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公开(公告)号：CN100344323C
公开(公告)日：2007-10-24
申请号：CN200410066897.4
申请日：2004-09-30
Applicant: 华东师范大学
Abstract: 一种人胰高血糖素样肽-1的复合物及其制备方法，属肽或蛋白质的修饰复合物及其制备的技术领域。该复合物中的人胰高血糖素样肽-1指人胰高血糖素样肽-1(7-37)或人胰高血糖素样肽-1(7-36)NH2，该复合物由人胰高血糖素样肽-1和含经琥珀酰亚胺活化的活性基团的单甲氧基聚乙二醇组成，两者通过前者的氨基酸游离氨基和后者的琥珀酰亚胺酯键形成的酰胺键连接在一起。将人胰高血糖素样肽-1与含经琥珀酰亚胺活化的活性基团的单甲氧基聚乙二醇进行mPEG修饰反应，两者连结成人胰高血糖素样肽-1的复合物，即mPEG-GLP-1。本发明的方法操作简便，原料易得。本发明的方法制备的产物，人胰高血糖素样肽-1生物稳定性高，体内半衰期长，生物利用度高。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN100460502C
公开(公告)日：2009-02-11
申请号：CN200510023674.4
申请日：2005-01-28
Applicant: 华东师范大学
Abstract: 一种高效表达重组人汗腺抗菌肽的基因工程菌及其构建方法和应用，属于生物工程技术领域。该基因工程菌是携带重组质粒的大肠杆菌DH5α、BL21(DE3)，所述的重组质粒是含人汗腺抗菌肽，即DCD-1L基因的质粒pET32a(+)。该基因工程菌的构建：根据DCD-1L的氨基酸组成，以引物的形式合成DCD-1L的两条DNA链，两条链之间有26bp互补，通过PCR扩增获得DCD-1L双链DNA，经酶切，插入质粒pET-32a(+)，构建成重组质粒pET-32a-DCD-1L，转化大肠杆菌，获得高效表达重组人汗腺抗菌肽的基因工程菌。用所述的基因工程菌生产人汗腺抗菌肽的方法包括三个步骤：液体培养；纯化制得的人汗腺抗菌肽融合蛋白；和制备重组人汗腺抗菌肽。本发明的优点：生产重组人汗腺抗菌肽成本低；人汗腺抗菌肽的表达量高；纯化步骤简便，易于操作；得率高。
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公开(公告)号：CN1676600A
公开(公告)日：2005-10-05
申请号：CN200510023674.4
申请日：2005-01-28
Applicant: 华东师范大学
Abstract: 一种高效表达重组人汗腺抗菌肽的基因工程菌及其构建方法和应用，属于生物工程技术领域。该基因工程菌是携带重组质粒的大肠杆菌DH5α、BL21(DE3)，所述的重组质粒是含人汗腺抗菌肽，即DCD－1L基因的质粒pET32a(+)。该基因工程菌的构建：根据DCD－1L的氨基酸组成，以引物的形式合成DCD－1L的两条DNA链，两条链之间有26bp互补，通过PCR扩增获得DCD－1L双链DNA，经酶切，插入质粒pET－32a(+)，构建成重组质粒pET－32a－DCD－1L，转化大肠杆菌，获得高效表达重组人汗腺抗菌肽的基因工程菌。用所述的基因工程菌生产人汗腺抗菌肽的方法包括三个步骤：液体培养；纯化制得的人汗腺抗菌肽融合蛋白；和制备重组人汗腺抗菌肽。本发明的优点：生产重组人汗腺抗菌肽成本低；人汗腺抗菌肽的表达量高；纯化步骤简便，易于操作；得率高。
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公开(公告)号：CN1676163A
公开(公告)日：2005-10-05
申请号：CN200410066897.4
申请日：2004-09-30
Applicant: 华东师范大学
Abstract: 一种人胰高血糖素样肽－1的复合物及其制备方法，属肽或蛋白质的修饰复合物及其制备的技术领域。该复合物中的人胰高血糖素样肽－1指人胰高血糖素样肽－1(7－37)或人胰高血糖素样肽－1(7－36)NH2，该复合物由人胰高血糖素样肽－1和含经琥珀酰亚胺活化的活性基团的单甲氧基聚乙二醇组成，两者通过前者的氨基酸游离氨基和后者的琥珀酰亚胺酯键形成的酰胺键连接在一起。将人胰高血糖素样肽－1与含经琥珀酰亚胺活化的活性基团的单甲氧基聚乙二醇进行mPEG修饰反应，两者连结成人胰高血糖素样肽－1的复合物，即mPEG－GLP－1。本发明的方法操作简便，原料易得。本发明的方法制备的产物，人胰高血糖素样肽－1生物稳定性高，体内半衰期长，生物利用度高。
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公开(公告)号：CN1587385A
公开(公告)日：2005-03-02
申请号：CN200410054397.9
申请日：2004-09-08
Applicant: 华东师范大学
Abstract: 一种高效表达人胰高血糖素样肽－1的基因工程菌及其构建方法和应用，属于生物工程技术领域。该基因工程菌是携带含人胰高血糖素样肽－1基因，即GLP－1基因的重组质粒的大肠杆菌DH5α、BL21 (DE3)或BLR(DE3)。该基因工程菌的构建方法是在DNA水平上，将含有人胰高血糖素样肽－1基因的DNA序列串联为多聚体，构建成表达载体，转化大肠杆菌，获得高效表达人胰高血糖素样肽－1的基因工程菌。用该基因工程菌，通过液体培养、纯化制得的人胰高血糖素样肽－1融合蛋白和制备人胰高血糖素样肽－1三步可生产人胰高血糖素样肽－1。本发明有以下优点： 1.构建基因工程菌的人胰高血糖素样肽－1的表达量高；2.用该基因工程菌生产人胰高血糖素样肽－1时，纯化步骤简便，得率高，生产成本低。
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公开(公告)号：CN100392070C
公开(公告)日：2008-06-04
申请号：CN200410054397.9
申请日：2004-09-08
Applicant: 华东师范大学
Abstract: 一种高效表达人胰高血糖素样肽-1的基因工程菌及其构建方法和应用，属于生物工程技术领域。该基因工程菌是携带含人胰高血糖素样肽-1基因，即GLP-1基因的重组质粒的大肠杆菌DH5α、BL21(DE3)或BLR(DE3)。该基因工程菌的构建方法是在DNA水平上，将含有人胰高血糖素样肽-1基因的DNA序列串联为多聚体，构建成表达载体，转化大肠杆菌，获得高效表达人胰高血糖素样肽-1的基因工程菌。用该基因工程菌，通过液体培养、纯化制得的人胰高血糖素样肽-1融合蛋白和制备人胰高血糖素样肽-1三步可生产人胰高血糖素样肽-1。本发明有以下优点：1、构建基因工程菌的人胰高血糖素样肽-1的表达量高；2、用该基因工程菌生产人胰高血糖素样肽-1时，纯化步骤简便，得率高，生产成本低。
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