公开(公告)号：CN107667857A

公开(公告)日：2018-02-09

申请号：CN201710920265.7

申请日：2017-09-30

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 高志红 ,  李艳林 ,  渠慎春 ,  栾雨婷

IPC: A01H4/00

CPC classification number: A01H4/001 ,  A01H4/008

Abstract: 本发明公开一种茎尖玻璃化超低温脱除苹果病毒的方法，包括以下步骤：(1)携带病毒无菌组培苗的获得；(2)继代扩繁培养；(3)茎尖玻璃化超低温处理脱毒：取继代扩繁培养后的组培苗，切取茎尖，接种于预培养基上进行预培养；将预培养过的茎尖放在装载溶液中，20～25℃条件下装载5～120min；然后转至PVS-2溶液中，0～2℃下进行5～150min PVS-2玻璃化处理；然后进行液氮冷冻处理；最后进行水浴解冻处理；将解冻处理后的茎尖放入MS+1.2mol/L的蔗糖溶液中浸泡处理；(4)后期增殖扩繁培养。本发明的优点在于：①使脱毒效率大为提高，操作简单，快速有效；②提供了从材料选取到获得无病毒茎尖再生植株整个详细过程的高效技术体系；③具有很好的技术效果和推广前景。

公开(公告)号：CN107667857B

公开(公告)日：2020-12-01

申请号：CN201710920265.7

申请日：2017-09-30

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 高志红 ,  李艳林 ,  渠慎春 ,  栾雨婷

IPC: A01H4/00

Abstract: 本发明公开一种茎尖玻璃化超低温脱除苹果病毒的方法，包括以下步骤：(1)携带病毒无菌组培苗的获得；(2)继代扩繁培养；(3)茎尖玻璃化超低温处理脱毒：取继代扩繁培养后的组培苗，切取茎尖，接种于预培养基上进行预培养；将预培养过的茎尖放在装载溶液中，20～25℃条件下装载5～120min；然后转至PVS‑2溶液中，0～2℃下进行5～150min PVS‑2玻璃化处理；然后进行液氮冷冻处理；最后进行水浴解冻处理；将解冻处理后的茎尖放入MS+1.2mol/L的蔗糖溶液中浸泡处理；(4)后期增殖扩繁培养。本发明的优点在于：①使脱毒效率大为提高，操作简单，快速有效；②提供了从材料选取到获得无病毒茎尖再生植株整个详细过程的高效技术体系；③具有很好的技术效果和推广前景。