-
公开(公告)号：CN115927757A
公开(公告)日：2023-04-07
申请号：CN202211567418.1
申请日：2022-12-07
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明涉及一种基于PEMV‑1和PEMV‑2侵染性克隆高效筛选抗病毒种质资源的方法；包括：农杆菌浸根步骤。本发明具有以下优点：1、本发明方法操作简便，具有比人工摩擦接种更省时、更方便的优点；2、本发明方法可以通过调节侵染性克隆的浓度来控制病毒的接种量，同一批次的不同植株之间接种量误差小；3、本发明方法中一种侵染性克隆只具有一种病毒的侵染活性，解决了毒源不纯的问题，满足了要求特定病原接种的实验条件；4、本发明方法接种效果好，对植株的侵染率高；5、本发明方法使植株获毒时间早，病毒在植株体内积累的时间长；6、本发明方法成本相对较低，接种操作时间短。
-
公开(公告)号：CN111455109B
公开(公告)日：2022-04-08
申请号：CN202010294114.7
申请日：2020-04-15
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明涉及一种同步检测ZYMV、PRSV和ZTMV的方法，属于植物保护领域，本发明通过设计ZYMV、PRSV和ZTMV 3种病毒的特异性检测引物，并采用CTAB法提取感病样品总核酸作为模板，利用一步法多重RT‑PCR技术实现同时检测ZYMV、PRSV和ZTMV 3种病毒。通过反应体系与反应条件的优化，该方法可以高效、准确实现对ZYMV、PRSV和ZTMV 3种病毒的特异性检测，较传统RT‑PCR检测过程中只能检测单一病毒具有更高的效率，降低了检测成本，又可以保证检测结果的准确性，在上述3种病毒病检测中具有广阔的应用前景。
-
公开(公告)号：CN100487431C
公开(公告)日：2009-05-13
申请号：CN200510048727.8
申请日：2005-12-22
Applicant: 云南农业大学
IPC: G01N21/64 , G01N21/78 , G01N27/447 , C12Q1/00 , G01N1/28
Abstract: 本发明提供一种同步检测烟草丛顶病毒和烟草扭脉病毒的方法，属植物保护领域。根据烟草丛顶病毒和烟草扭脉病毒核苷酸序列分别设计两对特异性引物TB2F/TB2R(检测烟草丛顶病毒)及TVCPF/TVCPR(检测烟草扭脉病毒)。提取植株组织的总RNA后，采用双重RT-PCR的方法，同步检测烟草丛顶病毒和烟草扭脉病毒。该发明能有效克服指示植物法、电镜技术、酶联免疫技术以及总核酸提取法和传统RT-PCR方法的缺点，只用相当于一次普通RT-PCR的时间和试剂，就可以方便、特异、灵敏的同步检测烟草丛顶病毒和烟草扭脉病毒。
-
公开(公告)号：CN1793859A
公开(公告)日：2006-06-28
申请号：CN200510048727.8
申请日：2005-12-22
Applicant: 云南农业大学
IPC: G01N21/64 , G01N21/78 , G01N27/447 , C12Q1/00 , G01N1/28
Abstract: 本发明提供一种同步检测烟草丛顶病毒和烟草扭脉病毒的方法，属植物保护领域。根据烟草丛顶病毒和烟草扭脉病毒核苷酸序列分别设计两对特异性引物TB2F/TB2R(检测烟草丛顶病毒)及TVCPF/TVCPR(检测烟草扭脉病毒)。提取植株组织的总RNA后，采用双重RT－PCR的方法，同步检测烟草丛顶病毒和烟草扭脉病毒。该发明能有效克服指示植物法、电镜技术、酶联免疫技术以及总核酸提取法和传统RT－PCR方法的缺点，只用相当于一次普通RT－PCR的时间和试剂，就可以方便、特异、灵敏的同步检测烟草丛顶病毒和烟草扭脉病毒。
-
公开(公告)号：CN116926121B
公开(公告)日：2024-01-26
申请号：CN202311205212.9
申请日：2023-09-19
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明涉及一种带有GFP基因的重楼花叶坏死病毒侵染性克隆载体及其构建方法，属于植物病毒学和基因工程领域。本发明中带GFP基因的重楼花叶坏死病毒侵染性克隆载体，是利用酵母重组的方法，将PMNV全基因组RNA对应的cDNA全长序列克隆至pCB301‑HDV‑2µ载体的双35S启动子和终止子NOS之间，并把绿色荧光蛋白报告基因插入到PMNV的NIb蛋白和CP蛋白之间，即获得pCB301‑PMNV‑GFP重组载体。本发明利用酵母同源重组技术构建的PMNV侵染性克隆载体是重楼(56)对比文件杨林毅;陈潞;陈泽历;飞进强;王喆;徐绍忠;赵明富;文国松.滇重楼辣椒轻斑驳病毒分离物的鉴定及全基因组序列分析.湖北农业科学.2020,(13),第.张润;王连春;陈海如;李凡.烟草丛顶病毒编码的沉默抑制子初步鉴定.云南农业大学学报(自然科学版).2011,(06),第154-157+162页.
