一种重组鸡胸腺肽在制备鸡免疫增强剂中的应用

    公开(公告)号:CN118662610A

    公开(公告)日:2024-09-20

    申请号:CN202411054625.6

    申请日:2024-08-02

    Inventor: 高亚东 葛俊伟

    Abstract: 本发明提供了一种重组鸡胸腺肽在制备鸡免疫增强剂中的应用,属于兽医技术领域。本发明通过基因工程重组大肠杆菌表达鸡胸腺肽α1、鸡胸腺肽α1突变体和鸡胸腺肽α1突变体双拷贝串联蛋白。将带正电荷的氨基酸K突变为带负电荷的氨基酸D和双拷贝串联表达两个途径提高重组鸡胸腺肽在鸡体内的作用时间。注射胸腺肽后7周,鸡胸腺肽α1组SI值已下降至1.08接近对照组水平,鸡胸腺肽α1突变体组的SI值下降至1.23,而双拷贝鸡胸腺肽α1突变体组的SI值仍维持较高水平1.43。可见双拷贝鸡胸腺肽α1突变体比天然序列表达的鸡胸腺肽α1具有更加持久的调节鸡免疫功能的作用,是一种可作为免疫增强剂的长效胸腺肽。

    无选择标记残留的乳酸菌基因组基因操作系统及其应用

    公开(公告)号:CN102732502B

    公开(公告)日:2014-07-09

    申请号:CN201210180721.6

    申请日:2012-06-04

    Abstract: 本发明公开了一种无选择标记残留的乳酸菌基因组修饰操作系统及其应用,属于生物技术领域。具体地,本发明提供的载体系统包括:1个温度敏感型、大肠杆菌-革兰氏阳性细菌宽宿主范围穿梭型辅助质粒;1个用于构建温度敏感型、大肠杆菌-革兰氏阳性细菌宽宿主范围穿梭型基因打靶主质粒的中间质粒;1个经过以上二者所构建的用于任意位点基因修饰操作的基础乳酸菌菌株。本发明所提供的无选择标记残留的快速双质粒基因打靶载体系统可以获取任意位点基因缺失或插入的转基因重组乳酸菌,所产生的转基因乳酸菌或重组基因工程乳酸菌在益生菌开发和基因工程益生菌制剂的研究和应用中具有广泛的应用前景。

    抗魏氏梭菌病转基因植物疫苗及其制作方法

    公开(公告)号:CN102008720A

    公开(公告)日:2011-04-13

    申请号:CN201010231142.0

    申请日:2010-07-20

    CPC classification number: Y02A50/472

    Abstract: 抗魏氏梭菌病转基因植物疫苗及其制作方法。目前免疫接种抗魏氏梭菌病的疫苗保护率较低。本发明包括:(1)以含编码魏氏梭菌毒素的质粒或病料为模板,利用PCR或RT-PCR扩增获得魏氏梭菌毒素基因,将获得的魏氏梭菌毒素基因和Ti或Ri质粒分别进行酶切,回收目的基因和植物表达载体片段,连接并转化大肠杆菌,对重组Ti或Ri质粒进行酶切、PCR和测序鉴定,用重组质粒转化根瘤农杆菌或发根农杆菌,筛选、鉴定阳性重组农杆菌;(2)植物种子经春化、萌发、剪接,获得外植体,用步骤(1)中重组的农杆菌分别侵染外植体,通过筛选、继代、生根、移栽,获得转化植株,筛选鉴定转基因阳性植株。

