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公开(公告)号:CN114304368A
公开(公告)日:2022-04-12
申请号:CN202111583581.2
申请日:2021-12-22
Applicant: 华东师范大学
Abstract: 本发明公开了一种利用蛋白质谷氨酰胺酶改性豌豆蛋白的方法,通过采用蛋白质谷氨酰胺酶对豌豆蛋白进行脱酰胺改性,获得酶改性的豌豆蛋白;具体包括以下步骤:将豌豆蛋白边搅拌边加入磷酸缓冲液中形成一定底物浓度的蛋白质分散溶液;向所述豌豆蛋白分散液中加入食品级蛋白质谷氨酰胺酶进行脱酰胺处理;反应完成后,将所述豌豆蛋白分散液进行水浴使蛋白质谷氨酰胺酶灭活;对所述豌豆蛋白分散液进行真空冷冻干燥得到脱酰胺改性豌豆蛋白。该方法工艺简单,能使豌豆蛋白脱酰胺,从而提高其溶解度、起泡性和乳化稳定性,可大规模工业化生产应用。
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公开(公告)号:CN110628872A
公开(公告)日:2019-12-31
申请号:CN201910885354.1
申请日:2019-09-19
Applicant: 华东师范大学
Abstract: 本发明公开了一种基于特定培养基组成的筛选平板和细胞微孔板结合的4-α-糖基转移酶(4GT)高产菌株的高效高通量筛选方法,属于生物工程技术领域。本发明包括高通量平板初筛方法的建立;高通量平板初筛方法的优化;4GT基因的易错PCR法诱变;菌株的基于细胞微孔板的高通量平板初筛;菌株的摇瓶复筛。本发明对传统的筛选方法进行了改进,有效地减低了工作强度,提高了高产菌株的筛选效率。
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公开(公告)号:CN104587453A
公开(公告)日:2015-05-06
申请号:CN201410839927.4
申请日:2014-12-24
Applicant: 华东师范大学
Abstract: 本发明涉及一种GLP-1衍生物颗粒复合物及其制备方法、以及其在制备糖尿病治疗药物与减肥药物中的应用。所述复合物是在修饰聚合物γ-PGA-L-PAE形成的颗粒中包载GLP-1衍生物aGLP-1或mGLP-1所形成的一种壳核结构复合体系。本发明复合物粒子能在溶液中稳定存在,能抵御DPPIV酶对GLP-1衍生物降解,延长体循环时间,具缓释效应,延长其体内的活性时间,不仅能实现长效降血糖,还具有控制体重增长的减肥效果。本发明还公开了降血糖和/或降体重的组合物。本发明制备方法中涉及的原料均无生物毒性,安全性高,成本低,制备工艺简单,包裹效率高,所得复合物粒径均匀可控,稳定性好,体内活性时间长,体重控制效果好,适合工业化规模生产,具良好应用前景。
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公开(公告)号:CN102558339A
公开(公告)日:2012-07-11
申请号:CN201210012881.X
申请日:2009-01-12
Applicant: 华东师范大学
IPC: C07K14/605 , C07K1/06 , C07K1/04 , A61K38/26 , A61P3/10
CPC classification number: Y02P20/55
Abstract: 本发明公开了一种GLP-1衍生物,其特征在于,该衍生物的分子结构式为以下任何一种结构式:aGLP-1(7-36)即SeqIDNo.2;aGLP-1(7-37)即SeqIDNo.3;或aGLP-1(7-38)即SeqIDNo.4。本发明还公开了GLP-1衍生物的固相化学合成制备方法,以及在制备治疗糖尿病的药物中的用途。
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公开(公告)号:CN101463081B
公开(公告)日:2012-07-04
申请号:CN200910045188.0
申请日:2009-01-12
Applicant: 华东师范大学
CPC classification number: Y02P20/55
Abstract: 本发明公开一种GLP-1衍生物,其特征在于,该衍生物的分子结构式为以下任何一种结构式:aGLP-1(7-36)即Seq ID No.2;aGLP-1(7-37)即Seq ID No.3;或aGLP-1(7-38)即Seq ID No.4。本发明还公开了GLP-1衍生物的固相化学合成制备方法,以及在制备治疗糖尿病的药物中的用途。
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公开(公告)号:CN102191207A
公开(公告)日:2011-09-21
申请号:CN201010115437.1
