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公开(公告)号：CN1263778A
公开(公告)日：2000-08-23
申请号：CN99125780.4
申请日：1999-12-27
Applicant: 华东师范大学
Abstract: 本发明涉及采用基因工程技术,通过PCR基因扩增从特定枯草芽孢杆菌中“钓“出能强烈分解纤维蛋白的蛋白水解酶基因,再经转化获得基因工程菌,由基因工程菌经培养发酵分离,纯化,获得溶栓酶制剂。经试验,表明本溶栓剂具有溶解纤维蛋白(原),特别是溶解交联纤维蛋白的能力,有效抑制血栓形成和溶解血栓基质,使血流畅通,作口服液,可预防和治疗心脑血管疾病,本发明溶栓剂原料来源广经济,工艺成熟,提取简便,成本低。
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公开(公告)号：CN100460502C
公开(公告)日：2009-02-11
申请号：CN200510023674.4
申请日：2005-01-28
Applicant: 华东师范大学
Abstract: 一种高效表达重组人汗腺抗菌肽的基因工程菌及其构建方法和应用，属于生物工程技术领域。该基因工程菌是携带重组质粒的大肠杆菌DH5α、BL21(DE3)，所述的重组质粒是含人汗腺抗菌肽，即DCD-1L基因的质粒pET32a(+)。该基因工程菌的构建：根据DCD-1L的氨基酸组成，以引物的形式合成DCD-1L的两条DNA链，两条链之间有26bp互补，通过PCR扩增获得DCD-1L双链DNA，经酶切，插入质粒pET-32a(+)，构建成重组质粒pET-32a-DCD-1L，转化大肠杆菌，获得高效表达重组人汗腺抗菌肽的基因工程菌。用所述的基因工程菌生产人汗腺抗菌肽的方法包括三个步骤：液体培养；纯化制得的人汗腺抗菌肽融合蛋白；和制备重组人汗腺抗菌肽。本发明的优点：生产重组人汗腺抗菌肽成本低；人汗腺抗菌肽的表达量高；纯化步骤简便，易于操作；得率高。
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公开(公告)号：CN1676600A
公开(公告)日：2005-10-05
申请号：CN200510023674.4
申请日：2005-01-28
Applicant: 华东师范大学
Abstract: 一种高效表达重组人汗腺抗菌肽的基因工程菌及其构建方法和应用，属于生物工程技术领域。该基因工程菌是携带重组质粒的大肠杆菌DH5α、BL21(DE3)，所述的重组质粒是含人汗腺抗菌肽，即DCD－1L基因的质粒pET32a(+)。该基因工程菌的构建：根据DCD－1L的氨基酸组成，以引物的形式合成DCD－1L的两条DNA链，两条链之间有26bp互补，通过PCR扩增获得DCD－1L双链DNA，经酶切，插入质粒pET－32a(+)，构建成重组质粒pET－32a－DCD－1L，转化大肠杆菌，获得高效表达重组人汗腺抗菌肽的基因工程菌。用所述的基因工程菌生产人汗腺抗菌肽的方法包括三个步骤：液体培养；纯化制得的人汗腺抗菌肽融合蛋白；和制备重组人汗腺抗菌肽。本发明的优点：生产重组人汗腺抗菌肽成本低；人汗腺抗菌肽的表达量高；纯化步骤简便，易于操作；得率高。
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公开(公告)号：CN1108817C
公开(公告)日：2003-05-21
申请号：CN99125780.4
申请日：1999-12-27
Applicant: 华东师范大学
Abstract: 本发明涉及采用基因工程技术，通过PCR基因扩增从特定枯草芽孢杆菌中“钓”出能强烈分解纤维蛋白的蛋白水解酶基因，再经转化获得基因工程菌，由基因工程菌经培养发酵分离，纯化，获得溶栓酶制剂。经试验，表明本溶栓剂具有溶解纤维蛋白(原)，特别是溶解交联纤维蛋白的能力，有效抑制血栓形成和溶解血栓基质，使血流畅通，作口服剂，可预防和治疗心脑血管疾病，本发明溶栓剂原料来源广经济，工艺成熟，提取简便，成本低。
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公开(公告)号：CN1068853A
公开(公告)日：1993-02-10
申请号：CN91107455.4
申请日：1991-07-19
Applicant: 华东师范大学
Abstract: 一种枯草杆菌克隆载体pNC3及其构建方法，该克隆载体利用枯草杆菌中性蛋白酶基因作指示基因和前肽区域具有可缩性，由去除部分前肽区域或在前肽区域中插入带有多克隆位点的DNA片段构建而成，具有重组体筛选标记，能直接筛选出重组体，易于检测，蛋白酶底物成本低，适用于研究蛋白质分泌机制，是一种应用前景宽广的分子生物学研究工具。
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