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公开(公告)号：CN101381767B
公开(公告)日：2010-12-08
申请号：CN200810137388.4
申请日：2008-10-24
Applicant: 东北农业大学 , 中华人民共和国黑龙江出入境检验检疫局
Abstract: 本发明提供了一种旋毛虫通用型实时荧光PCR检测方法。确定以各旋毛虫隔离种线粒体LS-rRNA基因保守区序列作为扩增靶序列，设计合成了一对特异性引物和一条TaqMAN MGB探针应用于对旋毛虫的通用检测。根据不同浓度梯度的阳性质控标准品制作的定量标准曲线可以看出，不同梯度定量模板数的对数值与Ct值之间有较好的相关性，其相关系数为0.9984；同时，该检测方法具有很高的灵敏度，最低能检测到132个拷贝数和10-5条旋毛虫；对其他寄生虫和健康宿主及水对照进行检测表明，该方法具有很好的特异性；重复性实验表明，本发明提供的检测体系具有很好的稳定性，其检测结果变异较小，控制在统计学范围之内。
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公开(公告)号：CN101401782A
公开(公告)日：2009-04-08
申请号：CN200810137350.7
申请日：2008-10-17
Applicant: 东北农业大学
IPC: A61K9/00 , A61K31/7048 , A61P33/00
Abstract: 本发明提供了一种多拉菌素浇泼剂及其制备方法，它是由丙二醇、无水乙醇、氮酮、吐温－80和2，6－二叔丁基对甲酚组成的多拉菌素(Doramectin)浇泼剂，氮酮为透皮吸收促进剂，促进多拉菌素的透皮吸收，丙二醇为溶剂，同时与氮酮合用具有促进多拉菌素透皮吸收之协同作用，吐温－80为增溶剂，使多拉菌素易于溶解，无水乙醇为辅剂，可降低本浇泼剂的粘度，易于浇泼剂透过被毛渗入皮肤，2，6－二叔丁基对甲酚为抗氧化剂。本发明的多拉菌素浇泼剂毒性小，成本较低，使用方便，可用于驱杀动物的体内线虫和体外寄生虫。
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公开(公告)号：CN105219888A
公开(公告)日：2016-01-06
申请号：CN201510771244.4
申请日：2015-11-12
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 一种西江病毒SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法，它涉及一种西江病毒SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法。本发明的目的是要解决现有技术中没有西江病毒荧光定量PCR检测方法。本发明方法为：一、设计引物；二、标准曲线构建；三、进行阴阳性判断。本发明的方法检测的敏感性可达到100个拷贝的病毒RNA分子，对于单个样本检测小于2个小时，操作简易，可以进行高通量的样品检测。
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公开(公告)号：CN102839218A
公开(公告)日：2012-12-26
申请号：CN201210349684.7
申请日：2012-09-19
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 一种检测食品中旋毛虫和猪囊尾蚴的方法，涉及一种检测旋毛虫和猪囊尾蚴的方法。是要解决目前诊断食源性寄生虫的方法只能检测一种虫体的问题。方法：一、设计旋毛虫和猪囊尾蚴特异性引物，并采用生物素标记，二、样品处理；三、双重PCR扩增；四、探针的修饰；五、将光谱编号为38的微球与修饰后的旋毛虫Ts基因探针耦联，将光谱编号为44的微球与修饰后的猪囊尾蚴Cc基因探针耦联；六、配制微球工作液；七、配制显色液；八、将反应管和阴性对照管置于PCR仪中，杂交，读数，即完成食品中旋毛虫和猪囊尾蚴的检测。本发明方法用于检测旋毛虫和猪囊尾蚴。
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公开(公告)号：CN102702334A
公开(公告)日：2012-10-03
申请号：CN201210236741.0
申请日：2012-07-10
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 一种诊断绵羊肺腺瘤病毒的重组蛋白抗原及其制备方法，涉及一种重组蛋白抗原及其制备方法。本发明提供一种诊断绵羊肺腺瘤病毒的重组蛋白抗原及其制备方法，目的是表达出完整的未被截短的CA蛋白，提高抗原性。诊断绵羊肺腺瘤病毒的重组蛋白抗原的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。方法：以提取的基因组DNA为模板进行PCR扩增，获得目的基因；与载体进行连接，得重组质粒；将重组质粒和表达载体pET-28a连接，转化感受态中，测序鉴定；将阳性菌接种到LB培养基中，向菌液中加入IPTG，离心取沉淀，超声后离心，吸取上清，纯化，即获得重组蛋白。本发明获得的重组蛋白以上清形式表达，生物活性好。用于绵羊肺腺瘤病毒检测。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN1961844A
