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公开(公告)号：CN101381767A
公开(公告)日：2009-03-11
申请号：CN200810137388.4
申请日：2008-10-24
Applicant: 东北农业大学 , 中华人民共和国黑龙江出入境检验检疫局
Abstract: 本发明提供了一种旋毛虫通用型实时荧光PCR检测方法。确定以各旋毛虫隔离种线粒体LS－rRNA基因保守区序列作为扩增靶序列，设计合成了一对特异性引物和一条TaqMAN MGB探针应用于对旋毛虫的通用检测。根据不同浓度梯度的阳性质控标准品制作的定量标准曲线可以看出，不同梯度定量模板数的对数值与Ct值之间有较好的相关性，其相关系数为0.9984；同时，该检测方法具有很高的灵敏度，最低能检测到132个拷贝数和10－5条旋毛虫；对其他寄生虫和健康宿主及水对照进行检测表明，该方法具有很好的特异性；重复性实验表明，本发明提供的检测体系具有很好的稳定性，其检测结果变异较小，控制在统计学范围之内。
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公开(公告)号：CN100445743C
公开(公告)日：2008-12-24
申请号：CN200510010584.1
申请日：2005-11-30
Applicant: 东北农业大学
IPC: G01N33/53 , G01N33/531 , C12Q1/00
Abstract: 本发明提供的是一种检测本地旋毛形线虫抗体的重组原核表达蛋白抗原及其制备方法。本产品可作为检测本地旋毛形线虫抗体的间接-ELISA及Dot-ELISA方法的检测抗原，也可作为预防本地旋毛形线虫感染的基因工程亚单位疫苗。本产品制备过程包括：(1)设计扩增TNPG基因的特异性引物；(2)通过PCR扩增获得TNPG基因片段；(3)对TNPG基因进行克隆、测序鉴定；(4)将TNPG基因定向亚克隆至pET-30a原核表达载体；(5)TNPG基因在大肠杆菌的诱导表达；(6)TNPG基因表达蛋白的亲合层析纯化。
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公开(公告)号：CN113917134A
公开(公告)日：2022-01-11
申请号：CN202110943884.4
申请日：2021-08-17
Applicant: 东北农业大学
IPC: G01N33/558 , G01N33/58 , G01N33/543 , G01N33/68
Abstract: 本发明公开了用于检测肝片形吸虫病抗体的免疫胶体金试纸条及其制备方法和应用。所述试纸条按照连接顺序依次包括样品垫，胶体金垫，硝酸纤维素膜，吸水纸及位于下方的作为组装平台使用的PVC底板，所述胶体金垫是由吸附有胶体金标记的TPX、CatB4或TPX+CatB4重组抗原的玻璃纤维素膜组成，所述硝酸纤维素膜上具有兔抗TPX、CatB4或TPX+CatB4蛋白多克隆抗体包被的质控线，以及TPX、CatB4或TPX+CatB4重组抗原包被的检测线。本发明的试纸条特异性强，稳定性好，操作简单，检测快速，只需5～10分钟即可读取结果，适合现场检测。
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公开(公告)号：CN101401782B
公开(公告)日：2011-07-06
申请号：CN200810137350.7
申请日：2008-10-17
Applicant: 东北农业大学
IPC: A61K9/00 , A61K31/7048 , A61P33/00
Abstract: 本发明提供了一种多拉菌素浇泼剂及其制备方法，它是由丙二醇、无水乙醇、氮酮、吐温-80和2，6—二叔丁基对甲酚组成的多拉菌素(Doramectin)浇泼剂，氮酮为透皮吸收促进剂，促进多拉菌素的透皮吸收，丙二醇为溶剂，同时与氮酮合用具有促进多拉菌素透皮吸收之协同作用，吐温-80为增溶剂，使多拉菌素易于溶解，无水乙醇为辅剂，可降低本浇泼剂的粘度，易于浇泼剂透过被毛渗入皮肤，2，6—二叔丁基对甲酚为抗氧化剂。本发明的多拉菌素浇泼剂毒性小，成本较低，使用方便，可用于驱杀动物的体内线虫和体外寄生虫。
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公开(公告)号：CN113917134B
公开(公告)日：2024-07-16
申请号：CN202110943884.4
申请日：2021-08-17
Applicant: 东北农业大学
IPC: G01N33/558 , G01N33/58 , G01N33/543 , G01N33/68
Abstract: 本发明公开了用于检测肝片形吸虫病抗体的免疫胶体金试纸条及其制备方法和应用。所述试纸条按照连接顺序依次包括样品垫，胶体金垫，硝酸纤维素膜，吸水纸及位于下方的作为组装平台使用的PVC底板，所述胶体金垫是由吸附有胶体金标记的TPX、CatB4或TPX+CatB4重组抗原的玻璃纤维素膜组成，所述硝酸纤维素膜上具有兔抗TPX、CatB4或TPX+CatB4蛋白多克隆抗体包被的质控线，以及TPX、CatB4或TPX+CatB4重组抗原包被的检测线。本发明的试纸条特异性强，稳定性好，操作简单，检测快速，只需5～10分钟即可读取结果，适合现场检测。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN101381767B
