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公开(公告)号：CN111925433A
公开(公告)日：2020-11-13
申请号：CN202010764526.2
申请日：2020-07-30
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明涉及红嘴鸥IFNα蛋白克隆表达及多抗制备，属于生物工程技术领域，本发明提供了红嘴鸥IFNα蛋白克隆表达及多抗制备，克隆红嘴鸥α干扰素基因部分片段，构建原核表达重组载体，获得重组蛋白制备多抗，为后期其抗病毒活性，及红嘴鸥α干扰素基因抗病毒机制研究提供理论基础，为红嘴鸥疫病防控另辟新径，对兽医公共卫生也有着较深的影响。在进行免疫兔子时，选择应用弗氏完全佐剂与不完全佐剂配合蛋白注射，可高效快速的制备到多克隆抗体。制备得到的抗体，经琼扩试验验证可知，红嘴鸥IFNα基因部分片段重组蛋白有较好的免疫原性，抗体效价可以达到1：8。可以较好的用于后续红嘴鸥IFNα蛋白抗病毒机制的研究。
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公开(公告)号：CN111892651A
公开(公告)日：2020-11-06
申请号：CN202010750738.5
申请日：2020-07-30
Applicant: 云南农业大学
IPC: C07K14/705 , C07K16/28 , C07K16/06 , C12N15/12 , C12N15/70
Abstract: 本发明涉及红嘴鸥TLR7蛋白克隆表达及多抗制备，属于生物工程技术领域，本发明通过对红嘴鸥疾病免疫相关蛋白TLR7基因进行生物信息学分析、构建原核表达载体制备多克隆抗体，为红嘴鸥TLR7基因的固有免疫作用及机制的深入了解提供依据。本发明制备得到的抗体特异性较强，TLR7基因的多克隆抗体制备为进一步研究TLR7蛋白的功能提供依据。
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公开(公告)号：CN117248044A
公开(公告)日：2023-12-19
申请号：CN202311325058.9
申请日：2023-10-13
Applicant: 云南农业大学
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/42 , C12R1/01
Abstract: 本发明公开了一种用于奶山羊肠道病原菌探针qPCR检测的引物及探针，属于生物技术领域。本发明分别设计了沙门氏菌、产气荚膜梭菌、志贺氏菌的引物对和探针，在本发明所述的反应体系和反应程序下，不仅可以针对产气荚膜梭菌、沙门氏菌和志贺氏菌单一病原菌进行探针qPCR检测，也可针对产气荚膜梭菌、沙门氏菌、志贺氏菌进行三重探针qPCR检测方法，不仅提高了检测效率，且用本发明所述引物，qPCR反应体系和反应程序进行检测时具有更好的特异性，灵敏性，可重复性和稳定性，能更有效的对因细菌造成的奶山羊肠道疾病进行预防。
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公开(公告)号：CN117185906A
公开(公告)日：2023-12-08
申请号：CN202311223093.X
申请日：2023-09-21
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种提高粪肠球菌和无乳链球菌抑制率提取物的制备方法，属于天然成分提取方法技术领域。本发明依次采取60％乙醇溶液或超纯水粗提取、乙酸乙酯作为有机相初步萃取、5:5的乙酸乙酯和石油醚混合物作为有机相再次萃取、制备型高效液相色谱技术分离制备出和厚朴酚提取物和厚朴酚提取物，所述和厚朴酚提取物或厚朴酚提取物中和厚朴酚或厚朴酚与提取物中的其他成分协同改变粪肠球菌和无乳链球菌的细胞膜通透性，影响细菌内部蛋白质表达，抑制内部核酸复制，进而共同提高对粪肠球菌和无乳链球菌的抑菌性。并且在给药浓度10000mg/kg并不引起动物死亡，证明和厚朴酚、厚朴酚提取物毒性为无毒。
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公开(公告)号：CN116585340B
公开(公告)日：2023-09-19
申请号：CN202310883749.4
申请日：2023-07-19
Applicant: 云南农业大学
IPC: A61K31/7048 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了异柯里拉京在制备抗猪繁殖与呼吸综合征药物中的应用，属于药剂技术领域。对比现有的天然中药对Marc‑145细胞的TC0和TC50，本发明所述异柯里拉京对Marc‑145细胞的TC0和TC50分别为260μg/mL和770.43μg/mL，毒性相对较小，安全浓度较高。同时本发明采用了三种不同的给药方式进行异柯里拉京对PRRSV病毒体外抑制作用的探索发现，异柯里拉京能够显著的直接杀灭PRRSV、阻断PRRSV吸附Marc‑145细胞和抑制PRRSV在细胞中复制增殖，其体外抗PRRSV效果显著强于利巴韦林。并且，异柯里拉京可显著下调PRRSV N基因，抑制NF‑κB活化，下调炎性细胞因子的相对表达量，有效降低PRRSV感染引起的细胞炎症反应。因此，异柯里拉京在制备抗猪繁殖与呼吸综合征药物具有潜在的应用价值。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN116585340A