-
Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN115976277B
公开(公告)日：2024-01-19
申请号：CN202211241715.7
申请日：2022-10-11
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明申请是关于一种PEMV‑1和PEMV‑2的RT‑PCR同步检测试剂盒及检测方法，基于一步法多重RT‑PCR检测方法，属于植物保护领域。本发明通过设计PEMV‑1、PEMV‑2两种病毒的特异性检测引物，并采用CTAB法提取染病样品总核酸作为模板，利用一步法多重RT‑PCR技术实现对PEMV‑1、PEMV‑2两种病毒的同步检测。通过对反应体系和反应条件的优化，该方法可以高效、快速、准确地实现对PEMV‑1、PEMV‑2两种病毒的特异性检测，较传统RT‑PCR检测方法一次只能检测单一病毒更具高效性，且显著降低了检测成本，极大地节约了检测时间。
-
公开(公告)号：CN106755602A
公开(公告)日：2017-05-31
申请号：CN201710182795.6
申请日：2017-03-24
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明涉及一种同步检测SPVG、SPLV和SPMMV的方法，属于植物保护领域；通过分别设计合成SPVG、SPLV和SPMMV的正向引物、反向引物和探针，建立同时检测三种病毒的实时荧光多重RT‑PCR方法，检测植物细胞色素氧化酶基因（COX）的引物和探针被作为内参纳入实时荧光多重RT‑PCR的体系构建，避免因模板核酸质量差导致的假阴性结果。本发明对SPVG的检测灵敏度达到10‑6核酸模板稀释倍数，对SPLV、SPMMV和COX的检测灵敏度分别达到10‑7核酸模板稀释倍数，具有直观、快速、高效、特异性强、灵敏度高等优点，可确保SPVG、SPLV和SPMMV在植物检疫和甘薯无毒种苗筛选等大量样品检测时的质量和效率，具有广阔的应用前景。
-
公开(公告)号：CN102952901B
公开(公告)日：2014-02-12
申请号：CN201210492173.0
申请日：2012-11-28
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明涉及一种同步检测TBTV、TVDV、Sat-TBTV和TVDVaRNA的方法，属植物保护领域。通过分别设计合成TBTV、TVDV、Sat-TBTV和TVDVaRNA正反向引物，CTAB法提取染病植物组织或传毒介体昆虫总RNA，采用一步法四重RT-PCR，达到对这4种病原物的同步快速检测。所设计的引物特异性强，能同时扩增出4种病原物。用CTAB法提取染病植物组织及传毒介体昆虫的总RNA，既能保证所提RNA的质量，也能降低检测成本。反转录与多重PCR一步完成，极大地节约了检测时间。本发明具有快速、高效、特异性强、灵敏度高和成本低廉等优点，能一次实现对与烟草丛顶病相关的4种病原物的同步检测，具有广阔的应用前景。
-
公开(公告)号：CN102952901A
公开(公告)日：2013-03-06
申请号：CN201210492173.0
申请日：2012-11-28
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明涉及一种同步检测TBTV、TVDV、Sat-TBTV和TVDVaRNA的方法，属植物保护领域。通过分别设计合成TBTV、TVDV、Sat-TBTV和TVDVaRNA正反向引物，CTAB法提取染病植物组织或传毒介体昆虫总RNA，采用一步法四重RT-PCR，达到对这4种病原物的同步快速检测。所设计的引物特异性强，能同时扩增出4种病原物。用CTAB法提取染病植物组织及传毒介体昆虫的总RNA，既能保证所提RNA的质量，也能降低检测成本。反转录与多重PCR一步完成，极大地节约了检测时间。本发明具有快速、高效、特异性强、灵敏度高和成本低廉等优点，能一次实现对与烟草丛顶病相关的4种病原物的同步检测，具有广阔的应用前景。
-
-
-
-
-
-
-
-
Search Results
24
records
(took 0.018 seconds)
