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公开(公告)号：CN104593397B
公开(公告)日：2018-11-20
申请号：CN201510016549.4
申请日：2015-01-12
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N15/62 , C07K19/00 , C12N1/21 , A61K39/116 , A61K39/108 , A61K48/00 , A61P31/04 , A61P1/12 , C12R1/19 , C12R1/01
Abstract: 本发明公开了一种优化的产肠毒素性大肠杆菌(ETEC)多价抗原基因序列及其在预防断奶仔猪腹泻中的应用，属于生物技术领域。本发明根据乳酸乳球菌密码子使用偏好，大片段合成了包含引起断奶仔猪腹泻的常见ETEC优势血清型的F4+的主要结构蛋白FaeG、F18+的受体结合域RBD和毒素Stx2e、STa突变体、LT B亚单位、STb 6种抗原基因以及分别靶向M细胞、肠道细胞的分子肽CO1、YadA31基因的多价抗原基因序列，各基因间由GGGGS连接而成。该基因不但可以用于构建乳酸菌活载体疫苗，显著提高目的蛋白的分泌表达量，具有良好的免疫原性和保护效应，而且也适用于在大肠杆菌中高效表达，实验证明，其包涵体具有良好免疫活性，可作为预防断奶仔猪F4+、F18+ETEC感染的疫苗。
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公开(公告)号：CN112028995A
公开(公告)日：2020-12-04
申请号：CN202010712399.1
申请日：2020-07-22
Applicant: 东北农业大学
IPC: C07K16/20 , A61K39/395 , A61K39/39 , A61P33/02
Abstract: 本发明公开了抗球虫感染的多肽及其应用。本发明通过对EtMIC3七个重复结构域的结构以及抗原性等分析后选择了B、C1两个结构域进行研究，以EtMIC3-BC1蛋白作为靶分子，通过噬菌体展示技术筛选出了7个能够与EtMIC3-BC1蛋白特异结合的亲和肽，再通过ELISA等方法选出了三个结合性较好的A肽、D肽和W肽，其氨基酸序列分别为SEQ ID NO.1-3所示。体外试验发现，3个多肽在体外均能有效抑制E.tenella子孢子入侵MDBK细胞；体内试验发现，鸡口服3个多肽对应噬菌体后表现出抗球虫感染的保护作用。本发明进一步提供了所述多肽在制备预防或治疗鸡球虫感染药物中的应用。
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公开(公告)号：CN104593397A
公开(公告)日：2015-05-06
申请号：CN201510016549.4
申请日：2015-01-12
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N15/62 , C07K19/00 , C12N1/21 , A61K39/116 , A61K39/108 , A61K48/00 , A61P31/04 , A61P1/12 , C12R1/19 , C12R1/01
Abstract: 本发明公开了一种优化的产肠毒素性大肠杆菌(ETEC)多价抗原基因序列及其在预防断奶仔猪腹泻中的应用，属于生物技术领域。本发明根据乳酸乳球菌密码子使用偏好，大片段合成了包含引起断奶仔猪腹泻的常见ETEC优势血清型的F4+的主要结构蛋白FaeG、F18+的受体结合域RBD和毒素Stx2e、STa突变体、LT B亚单位、STb 6种抗原基因以及分别靶向M细胞、肠道细胞的分子肽CO1、YadA31基因的多价抗原基因序列，各基因间由GGGGS连接而成。该基因不但可以用于构建乳酸菌活载体疫苗，显著提高目的蛋白的分泌表达量，具有良好的免疫原性和保护效应，而且也适用于在大肠杆菌中高效表达，实验证明，其包涵体具有良好免疫活性，可作为预防断奶仔猪F4+、F18+ETEC感染的疫苗。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102816788A
公开(公告)日：2012-12-12
申请号：CN201210302585.3
申请日：2012-08-23
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 一种在乳酸乳球菌中表达鸡堆型艾美耳球虫3-1E蛋白的方法，涉及一种表达鸡堆型艾美耳球虫3-1E蛋白的方法。本发明是要解决目前乳酸乳球菌中无法表达鸡艾美耳球虫子孢子/裂殖子阶段表面抗原3-1E的问题。方法：将鸡堆型艾美耳球虫3-1E基因序列依照乳酸乳球菌的密码子偏好性进行优化，插入克隆载体并转化大肠杆菌感受态细胞，得阳性转化子；将阳性转化子和乳酸菌表达载体酶切后连接，构建重组表达载体；转化乳酸菌感受态细胞，鉴定；进行重组菌培养及诱导，即完成在乳酸乳球菌NZ9000中表达3-1E蛋白。本发明将密码子优化后的经人工合成的3-1E蛋白成功的在乳酸乳球菌中进行了表达。本发明方法用于球虫病的预防领域。
