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公开(公告)号:CN113699056B
公开(公告)日:2023-08-04
申请号:CN202010446781.2
申请日:2020-05-22
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种具有镰刀菌毒素脱毒活性的脱亚硫酸菌PGC‑3‑9,该菌株的保藏编号为CCTCC NO:M 2020135。接种菌株PGC‑3‑9到含有镰刀菌毒素的培养基中,菌株能够快速完全去除培养基中的毒素,利用气相色谱质谱联用仪分析代谢物,发现镰刀菌毒素的毒性基团环氧结构被打开,形成各自对应的脱环氧形式;粮油产品脱毒效率分析证实,该菌株在有氧和无氧条件下均能快速去除小麦粉中的镰刀菌毒素DON。因此,该菌株在镰刀菌毒素脱毒领域具有广泛的应用前景。
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公开(公告)号:CN114645047A
公开(公告)日:2022-06-21
申请号:CN202011513351.4
申请日:2020-12-18
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/80 , A01N57/16 , A01P3/00 , C12R1/77
Abstract: 本发明公开了一种利用RNAi技术提高植物抗赤霉病的方法,根据几丁质合酶基因Chs7、蛋白激酶C基因Pkc和二型肌球蛋白基因Myo2筛选RNAi干扰区段,成功构建了4个用于抑制镰刀菌致病力的RNAi载体,将RNAi载体分别转化镰刀菌后,发现镰刀菌在生长、发育以及致病力等方面受到不同程度的抑制,这4个RNAi干扰片段对应的dsRNA能在体外抑制镰刀菌孢子生长,经dsRNA处理的小麦对赤霉病的抗性提高。
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公开(公告)号:CN106834337B
公开(公告)日:2020-05-29
申请号:CN201510881572.X
申请日:2015-12-03
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于植物基因工程技术领域,具体涉及利用小麦基因提高拟南芥的DON耐受性和FHB抗性。分离得到一种能够提高拟南芥DON耐受能力和赤霉病抗性的基因TaMetRS。通过筛选小麦悬浮细胞抑制差减杂交cDNA文库及RACE克隆基因全长的方法,从小麦品种中分离得到一个受DON诱导的基因TaMetRS。利用农杆菌介导的遗传转化方法,使该基因在拟南芥中超量表达,提高了转基因拟南芥对DON耐受能力和对赤霉病的抗性,研究证实了该基因作为植物抗赤霉病功能的新用途。该基因的核苷酸序列是SEQ ID NO:1中1‑2186位碱基对应的序列,编码596个氨基酸。该基因编码的蛋白质序列如SEQ ID NO:2所示。
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公开(公告)号:CN104762230B
公开(公告)日:2018-04-10
申请号:CN201510133782.0
申请日:2015-03-26
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于植物病害生物防治技术领域,具体涉及防治作物储藏期黄曲霉菌及毒素的海藻希瓦氏菌及其应用。本发明包含了该海藻希瓦氏菌(Shewanella algae)YM8的鉴定、以及广谱和广温范围内的抑菌作用,同时鉴定了该菌株产生的抑菌气体代谢产物,并进行了抑菌活性分析等。本发明分离的海藻希瓦氏菌YM8保藏在中国典型培养物保藏中心(CCTCC),保藏编号为CCTCC NO:M2015120。本发明还检测了不同水活度的仓储环境下,该菌株YM8在抑制花生与玉米黄曲霉病害与毒素污染中的应用。
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公开(公告)号:CN103555732B
公开(公告)日:2015-11-18
申请号:CN201310477107.0
申请日:2013-10-13
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/13 , C07K16/14 , C12N15/62 , C07K19/00 , C12N5/20 , C12P21/08 , G01N33/68 , C12Q1/04 , C12R1/91
Abstract: 黄曲霉特异性单链抗体的制备方法和应用本发明属于食品有害生物分子检测领域,涉及一种黄曲霉特异单链抗体的制备方法及应用。将黄曲霉菌丝细胞壁蛋白分别免疫鸡和小鼠,提取免疫后的鸡脾脏淋巴细胞的信使RNA,构建鸡源单链抗体文库,通过噬菌体表面展示技术筛选文库后得到了对黄曲霉具有高亲和力的曲霉属特异性单链抗体基因。将该抗体基因亚克隆至碱性磷酸酶蛋白表达载体中并在大肠杆菌中表达纯化,得到融合蛋白和分泌黄曲霉特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞2A8。以单抗为捕获抗体,AfSA4-AP融合蛋白为检测抗体,建立SandWich ELISA免疫学检测系统可检测作物及储藏植物源产品中黄曲霉污染。