公开(公告)日：2023-08-15
申请号：CN202310883749.4
申请日：2023-07-19
Applicant: 云南农业大学
IPC: A61K31/7048 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了异柯里拉京在制备抗猪繁殖与呼吸综合征药物中的应用，属于药剂技术领域。对比现有的天然中药对Marc‑145细胞的TC0和TC50，本发明所述异柯里拉京对Marc‑145细胞的TC0和TC50分别为260μg/mL和770.43μg/mL，毒性相对较小，安全浓度较高。同时本发明采用了三种不同的给药方式进行异柯里拉京对PRRSV病毒体外抑制作用的探索发现，异柯里拉京能够显著的直接杀灭PRRSV、阻断PRRSV吸附Marc‑145细胞和抑制PRRSV在细胞中复制增殖，其体外抗PRRSV效果显著强于利巴韦林。并且，异柯里拉京可显著下调PRRSV N基因，抑制NF‑κB活化，下调炎性细胞因子的相对表达量，有效降低PRRSV感染引起的细胞炎症反应。因此，异柯里拉京在制备抗猪繁殖与呼吸综合征药物具有潜在的应用价值。
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公开(公告)号：CN111269277B
公开(公告)日：2023-02-28
申请号：CN202010266533.X
申请日：2020-04-07
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明涉及从紫地榆中提取并分离异柯里拉京的方法，属于医药技术领域，本发明通过用乙醇浸取、用石油醚初步萃取除杂、用乙酸乙酯萃取得到含有高量异柯里拉京的初级分离物，并通过HPLC‑UV操作控制，实现从紫地榆首次分离并提取出异柯里拉京和没食子酸，也为解释紫地榆的药学原理提供了依据。
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公开(公告)号：CN111763254A
公开(公告)日：2020-10-13
申请号：CN202010750227.3
申请日：2020-07-30
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明涉及红嘴鸥Mx蛋白克隆表达及多抗制备，属于生物工程技术领域，本发明提供了红嘴鸥Mx蛋白克隆表达及多抗制备，克隆了红嘴鸥的Mx基因，构建了红嘴鸥Mx基因的原核表达载体，并对其在体外的诱导表达条件进行了优化，制备兔抗多克隆抗体，分析红嘴鸥Mx蛋白的功能和在体外的抗病毒活性。为红嘴鸥抗病毒作用机理研究奠定基础，同时为红嘴鸥疫原疫病的监测提供科学依据。
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公开(公告)号：CN117185906B
公开(公告)日：2024-03-19
申请号：CN202311223093.X
申请日：2023-09-21
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种提高粪肠球菌和无乳链球菌抑制率提取物的制备方法，属于天然成分提取方法技术领域。本发明依次采取60％乙醇溶液或超纯水粗提取、乙酸乙酯作为有机相初步萃取、5:5的乙酸乙酯和石油醚混合物作为有机相再次萃取、制备型高效液相色谱技术分离制备出和厚朴酚提取物和厚朴酚提取物，所述和厚朴酚提取物或厚朴酚提取物中和厚朴酚或厚朴酚与提取物中的其他成分协同改变粪肠球菌和无乳链球菌的细胞膜通透性，影响细菌内部蛋白质表达，抑制内部核酸复制，进而共同提高对粪肠球菌和无乳链球菌的抑菌性。并且在给药浓度10000mg/kg并不引起动物死亡，证明和厚朴酚、厚朴酚提取物毒性为无毒。
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公开(公告)号：CN117050158B
公开(公告)日：2023-12-29
申请号：CN202311302008.9
申请日：2023-10-10
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明涉及一种红嘴鸥IFN‑γ基因及其编码的重组蛋白的应用，属于生物学领域。首先发现红嘴鸥IFN‑γ基因，然后将红嘴鸥IFN‑γ基因与pET32a(+)载体重组得到原核表达质粒，将重组原核表达质粒转化至Transetta(DE3)表达菌，加入IPTG诱导剂诱导蛋白表达，通过纯化得到重组蛋白，用重组蛋白，新城疫病毒分别与红嘴鸥淋巴细胞共孵育后检测相关基因转录水平，再用重组蛋白和新城疫病毒（NDV)共同与红嘴鸥淋巴
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