公开(公告)日：2010-12-08
申请号：CN200810137388.4
申请日：2008-10-24
Applicant: 东北农业大学 , 中华人民共和国黑龙江出入境检验检疫局
Abstract: 本发明提供了一种旋毛虫通用型实时荧光PCR检测方法。确定以各旋毛虫隔离种线粒体LS-rRNA基因保守区序列作为扩增靶序列，设计合成了一对特异性引物和一条TaqMAN MGB探针应用于对旋毛虫的通用检测。根据不同浓度梯度的阳性质控标准品制作的定量标准曲线可以看出，不同梯度定量模板数的对数值与Ct值之间有较好的相关性，其相关系数为0.9984；同时，该检测方法具有很高的灵敏度，最低能检测到132个拷贝数和10-5条旋毛虫；对其他寄生虫和健康宿主及水对照进行检测表明，该方法具有很好的特异性；重复性实验表明，本发明提供的检测体系具有很好的稳定性，其检测结果变异较小，控制在统计学范围之内。
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公开(公告)号：CN101401782A
公开(公告)日：2009-04-08
申请号：CN200810137350.7
申请日：2008-10-17
Applicant: 东北农业大学
IPC: A61K9/00 , A61K31/7048 , A61P33/00
Abstract: 本发明提供了一种多拉菌素浇泼剂及其制备方法，它是由丙二醇、无水乙醇、氮酮、吐温－80和2，6－二叔丁基对甲酚组成的多拉菌素(Doramectin)浇泼剂，氮酮为透皮吸收促进剂，促进多拉菌素的透皮吸收，丙二醇为溶剂，同时与氮酮合用具有促进多拉菌素透皮吸收之协同作用，吐温－80为增溶剂，使多拉菌素易于溶解，无水乙醇为辅剂，可降低本浇泼剂的粘度，易于浇泼剂透过被毛渗入皮肤，2，6－二叔丁基对甲酚为抗氧化剂。本发明的多拉菌素浇泼剂毒性小，成本较低，使用方便，可用于驱杀动物的体内线虫和体外寄生虫。
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公开(公告)号：CN102702334A
公开(公告)日：2012-10-03
申请号：CN201210236741.0
申请日：2012-07-10
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 一种诊断绵羊肺腺瘤病毒的重组蛋白抗原及其制备方法，涉及一种重组蛋白抗原及其制备方法。本发明提供一种诊断绵羊肺腺瘤病毒的重组蛋白抗原及其制备方法，目的是表达出完整的未被截短的CA蛋白，提高抗原性。诊断绵羊肺腺瘤病毒的重组蛋白抗原的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。方法：以提取的基因组DNA为模板进行PCR扩增，获得目的基因；与载体进行连接，得重组质粒；将重组质粒和表达载体pET-28a连接，转化感受态中，测序鉴定；将阳性菌接种到LB培养基中，向菌液中加入IPTG，离心取沉淀，超声后离心，吸取上清，纯化，即获得重组蛋白。本发明获得的重组蛋白以上清形式表达，生物活性好。用于绵羊肺腺瘤病毒检测。
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公开(公告)号：CN1961844A
公开(公告)日：2007-05-16
申请号：CN200610151054.3
申请日：2006-11-24
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明公开了一种旋毛虫活体传代方法。它包括：首先选择2月龄、品种相同的健康实验动物接种，接种前停饮2～3天；在生物显微镜下，将计数准确的幼虫用小型胃管经口接种给实验动物；实验动物接种后放在饲养笼具中，每天观察接种实验动物的健康状况，于接种后40～60天宰杀接种实验动物，取膈肌进行压片镜检，观察到典型的虫体形态，并确为单一旋毛虫隔离种后即可进行虫体的保藏。本发明规定了旋毛虫活体传代操作的基本原则、方法及技术要求，适用于国际和国内各科研、教学、检疫和生产单位的不同旋毛虫虫种的活体传代和保存。
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公开(公告)号：CN1811431A
公开(公告)日：2006-08-02
申请号：CN200510010584.1
申请日：2005-11-30
Applicant: 东北农业大学
IPC: G01N33/53 , G01N33/531 , C12Q1/00
Abstract: 本发明提供的是一种检测本地旋毛形线虫抗体的重组原核表达蛋白抗原及其制备方法。本产品可作为检测本地旋毛形线虫抗体的间接－ELISA及Dot－ELISA方法的检测抗原，也可作为预防本地旋毛形线虫感染的基因工程亚单位疫苗。本产品制备过程包括：(1)设计扩增TNPG基因的特异性引物；(2)通过PCR扩增获得TNPG基因片段；(3)对TNPG基因进行克隆、测序鉴定；(4)将TNPG基因定向亚克隆至pET－30a原核表达载体；(5)TNPG基因在大肠杆菌的诱导表达；(6)TNPG基因表达蛋白的亲合层析纯化。
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