公开(公告)号：CN104593397A

公开(公告)日：2015-05-06

申请号：CN201510016549.4

申请日：2015-01-12

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 葛俊伟 ,  马德星 ,  李巍 ,  师东方 ,  赵鹏 ,  高菲 ,  夏爽 ,  关乃瑜 ,  谷珊珊 ,  崔文 ,  姜艳平 ,  任皓威

IPC: C12N15/62 ,  C07K19/00 ,  C12N1/21 ,  A61K39/116 ,  A61K39/108 ,  A61K48/00 ,  A61P31/04 ,  A61P1/12 ,  C12R1/19 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明公开了一种优化的产肠毒素性大肠杆菌(ETEC)多价抗原基因序列及其在预防断奶仔猪腹泻中的应用，属于生物技术领域。本发明根据乳酸乳球菌密码子使用偏好，大片段合成了包含引起断奶仔猪腹泻的常见ETEC优势血清型的F4+的主要结构蛋白FaeG、F18+的受体结合域RBD和毒素Stx2e、STa突变体、LT B亚单位、STb 6种抗原基因以及分别靶向M细胞、肠道细胞的分子肽CO1、YadA31基因的多价抗原基因序列，各基因间由GGGGS连接而成。该基因不但可以用于构建乳酸菌活载体疫苗，显著提高目的蛋白的分泌表达量，具有良好的免疫原性和保护效应，而且也适用于在大肠杆菌中高效表达，实验证明，其包涵体具有良好免疫活性，可作为预防断奶仔猪F4+、F18+ETEC感染的疫苗。

公开(公告)号：CN102839218B

公开(公告)日：2013-12-11

申请号：CN201210349684.7

申请日：2012-09-19

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 宋铭忻 ,  张子群 ,  李巍 ,  付丽君 ,  韩彩霞 ,  李晓云 ,  唐颖 ,  俞昭旸

IPC: C12Q1/68

Abstract: 一种检测食品中旋毛虫和猪囊尾蚴的方法，涉及一种检测旋毛虫和猪囊尾蚴的方法。是要解决目前诊断食源性寄生虫的方法只能检测一种虫体的问题。方法：一、设计旋毛虫和猪囊尾蚴特异性引物，并采用生物素标记；二、样品处理；三、双重PCR扩增；四、探针的修饰；五、将光谱编号为38的微球与修饰后的旋毛虫Ts基因探针耦联，将光谱编号为44的微球与修饰后的猪囊尾蚴Cc基因探针耦联；六、配制微球工作液；七、配制显色液；八、将反应管和阴性对照管置于PCR仪中，杂交，读数，即完成食品中旋毛虫和猪囊尾蚴的检测。本发明方法用于检测旋毛虫和猪囊尾蚴。

公开(公告)号：CN102839218A

公开(公告)日：2012-12-26

申请号：CN201210349684.7

申请日：2012-09-19

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 宋铭忻 ,  张子群 ,  李巍 ,  付丽君 ,  韩彩霞 ,  李晓云 ,  唐颖 ,  俞昭旸

IPC: C12Q1/68

Abstract: 一种检测食品中旋毛虫和猪囊尾蚴的方法，涉及一种检测旋毛虫和猪囊尾蚴的方法。是要解决目前诊断食源性寄生虫的方法只能检测一种虫体的问题。方法：一、设计旋毛虫和猪囊尾蚴特异性引物，并采用生物素标记，二、样品处理；三、双重PCR扩增；四、探针的修饰；五、将光谱编号为38的微球与修饰后的旋毛虫Ts基因探针耦联，将光谱编号为44的微球与修饰后的猪囊尾蚴Cc基因探针耦联；六、配制微球工作液；七、配制显色液；八、将反应管和阴性对照管置于PCR仪中，杂交，读数，即完成食品中旋毛虫和猪囊尾蚴的检测。本发明方法用于检测旋毛虫和猪囊尾蚴。

公开(公告)号：CN102702334A

公开(公告)日：2012-10-03

申请号：CN201210236741.0

申请日：2012-07-10

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 张子群 ,  宋铭忻 ,  李巍 ,  付丽君 ,  韩彩霞 ,  路义鑫 ,  唐颖 ,  彭永刚

IPC: C07K14/15 ,  G01N33/68 ,  C12N15/70

Abstract: 一种诊断绵羊肺腺瘤病毒的重组蛋白抗原及其制备方法，涉及一种重组蛋白抗原及其制备方法。本发明提供一种诊断绵羊肺腺瘤病毒的重组蛋白抗原及其制备方法，目的是表达出完整的未被截短的CA蛋白，提高抗原性。诊断绵羊肺腺瘤病毒的重组蛋白抗原的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。方法：以提取的基因组DNA为模板进行PCR扩增，获得目的基因；与载体进行连接，得重组质粒；将重组质粒和表达载体pET-28a连接，转化感受态中，测序鉴定；将阳性菌接种到LB培养基中，向菌液中加入IPTG，离心取沉淀，超声后离心，吸取上清，纯化，即获得重组蛋白。本发明获得的重组蛋白以上清形式表达，生物活性好。用于绵羊肺腺瘤病毒检测。

公开(公告)号：CN104593397B

公开(公告)日：2018-11-20

申请号：CN201510016549.4

申请日：2015-01-12

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 葛俊伟 ,  马德星 ,  李巍 ,  师东方 ,  赵鹏 ,  高菲 ,  夏爽 ,  关乃瑜 ,  谷珊珊 ,  崔文 ,  姜艳平 ,  任皓威

IPC: C12N15/62 ,  C07K19/00 ,  C12N1/21 ,  A61K39/116 ,  A61K39/108 ,  A61K48/00 ,  A61P31/04 ,  A61P1/12 ,  C12R1/19 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明公开了一种优化的产肠毒素性大肠杆菌(ETEC)多价抗原基因序列及其在预防断奶仔猪腹泻中的应用，属于生物技术领域。本发明根据乳酸乳球菌密码子使用偏好，大片段合成了包含引起断奶仔猪腹泻的常见ETEC优势血清型的F4+的主要结构蛋白FaeG、F18+的受体结合域RBD和毒素Stx2e、STa突变体、LT B亚单位、STb 6种抗原基因以及分别靶向M细胞、肠道细胞的分子肽CO1、YadA31基因的多价抗原基因序列，各基因间由GGGGS连接而成。该基因不但可以用于构建乳酸菌活载体疫苗，显著提高目的蛋白的分泌表达量，具有良好的免疫原性和保护效应，而且也适用于在大肠杆菌中高效表达，实验证明，其包涵体具有良好免疫活性，可作为预防断奶仔猪F4+、F18+ETEC感染的疫苗。

公开(公告)号：CN204379323U

公开(公告)日：2015-06-10

申请号：CN201520026131.7

申请日：2015-01-09

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 李晓云 ,  韩彩霞 ,  李巍 ,  宋铭忻 ,  路义鑫

IPC: A61B10/02

Abstract: 本实用新型的目的是提供一种动物阴道涂片的采样装置，包括塑料棒、棉签和塑料薄膜，塑料棒的表面上设有凹槽，棉签位于凹槽内，圆形塑料薄膜的中心位置设有一个通孔，棉签的棉签头穿过圆形塑料薄膜上的通孔，圆形塑料薄膜通过细线缠绕固定在棉签头的根部，塑料棒的左端设有一个圆锥形的凹槽，与凹槽相同，用于容纳棉签的棉签头及塑料薄膜。本实用新型整体结构简单、制造方便、采样效果好，使用本装置，省时省力，减少样本的污染，保证了检测结果的可靠性。