域，提供一种斑点落叶病菌侵染苹果叶片的方法，专用于感染斑点落叶病苹果叶片的获得。该方法包括如下步骤(1)供试材料的处理；(2)斑点落叶病菌的处理；(3)侵染处理；(4)感病材料获得。本发明直接使用斑点落叶病菌丝块进行侵染，解决了传统的孢子侵染萌发率低而导致侵染效率低的问题，本发明提供的斑点落叶病菌只需接种培养七天左右，即可直接侵染苹果叶片，使苹果叶片感病，发病快，建立了高效、稳定获得不同苹果品种感病材料的方法。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN101717825B
公开(公告)日：2012-05-23
申请号：CN200910234386.1
申请日：2009-11-24
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及“一种快速检测转基因烟草外源基因拷贝数的方法”，属于基因工程领域。人工合成一条95bp中间短截片段，克隆到含有目的基因的植物双元表达载体pCAMBIA-1301，转化至大肠杆菌DH5α菌株，再转化至农杆菌EHA105菌株，PCR检测后获得阳性菌株再转化至烟草‘K326’。将获得的阳性植株，进行PCR扩增，根据扩增获得的片段‘SSR-168’和‘SSR-95’电泳条带的亮度比较就可以确定与片段‘SSR-95’一同转入的外源基因的拷贝数。本发明只需采用一对SSR特异引物对转基因植物进行PCR检测，就可以快速检测转基因株系的拷贝数，简单易行，尤其是对插入单拷贝和双拷贝外源基因株系的检测。
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公开(公告)号：CN1944656A
公开(公告)日：2007-04-11
申请号：CN200610085395.5
申请日：2006-06-13
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N15/87
Abstract: 本发明“一种利用超声波直接转化苹果属植物获得转基因苗木的方法”属于生物工程育种领域。超声波直接转化法是将苹果属八棱海棠叶片切成小块在含有5％DMSO和20μl·ml－1质粒DNA的超声波缓冲液中用功率为80w的超声波处理后，放在再生培养基上培养进行抗性筛选，在超声波最佳处理条件下转化486个八棱海棠叶片，共得到237个抗性愈伤组织和9株抗性苗，转化率为1.85％，大大高于普通农杆菌介导法0.1～0.8％的转化效率。GUS染色、PCR及Southernblotting检测结果显示，有8个八棱海棠株系的基因组中整合了完整的外源rolC基因。
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公开(公告)号：CN118406787A
公开(公告)日：2024-07-30
申请号：CN202410506473.2
申请日：2024-04-25
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6858 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种鉴定苹果果糖含量的dCAPS分子标记及应用。与苹果果肉果糖含量相关的dCAPS分子标记，包含特异性检测苹果基因组第15号染色体全长序列的第15,484,856位的SNP位点，SNP的变异位点为C/A；所述dCAPS分子标记的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。所述dCAPS分子标记的引物对特异性正向引物如SEQ ID NO:2所示；特异性反向引物如SEQ ID NO:3所示。本发明开发出的dCAPS分子标记可以用于苗期鉴定苹果果实果糖含量高低这一特性。利用该标记方法不仅节约了田间育种成本，同时缩短了育种周期，加速了苹果育种进程。
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公开(公告)号：CN104404156B
公开(公告)日：2017-05-17
申请号：CN201410742192.3
申请日：2014-12-08
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于分子标记领域，提供一种枇杷自交亲和Si分子标记，自交亲和标记引物和自交亲和品种快速鉴定方法。该Si分子标记序列如SEQ ID NO.1所示，大小为830bp，标记引物AS‑PCR序列：正向引物如SEQ ID NO.2；反向引物如SEQ ID NO.3所示。鉴定方法以Si作为分子标记，以标记引物AS‑PCR扩增不同枇杷品种DNA，筛选，可扩增出830bp片段的标志着Si分子标记的存在，说明该枇杷品种为自交亲和品种。本方法能快速鉴定枇杷自交亲和品种，不需要配置授粉树或进行人工授粉，可大大节约成本；不易受外界因素影响，精确度大，打破了传统方法的局限性，对提高枇杷的产量和品质有很大意义。
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公开(公告)号：CN102115742A
公开(公告)日：2011-07-06
申请号：CN201010585828.X
申请日：2010-12-14
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N15/10
Abstract: 本发明属于生物技术领域，公开了一种植物中总核酸的同步提取方法。将生物材料粉碎后与CTAB裂解液混合，水浴45-60min，加入与CTAB裂解液等体积的由氯仿和异戊醇组成的混合试剂，混匀；离心，取上清，加入等体积的由水饱和酚、氯仿及异戊醇组成的混合试剂，混匀；离心，取上清，加入1/30体积的NaAc和1/10体积的无水乙醇，混匀，在冰上静置5min后，再加入等体积的由氯仿和异戊醇组成的混合试剂；离心，取上清，加入1/10体积的NaAc和两倍体积的无水乙醇，-20℃静置1h；离心，弃上清，用70％的乙醇洗涤沉淀1～5次，干燥得到包含基因组DNA和总RNA的总核酸。该发明同步提取烟草总核酸，对于今后开展基因克隆、表达分析等一系列分子生物学研究具有非常重要的意义。
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