公开(公告)号：CN105624178B

公开(公告)日：2019-08-06

申请号：CN201410605792.5

申请日：2014-10-31

Applicant: 中国科学院武汉病毒研究所

Inventor： 崔宗强 ,  张先恩 ,  陈明海 ,  张治平 ,  李炜

IPC: C12N15/63 ,  C12N15/66 ,  G01N21/64

Abstract: 本发明为一种基于荧光蛋白iRFP的双分子荧光片段互补系统及应用，以光敏色素荧光蛋白iRFP为模板，在氨基酸97‑98位将其拆分为不发荧光的氮端和碳端片段iRN97和iRC98，当这两个片段分别与相互作用的蛋白对相融合表达时，不发荧光的两个片段就可以被拉近而产生iRFP的荧光；iRN97和iRC98分别与艾滋病毒整合酶IN及细胞蛋白P75相融合表达，通过iRN97和iRC98的荧光互补，在活细胞内对IN与p75的相互作用进行研究，当药物能够抑制该蛋白‑蛋白之间的相互作用时，iRN97和iRC98则不能被拉近，从而抑制荧光的恢复。该新系统为一种简单、有效、方便的抑制蛋白相互作用的药物的评价系统。

公开(公告)号：CN105624178A

公开(公告)日：2016-06-01

申请号：CN201410605792.5

申请日：2014-10-31

Applicant: 中国科学院武汉病毒研究所

Inventor： 崔宗强 ,  张先恩 ,  陈明海 ,  张治平 ,  李炜

IPC: C12N15/63 ,  C12N15/66 ,  G01N21/64

Abstract: 本发明为一种基于荧光蛋白iRFP的双分子荧光片段互补系统及应用，以光敏色素荧光蛋白iRFP为模板，在氨基酸97-98位将其拆分为不发荧光的氮端和碳端片段iRN97和iRC98，当这两个片段分别与相互作用的蛋白对相融合表达时，不发荧光的两个片段就可以被拉近而产生iRFP的荧光；iRN97和iRC98分别与艾滋病毒整合酶IN及细胞蛋白P75相融合表达，通过iRN97和iRC98的荧光互补，在活细胞内对IN与p75的相互作用进行研究，当药物能够抑制该蛋白-蛋白之间的相互作用时，iRN97和iRC98则不能被拉近，从而抑制荧光的恢复。该新系统为一种简单、有效、方便的抑制蛋白相互作用的药物的评价系统。

公开(公告)号：CN109385450A

公开(公告)日：2019-02-26

申请号：CN201710650339.X

申请日：2017-08-02

Applicant: 中国科学院武汉病毒研究所

Inventor： 崔宗强 ,  陈明海 ,  李炜 ,  张先恩

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/65 ,  G01N33/68 ,  G01N33/58

Abstract: 本发明公开了一种基于荧光蛋白Venus的三片段荧光互补系统及应用，以荧光蛋白Venus为模板，分别在氨基酸154-155位以及172-173位将其拆分为不发荧光的三个片段VN154，VN(155-172)和VC173，当这三个片段分别与相互作用的三个蛋白相融合表达时，无荧光的三个片段就可以被拉近而激发产生Venus的荧光信号；由于Venus的三片段荧光互补系统具有高的互补荧光强度和生理温度条件下成熟的特性，因此，可以在生理温度条件下实现三个蛋白相互作用的成像研究。该系统为一种简单、有效、方便的研究三蛋白相互作用的系统。