    一种干酪乳杆菌菌影及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN103013897A

    公开(公告)日:2013-04-03

    申请号:CN201210424842.0

    申请日:2012-10-30

    Abstract: 本发明公开了一种干酪乳杆菌菌影及其制备方法和应用,属于生物技术领域。本发明选择干酪乳杆菌作为研究对象,通过分离干酪乳杆菌的噬菌体,预测并克隆其裂解基因,将含有克隆得到的裂解基因的重组载体转化干酪乳杆菌,诱导裂解基因表达后制成菌影。本发明以干酪乳杆菌菌影作为抗原传递载体使用,做到了真正意义上的安全可靠。同时,干酪乳杆菌细胞壁中的胞壁酰二肽具有很好的佐剂作用,能明显加强异质性抗原的免疫原性。此外,干酪乳杆菌菌影可通过发酵大量生产,冻干后在室温下可保存较长时间,为进一步应用于生产实践降低了成本,也为进一步设计新型安全有效的药物,特别是疫苗的递送系统,从而应用于预防及治疗疾病提供了一种新的思路和方法。

    传染性胰腺坏死重组VP2蛋白抗原及纯化方法

    公开(公告)号:CN101580541A

    公开(公告)日:2009-11-18

    申请号:CN200910071261.1

    申请日:2009-01-14

    Abstract: 本发明提供的是一种传染性胰腺坏死重组VP2蛋白抗原及纯化方法。从传染性胰腺坏病毒细胞培养液中进行病毒核酸(RNA)提取,以IPNV VP2基因的下游引物P2进行病毒基因组cDNA的合成,再利用IPNV VP2基因的上、下游引物,进行VP2基因的扩增,将扩增得到的IPNV VP2基因克隆到原核表达载体质粒pET30b中,并在大肠杆菌BL21菌株中进行表达得到传染性胰腺坏死重组VP2蛋白抗原。该抗原可以克服传染性胰腺坏死传统诊断方法中的抗原所存在的排毒、散毒的潜在危险,可作为一种疾病监测的诊断抗原。

    抗魏氏梭菌病转基因植物疫苗及其制作方法

    公开(公告)号:CN102008720B

    公开(公告)日:2015-02-25

    申请号:CN201010231142.0

    申请日:2010-07-20

    CPC classification number: Y02A50/472

    Abstract: 抗魏氏梭菌病转基因植物疫苗及其制作方法。目前免疫接种抗魏氏梭菌病的疫苗保护率较低。本发明包括:(1)以含编码魏氏梭菌毒素的质粒或病料为模板,利用PCR或RT-PCR扩增获得魏氏梭菌毒素基因,将获得的魏氏梭菌毒素基因和Ti或Ri质粒分别进行酶切,回收目的基因和植物表达载体片段,连接并转化大肠杆菌,对重组Ti或Ri质粒进行酶切、PCR和测序鉴定,用重组质粒转化根瘤农杆菌或发根农杆菌,筛选、鉴定阳性重组农杆菌;(2)植物种子经春化、萌发、剪接,获得外植体,用步骤(1)中重组的农杆菌分别侵染外植体,通过筛选、继代、生根、移栽,获得转化植株,筛选鉴定转基因阳性植株。

    检测李斯特氏菌溶血素的免疫胶体金试纸及其制备方法

    公开(公告)号:CN101968487A

    公开(公告)日:2011-02-09

    申请号:CN200910206028.X

    申请日:2009-10-09

    Abstract: 本发明涉及一种检测李斯特氏菌溶血素的免疫胶体金试纸及其制备方法,属于生物技术领域。本发明首先纯化了由重组大肠杆菌表达的李斯特氏菌溶血素,然后用纯化的李斯特氏菌溶血素制备多克隆抗体和单克隆抗体。用胶体金标记单克隆抗体作为示踪物,分别在检测线和质控线的相应位置包被抗溶血素多克隆抗体和抗鼠的多克隆抗体,两者可与相应的抗原发生特异性结合而被截留,呈现红色。可以根据检测线和质控线的显色与否判定阴阳性结果。本发明具有取样简便、特异性强、敏感性高等特点,可以方便、快捷、准确地在5min内检测李斯特氏菌溶血素,也可用于检测动物及其组织、青贮饲料、食品、肉制品、粪便等样品中是否污染了产溶血素的李斯特氏菌。

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