公开(公告)日：2007-05-16
申请号：CN200610151054.3
申请日：2006-11-24
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明公开了一种旋毛虫活体传代方法。它包括：首先选择2月龄、品种相同的健康实验动物接种，接种前停饮2～3天；在生物显微镜下，将计数准确的幼虫用小型胃管经口接种给实验动物；实验动物接种后放在饲养笼具中，每天观察接种实验动物的健康状况，于接种后40～60天宰杀接种实验动物，取膈肌进行压片镜检，观察到典型的虫体形态，并确为单一旋毛虫隔离种后即可进行虫体的保藏。本发明规定了旋毛虫活体传代操作的基本原则、方法及技术要求，适用于国际和国内各科研、教学、检疫和生产单位的不同旋毛虫虫种的活体传代和保存。
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公开(公告)号：CN119326754A
公开(公告)日：2025-01-21
申请号：CN202411884068.0
申请日：2024-12-20
Applicant: 东北农业大学
IPC: A61K31/352 , A61P31/22
Abstract: 本发明公开了柚皮素在制备防治伪狂犬病毒引起疾病的药物中的应用，属于生物医药技术领域。柚皮素在体内外均具有良好的抗PRV活性。柚皮素能够抑制伪狂犬病毒在细胞内复制阶段的病毒增殖，降低PRV gB蛋白的表达，下调TLR4和P65蛋白的表达抑制NF‑κB通路的激活以及下调炎症基因的表达，降低NF‑κB/P65蛋白的入核作用来发挥抗炎、抗病毒作用。体内实验证实柚皮素能够延缓小鼠发病时间，降低被PRV感染小鼠器官内的病毒载量，减轻小鼠组织器官病理变化，此外还通过调节小鼠血清细胞因子水平提高了被病毒感染小鼠的存活率。柚皮素为预防和治疗PRV感染提供了一种新策略。
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公开(公告)号：CN101381767A
公开(公告)日：2009-03-11
申请号：CN200810137388.4
申请日：2008-10-24
Applicant: 东北农业大学 , 中华人民共和国黑龙江出入境检验检疫局
Abstract: 本发明提供了一种旋毛虫通用型实时荧光PCR检测方法。确定以各旋毛虫隔离种线粒体LS－rRNA基因保守区序列作为扩增靶序列，设计合成了一对特异性引物和一条TaqMAN MGB探针应用于对旋毛虫的通用检测。根据不同浓度梯度的阳性质控标准品制作的定量标准曲线可以看出，不同梯度定量模板数的对数值与Ct值之间有较好的相关性，其相关系数为0.9984；同时，该检测方法具有很高的灵敏度，最低能检测到132个拷贝数和10－5条旋毛虫；对其他寄生虫和健康宿主及水对照进行检测表明，该方法具有很好的特异性；重复性实验表明，本发明提供的检测体系具有很好的稳定性，其检测结果变异较小，控制在统计学范围之内。
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公开(公告)号：CN101401782B
公开(公告)日：2011-07-06
申请号：CN200810137350.7
申请日：2008-10-17
Applicant: 东北农业大学
IPC: A61K9/00 , A61K31/7048 , A61P33/00
Abstract: 本发明提供了一种多拉菌素浇泼剂及其制备方法，它是由丙二醇、无水乙醇、氮酮、吐温-80和2，6—二叔丁基对甲酚组成的多拉菌素(Doramectin)浇泼剂，氮酮为透皮吸收促进剂，促进多拉菌素的透皮吸收，丙二醇为溶剂，同时与氮酮合用具有促进多拉菌素透皮吸收之协同作用，吐温-80为增溶剂，使多拉菌素易于溶解，无水乙醇为辅剂，可降低本浇泼剂的粘度，易于浇泼剂透过被毛渗入皮肤，2，6—二叔丁基对甲酚为抗氧化剂。本发明的多拉菌素浇泼剂毒性小，成本较低，使用方便，可用于驱杀动物的体内线虫和体外寄生虫。
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公开(公告)号：CN105219888B
公开(公告)日：2019-09-06
申请号：CN201510771244.4
申请日：2015-11-12
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851
Abstract: 一种西江病毒SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法，它涉及一种西江病毒SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法。本发明的目的是要解决现有技术中没有西江病毒荧光定量PCR检测方法。本发明方法为：一、设计引物；二、标准曲线构建；三、进行阴阳性判断。本发明的方法检测的敏感性可达到100个拷贝的病毒RNA分子，对于单个样本检测小于2个小时，操作简易，可以进行高通量的样品检测。
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