公开(公告)号：CN103555732B

公开(公告)日：2015-11-18

申请号：CN201310477107.0

申请日：2013-10-13

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 廖玉才 ,  薛升 ,  李和平

IPC: C12N15/13 ,  C07K16/14 ,  C12N15/62 ,  C07K19/00 ,  C12N5/20 ,  C12P21/08 ,  G01N33/68 ,  C12Q1/04 ,  C12R1/91

Abstract: 黄曲霉特异性单链抗体的制备方法和应用本发明属于食品有害生物分子检测领域，涉及一种黄曲霉特异单链抗体的制备方法及应用。将黄曲霉菌丝细胞壁蛋白分别免疫鸡和小鼠，提取免疫后的鸡脾脏淋巴细胞的信使RNA，构建鸡源单链抗体文库，通过噬菌体表面展示技术筛选文库后得到了对黄曲霉具有高亲和力的曲霉属特异性单链抗体基因。将该抗体基因亚克隆至碱性磷酸酶蛋白表达载体中并在大肠杆菌中表达纯化，得到融合蛋白和分泌黄曲霉特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞2A8。以单抗为捕获抗体，AfSA4-AP融合蛋白为检测抗体，建立SandWich ELISA免疫学检测系统可检测作物及储藏植物源产品中黄曲霉污染。

公开(公告)号：CN103555732A

公开(公告)日：2014-02-05

申请号：CN201310477107.0

申请日：2013-10-13

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 廖玉才 ,  薛升 ,  李和平

IPC: C12N15/13 ,  C07K16/14 ,  C12N15/62 ,  C07K19/00 ,  C12N5/20 ,  C12P21/08 ,  G01N33/68 ,  C12Q1/04 ,  C12R1/91

Abstract: 本发明属于食品有害生物分子检测领域，涉及一种黄曲霉特异单链抗体的制备方法及应用。将黄曲霉菌丝细胞壁蛋白分别免疫鸡和小鼠，提取免疫后的鸡脾脏淋巴细胞的信使RNA，构建鸡源单链抗体文库，通过噬菌体表面展示技术筛选文库后得到了对黄曲霉具有高亲和力的曲霉属特异性单链抗体基因。将该抗体基因亚克隆至碱性磷酸酶蛋白表达载体中并在大肠杆菌中表达纯化，得到融合蛋白和分泌黄曲霉特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞2A8。以单抗为捕获抗体，AfSA4-AP融合蛋白为检测抗体，建立SandWich ELISA免疫学检测系统可检测作物及储藏植物源产品中黄曲霉污染。