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公开(公告)号：CN117904072A
公开(公告)日：2024-04-19
申请号：CN202410024495.5
申请日：2024-01-08
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C12N9/14 , C12N15/55 , C12N15/70 , C07K16/40 , C07K16/06 , G01N33/577 , G01N33/573 , G01N33/569
Abstract: 本发明涉及一株针对PRRSV解旋酶的抗原表位、单克隆抗体制备方法及应用。通过构建原核表达载体pCold‑I‑Nsp10，利用大肠杆菌表达重组Nsp10，纯化后免疫Balb/c小鼠，经过四次免疫后取小鼠脾细胞与骨髓瘤SP2/0细胞进行融合制备杂交瘤细胞，然后利用间接ELISA方法进行亚克隆获得抗PRRSV Nsp10的单克隆抗体，并鉴定了该抗体所对应的抗原表位为425TDKRVVDSLR434。
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公开(公告)号：CN119798425A
公开(公告)日：2025-04-11
申请号：CN202510115642.4
申请日：2025-01-24
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , C07K14/08 , G01N33/577 , G01N33/569
Abstract: 本发明提供一种PRRSV非结构蛋白12抗体的制备、表位鉴定及应用。通过构建真核表达载体pCDNA3.4‑Nsp12‑strep，瞬时转染CHO细胞，利用下游strep标签纯化获得PRRSV Nsp12重组蛋白，将纯化后的Nsp12作为抗原免疫Balb/C小鼠，分离小鼠脾细胞，经FACS法分离单个特异性B细胞，并通过RT‑PCR获得单个B细胞的抗体可变区序列，分别构建重链、轻链重组表达质粒，转染CHO悬浮细胞，表达并利用Protein G纯化获得了2种完整的抗PRRSV Nsp12单克隆抗体1N14和2S18，进一步确定了1N14和2S18抗体的应用范围及1N14抗体识别的具体抗原表位，其序列为104YEFTGNGEDW113。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN117903262A
公开(公告)日：2024-04-19
申请号：CN202410083824.3
申请日：2024-01-19
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C07K14/08 , C07K16/10 , G01N33/569 , G01N33/577
Abstract: 本发明涉及一种猪繁殖与呼吸综合征病毒Nsp7单克隆抗体的制备、表位鉴定及应用。通过构建原核表达载体pCold‑I‑Nsp7，利用大肠杆菌表达重组Nsp7，纯化后免疫Balb/c小鼠，经过四次免疫后取小鼠脾细胞与骨髓瘤SP2/0细胞进行融合制备杂交瘤细胞，然后利用间接ELISA方法进行亚克隆获得抗Nsp7的单克隆抗体，并鉴定了该抗体所对应的抗原表位为184KFWDKNSGD192。
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公开(公告)号：CN117904072B
公开(公告)日：2025-01-28
申请号：CN202410024495.5
申请日：2024-01-08
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C12N9/14 , C12N15/55 , C12N15/70 , C07K16/40 , C07K16/06 , G01N33/577 , G01N33/573 , G01N33/569
Abstract: 本发明涉及一株针对PRRSV解旋酶的抗原表位、单克隆抗体制备方法及应用。通过构建原核表达载体pCold‑I‑Nsp10，利用大肠杆菌表达重组Nsp10，纯化后免疫Balb/c小鼠，经过四次免疫后取小鼠脾细胞与骨髓瘤SP2/0细胞进行融合制备杂交瘤细胞，然后利用间接ELISA方法进行亚克隆获得抗PRRSV Nsp10的单克隆抗体，并鉴定了该抗体所对应的抗原表位为425TDKRVVDSLR434。
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公开(公告)号：CN117886906B
公开(公告)日：2024-11-26
申请号：CN202410087827.4
申请日：2024-01-22
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C07K14/18 , C07K16/10 , C12N15/13 , A61K39/187 , A61P31/14 , G01N33/569 , G01N33/577
Abstract: 本发明涉及一种猪瘟病毒Erns蛋白的抗原表位、单克隆抗体及其应用。通过构建真核表达载体pCDNA3.4‑Erns‑strep，瞬时转染CHO细胞表达重组Erns蛋白，利用strep标签纯化重组蛋白，四次免疫Balb/C小鼠，分离小鼠脾细胞，利用FACS法分离特异性B细胞，并通过反转录和PCR获得单个B细胞抗体的可变区序列，构建重链、轻链重组表达质粒，瞬时转染CHO细胞，表达并利用Protein G纯化获得完整的抗CSFV Erns蛋白单克隆抗体，并鉴定了该抗体识别的抗原表位序列为113TCRYDKNTDVNVVTQARNRPTTLTGCKKGKNFSF146。
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公开(公告)号：CN117903262B
公开(公告)日：2024-08-13
申请号：CN202410083824.3
申请日：2024-01-19
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C07K14/08 , C07K16/10 , G01N33/569 , G01N33/577
Abstract: 本发明涉及一种猪繁殖与呼吸综合征病毒Nsp7单克隆抗体的制备、表位鉴定及应用。通过构建原核表达载体pCold‑I‑Nsp7，利用大肠杆菌表达重组Nsp7，纯化后免疫Balb/c小鼠，经过四次免疫后取小鼠脾细胞与骨髓瘤SP2/0细胞进行融合制备杂交瘤细胞，然后利用间接ELISA方法进行亚克隆获得抗Nsp7的单克隆抗体，并鉴定了该抗体所对应的抗原表位为184KFWDKNSGD192。
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公开(公告)号：CN117886906A
公开(公告)日：2024-04-16
申请号：CN202410087827.4
申请日：2024-01-22
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C07K14/18 , C07K16/10 , C12N15/13 , A61K39/187 , A61P31/14 , G01N33/569 , G01N33/577
Abstract: 本发明涉及一种猪瘟病毒Erns蛋白的抗原表位、单克隆抗体及其应用。通过构建真核表达载体pCDNA3.4‑Erns‑strep，瞬时转染CHO细胞表达重组Erns蛋白，利用strep标签纯化重组蛋白，四次免疫Balb/C小鼠，分离小鼠脾细胞，利用FACS法分离特异性B细胞，并通过反转录和PCR获得单个B细胞抗体的可变区序列，构建重链、轻链重组表达质粒，瞬时转染CHO细胞，表达并利用Protein G纯化获得完整的抗CSFV Erns蛋白单克隆抗体，并鉴定了该抗体识别的抗原表位序列为113TCRYDKNTDVNVVTQARNRPTTLTGCKKGKNFSF146。
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