申请日:2010-03-01
Applicant: 华东师范大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/12 , C12N15/70 , C12P21/06 , C12P21/02 , A61K38/18 , A61P3/10 , A61P3/06 , C12R1/19
Abstract: 本发明提供一种表达可溶性FGF-21的基因工程菌,该菌包括携带质粒pET32a(+)-PT7lac-TrxA-6×His-FGF-21的大肠杆菌DH5α,以及同时携带质粒pET32a(+)-PT7lac-TrxA-6×His-FGF-21和质粒pTf16-ParaB-tig的大肠杆菌BL21(DE3)。本发明还提供含有FGF-21序列的基因工程菌,表达可溶性FGF-21的基因工程菌的构建方法。本发明还提供用该菌生产FGF-21的方法,用表达分子伴侣tig和自诱导培养方法得到可溶性FGF-21。本发明还提供该菌生产的FGF-21在制备治疗糖尿病的药物中的应用。本发明纯化工艺简单,易于操作,生产成本低,且表达产物有降血糖和调节脂代谢的生物学活性。
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公开(公告)号:CN102134274A
公开(公告)日:2011-07-27
申请号:CN201010101852.1
申请日:2010-01-25
Applicant: 华东师范大学
Abstract: 本发明提供一种人GLP-1衍生物,即tGLP-1衍生物,所述衍生物的分子结构式为tGLP-1(7-38),Seq ID NO.2;其中,Xaa2是Ser;Xaa20是Gln;Xaa28是Asp;Xaa30是Thr,Asp,Ser,Ala,Gly,Leu,Gln,His中的任何一种;Xaa32是Cys。本发明还提供一种人GLP-1衍生物的制备方法及应用。
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公开(公告)号:CN101463081A
公开(公告)日:2009-06-24
申请号:CN200910045188.0
申请日:2009-01-12
Applicant: 华东师范大学
CPC classification number: Y02P20/55
Abstract: 本发明公开一种GLP-1衍生物,其特征在于,该衍生物的分子结构式为以下任何一种结构式:aGLP-1(7-36)即Seq ID No.2;aGLP-1(7-37)即Seq ID No.3;或aGLP-1(7-38)即Seq ID No.4。本发明还公开了GLP-1衍生物的固相化学合成制备方法,以及在制备治疗糖尿病的药物中的用途。
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公开(公告)号:CN101440369A
公开(公告)日:2009-05-27
申请号:CN200810035198.1
申请日:2008-03-26
Applicant: 华东师范大学
Abstract: 本发明涉及一种缺失的霍乱弧菌封闭带毒素的表达方法和应用,属于生物工程技术领域。首先,构建含cZOT基因的大肠杆菌(E.coli)基因工程菌,接着构建高效表达cZOT的基因工程菌,制备获得TrxA-cZOT融合蛋白,纯化得cZOT。本发明与已有技术相比较提高了cZOT的表达量,降低了生产成本;只要进行一次亲和层析,便可从发酵液中得到较纯的TrxA-cZOT融合蛋白,纯化步骤简单,得率高。
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公开(公告)号:CN100460502C
公开(公告)日:2009-02-11
申请号:CN200510023674.4
申请日:2005-01-28
Applicant: 华东师范大学
Abstract: 一种高效表达重组人汗腺抗菌肽的基因工程菌及其构建方法和应用,属于生物工程技术领域。该基因工程菌是携带重组质粒的大肠杆菌DH5α、BL21(DE3),所述的重组质粒是含人汗腺抗菌肽,即DCD-1L基因的质粒pET32a(+)。该基因工程菌的构建:根据DCD-1L的氨基酸组成,以引物的形式合成DCD-1L的两条DNA链,两条链之间有26bp互补,通过PCR扩增获得DCD-1L双链DNA,经酶切,插入质粒pET-32a(+),构建成重组质粒pET-32a-DCD-1L,转化大肠杆菌,获得高效表达重组人汗腺抗菌肽的基因工程菌。用所述的基因工程菌生产人汗腺抗菌肽的方法包括三个步骤:液体培养;纯化制得的人汗腺抗菌肽融合蛋白;和制备重组人汗腺抗菌肽。本发明的优点:生产重组人汗腺抗菌肽成本低;人汗腺抗菌肽的表达量高;纯化步骤简便,易于操作;得率高。
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