用于检测犬细小病毒结构蛋白VP2抗体的致敏聚苯乙烯纳米微球及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN109212230B

    公开(公告)日:2021-11-30

    申请号:CN201811064305.3

    申请日:2018-09-12

    Abstract: 本发明公开了一种用于检测犬细小病毒结构蛋白VP2抗体的致敏聚苯乙烯纳米微球及其制备方法和应用。所述的致敏聚苯乙烯纳米微球的表面偶联有犬细小病毒重组VP2蛋白,所述的重组VP2蛋白为犬细小病毒VP2蛋白的截短蛋白,位于犬细小病毒VP2蛋白的第365~486位,其氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。该蛋白含有VP2蛋白的主要抗原表位区、抗原性强、亲水性好,具有较强的特异性和免疫原性。利用该重组蛋白作为抗原制备了致敏彩色聚苯乙烯纳米微球,用于检测犬细小病毒血清抗体。实验证明,制备的致敏微球无自凝现象,重复性好,性质稳定。本发明的方法适用于宠物临床对单份或多份犬血清的快速检测,与商品化检测试剂盒比较,操作简便,检测结果有较高的确准性和符合率。

    一种用于检测大肠杆菌F5菌毛的胶体金免疫层析试纸条及其制备方法

    公开(公告)号:CN101887061A

    公开(公告)日:2010-11-17

    申请号:CN201010236537.X

    申请日:2010-07-26

    Abstract: 一种用于检测大肠杆菌F5菌毛的胶体金免疫层析试纸条及其制备方法,它涉及一种检测大肠杆菌菌毛的试纸条及其制备方法。本发明提供了一种用于检测大肠杆菌F5菌毛的胶体金免疫层析试纸条及其制备方法。试纸条由PVC背衬、样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫组成。方法:制免疫原;抗F5菌毛多克隆抗体和羊抗鼠IgG包被在硝酸纤维素膜上;制抗F5菌毛单克隆抗体;抗F5菌毛单克隆抗体-胶体金标记物包被在结合垫上;五、在PVC背衬上依次连续粘附样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫,切成试纸条即完成。本发明试纸条具有良好的特异性、稳定性和敏感性,可以用来对产肠毒素大肠杆菌F5菌毛进行鉴定,具有检测结果直观,便于保存。

    仔猪水肿病大肠杆菌基因突变株及其构建方法

    公开(公告)号:CN1995331A

    公开(公告)日:2007-07-11

    申请号:CN200610151213.X

    申请日:2006-12-29

    Inventor: 师东方 付海兵

    CPC classification number: Y02A50/476

    Abstract: 本发明提供仔猪水肿病大肠杆菌基因突变株及其构建方法。设计扩增编码类志贺氏毒素II型变异体基因及其左侧翼序列的特异性引物;通过PCR扩增获得编码类志贺氏毒素II型变异体基因及其左侧翼序列,分别进行克隆、测序鉴定;设计两对针对基因进行定点突变的突变引物;PCR扩增两个突变片断,分别克隆、测序鉴定;利用二重PCR将两个突变片断连接起来,并克隆、测序鉴定;将突变的基因亚克隆至自杀质粒pCVD442中;诱导致水肿病的0139大肠杆菌的萘啶酮酸抗性;利用突变菌株无Amp及蔗糖抗性,而具有萘啶酮酸抗性,并且其基因PCR产物可特异性的被Stu I核酸内切酶切开成功筛选出完成同源重组的0139大肠杆菌突变株。可以为仔猪水肿病的常规预防提供一种较好的疫苗后备菌株。

    用于检测犬瘟热病毒血凝蛋白H抗体的致敏聚苯乙烯纳米微球及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN109265522A

    公开(公告)日:2019-01-25

    申请号:CN201811145516.X

    申请日:2018-09-29

    Abstract: 本发明公开了一种用于检测犬瘟热病毒血凝蛋白H抗体的致敏聚苯乙烯纳米微球及其制备方法和应用。所述的致敏聚苯乙烯纳米微球的表面偶联有犬瘟热病毒重组血凝蛋白H,所述的重组血凝蛋白H为犬瘟热病毒血凝蛋白H的截短蛋白,位于犬瘟热病毒血凝蛋白H基因的第550nt~1002nt位,其氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。利用该重组蛋白作为抗原制备了致敏彩色聚苯乙烯纳米微球,用于检测犬瘟热病毒血清抗体。实验证明,制备的致敏微球无自凝现象,重复性好,性质稳定。本发明建立的CDV抗体间接凝集试验具有良好的特异性,操作简单,眼观判定结果,适合临床上对单个血清样品的检测,成本低,便于推广等优点。

    猪传染性胃肠炎重组N蛋白抗原及纯化方法

    公开(公告)号:CN1285609C

    公开(公告)日:2006-11-22

    申请号:CN200510009706.5

    申请日:2005-02-04

    Abstract: 本发明提供的是一种猪传染性胃肠炎重组N蛋白抗原及纯化方法。从纯化后的TGEV病毒液中进行病毒核酸提取,以TGEV N基因的上游引物Li01进行病毒基因组cDNA的合成,再使用TGEV N基因的上、下游引物,进行N基因的扩增,将扩增后的TGEV N基因克隆到原核表达载体质粒pProEXHTb中,并在大肠杆菌DH5α菌株中进行表达得到的猪传染性胃肠炎重组N蛋白抗原。该抗原可以克服猪传染性胃肠炎传统诊断方法中的抗原所存在的排毒、散毒的潜在危险,可作为一种疾病监测的诊断抗原。

    猪传染性胃肠炎重组N蛋白抗原及纯化方法

    公开(公告)号:CN1680433A

    公开(公告)日:2005-10-12

    申请号:CN200510009706.5

    申请日:2005-02-04

    Abstract: 本发明提供的是一种猪传染性胃肠炎重组N蛋白抗原及纯化方法。从纯化后的TGEV病毒液中进行病毒核酸提取,以TGEV N基因的上游引物Li01进行病毒基因组cDNA的合成,再使用TGEV N基因的上、下游引物,进行N基因的扩增,将扩增后的TGEV N基因克隆到原核表达载体质粒pProEXHTb中,并在大肠杆菌DH5α菌株中进行表达得到的猪传染性胃肠炎重组N蛋白抗原。该抗原可以克服猪传染性胃肠炎传统诊断方法中的抗原所存在的排毒、散毒的潜在危险,可作为一种疾病监测的诊断抗原。

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