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公开(公告)号:CN104762230A
公开(公告)日:2015-07-08
申请号:CN201510133782.0
申请日:2015-03-26
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于植物病害生物防治技术领域,具体涉及防治作物储藏期黄曲霉菌及毒素的海藻希瓦氏菌及其应用。本发明包含了该海藻希瓦氏菌(Shewanella algae)YM8的鉴定、以及广谱和广温范围内的抑菌作用,同时鉴定了该菌株产生的抑菌气体代谢产物,并进行了抑菌活性分析等。本发明分离的海藻希瓦氏菌YM8保藏在中国典型培养物保藏中心(CCTCC),保藏编号为CCTCC NO:M2015120。本发明还检测了不同水活度的仓储环境下,该菌株YM8在抑制花生与玉米黄曲霉病害与毒素污染中的应用。
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公开(公告)号:CN102443590B
公开(公告)日:2014-06-18
申请号:CN201010506095.6
申请日:2010-10-09
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于植物检验检疫技术领域,具体地涉及一种镰刀菌单端孢霉烯族A类毒素的分子鉴定方法。其特征是,针对单端孢霉烯A类毒素,通过Tri13基因信息设计一对特异性引物,从产镰刀菌A类毒素的镰刀菌中分离得到T-2毒素的特异性片段(其长度为470bp),而不产镰刀菌A类毒素的镰刀菌中不能扩增到该特异片段,采用PCR反应,利用琼脂糖凝胶电泳检测产物,直接根据产物片段的有无及大小,即可确定某一镰刀菌是否产T-2毒素。本发明可用于谷物、饲料和食品安全中镰刀菌单端孢霉烯族A类毒素的检测。
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公开(公告)号:CN102492037B
公开(公告)日:2013-10-30
申请号:CN201110407999.8
申请日:2011-12-09
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种高亲和力镰刀菌特异单链抗体及制备方法,其步骤:A、对禾谷镰刀菌细胞壁特异抗体CWP2进行基因突变。B、构建突变抗体文库。C、利用噬菌体展示对突变抗体库进行淘选,富集得到抗体蛋白。D、PhageELISA分析富集的突变体与禾谷镰刀菌细胞壁蛋白的结合能力。E、表达ELISA鉴定步骤D中得到的突变抗体与亲本抗体CWP2对禾谷镰刀菌细胞壁蛋白结合的强弱。F、表达ELISA鉴定为高亲和力的抗体与禾谷镰刀菌细胞壁蛋白做Westernblot分析。G、鉴定为高亲和力的单链抗体与亲本抗体CWP2做表面等离子共振检测,证明高亲和力的单链抗体与禾谷镰刀菌细胞壁蛋白的亲和力是亲本抗体CWP2的15倍。这个高亲和力单链抗体丰富了赤霉病抗源,为培育小麦赤霉病高抗品种奠定了基础。
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公开(公告)号:CN102453092B
公开(公告)日:2013-10-30
申请号:CN201010527093.5
申请日:2010-10-28
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07K16/14 , C12N15/11 , G01N33/569
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域,具体涉及一种抗镰刀菌单链抗体的筛选及其在镰刀菌免疫学检测方面的应用。直接从串珠镰刀菌细胞壁蛋白(CWP)免疫的小鼠脾脏细胞出发,利用分子克隆方法和技术构建单链抗体基因文库,再通过噬菌体展示技术筛选、表达ELISA鉴定及序列测定,最后获得一个高亲和力的抗镰刀菌单链抗体及其编码基因,命名为Fv-chic1F11。该单链抗体在大肠杆菌中进行大量表达纯化后可直接应用于镰刀菌的检测,包括在检测田间作物、饲料或粮食镰刀菌污染中的应用。
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公开(公告)号:CN102453092A
公开(公告)日:2012-05-16
申请号:CN201010527093.5
申请日:2010-10-28
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07K16/14 , C12N15/11 , G01N33/569
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域,具体涉及一种抗镰刀菌单链抗体的筛选及其在镰刀菌免疫学检测方面的应用。直接从串珠镰刀菌细胞壁蛋白(CWP)免疫的小鼠脾脏细胞出发,利用分子克隆方法和技术构建单链抗体基因文库,再通过噬菌体展示技术筛选、表达ELISA鉴定及序列测定,最后获得一个高亲和力的抗镰刀菌单链抗体及其编码基因,命名为Fv-chic1F11。该单链抗体在大肠杆菌中进行大量表达纯化后可直接应用于镰刀菌的检测,包括在检测田间作物、饲料或粮食镰刀菌污染中的应用。
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