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公开(公告)号：CN112028995B
公开(公告)日：2022-07-12
申请号：CN202010712399.1
申请日：2020-07-22
Applicant: 东北农业大学
IPC: C07K16/20 , A61K39/395 , A61K39/39 , A61P33/02
Abstract: 本发明公开了抗球虫感染的多肽及其应用。本发明通过对EtMIC3七个重复结构域的结构以及抗原性等分析后选择了B、C1两个结构域进行研究，以EtMIC3‑BC1蛋白作为靶分子，通过噬菌体展示技术筛选出了7个能够与EtMIC3‑BC1蛋白特异结合的亲和肽，再通过ELISA等方法选出了三个结合性较好的A肽、D肽和W肽，其氨基酸序列分别为SEQ ID NO.1‑3所示。体外试验发现，3个多肽在体外均能有效抑制E.tenella子孢子入侵MDBK细胞；体内试验发现，鸡口服3个多肽对应噬菌体后表现出抗球虫感染的保护作用。本发明进一步提供了所述多肽在制备预防或治疗鸡球虫感染药物中的应用。
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公开(公告)号：CN104774782B
公开(公告)日：2017-12-19
申请号：CN201410817717.5
申请日：2014-12-25
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明公开了鸡源粪肠球菌分离株及其应用。本发明从20周龄健康鸡盲肠中分离得到一株性能优异的粪肠球菌分离株B10，其微生物保藏编号为：CCTCC No：M 2014488，分类命名为MDXEF‑1。该分离株有优异的耐酸性能和耐胆盐性能，抑菌谱广，对常见致病菌均有明显的抑制作用；分离株MDXEF‑1对多种抗生素敏感，将该菌饲喂给肉仔鸡后可以显著增加鸡的体重，促进鸡的生长，能够作为促进禽类生长的饲料添加剂。本发明分离株MDXEF‑1可以作为宿主菌而且在不外加nisin诱导物的情况下高效表达异源蛋白，适宜于生产中大规模发酵应用，能作为饲用乳酸菌疫苗运送载体。
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公开(公告)号：CN104774782A
公开(公告)日：2015-07-15
申请号：CN201410817717.5
申请日：2014-12-25
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明公开了鸡源粪肠球菌分离株及其应用。本发明从20周龄健康鸡盲肠中分离得到一株性能优异的粪肠球菌分离株B10，其微生物保藏编号为：CCTCC No：M2014488，分类命名为MDXEF-1。该分离株有优异的耐酸性能和耐胆盐性能，抑菌谱广，对常见致病菌均有明显的抑制作用；分离株MDXEF-1对多种抗生素敏感，将该菌饲喂给肉仔鸡后可以显著增加鸡的体重，促进鸡的生长，能够作为促进禽类生长的饲料添加剂。本发明分离株MDXEF-1可以作为宿主菌而且在不外加nisin诱导物的情况下高效表达异源蛋白，适宜于生产中大规模发酵应用，能作为饲用乳酸菌疫苗运送载体。
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公开(公告)号：CN102276729A
公开(公告)日：2011-12-14
申请号：CN201110231087.X
申请日：2011-08-12
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 抗菌肽LF-TH及其大肠杆菌重组制备方法。它解决了现有抗菌肽抗菌活性不高的问题。抗菌肽LF-TH的氨基酸序列包括33个氨基酸，其氨基酸序列如SEQ ID No.1所示，其编码基因序列如SEQ ID No.2所示。方法：一、设计抗菌肽LF-TH和抗菌肽LF-TH的编码基因；二、抗菌肽LF-TH的编码基因与质粒连接并构建重组大肠杆菌表达载体，转化E.coliBL21(DE3)，经诱导表达、纯化后获得融合蛋白，肠激酶裂解融合蛋白释放抗菌肽LF-TH，纯化后获得抗菌肽LF-TH即完成。本发明的抗菌肽LF-TH抗菌活性高，对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌和鼠伤寒沙门氏菌具有明显的抑制作用。
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