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公开(公告)号:CN108359669A
公开(公告)日:2018-08-03
申请号:CN201810148083.7
申请日:2018-02-13
Applicant: 江南大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/77 , C12N1/21 , C12P13/00 , C12R1/15
Abstract: 本发明公开了一种棒杆菌启动子及其应用,属于基因工程技术领域。本发明提供的启动子PdnaK、PdnaK(+1)、PdnaK(-1),解决了在谷氨酸棒杆菌中启动子强度不够强的问题。将启动子PdnaK、PdnaK(+1)、PdnaK(-1)直接导入棒杆菌的待表达基因前,应用于基因的表达及相关代谢产物的生产,提供了比Psod和Ptuf更强的启动子。本发明还可应用于协调棒杆菌中其它基因的表达及相关代谢产物的合成。
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公开(公告)号:CN106119181A
公开(公告)日:2016-11-16
申请号:CN201610512651.8
申请日:2016-06-30
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种产聚羟基丁酸羟基戊酸酯的基因工程菌及其应用方法,属于基因工程和发酵工程领域。本发明构建的基因工程菌可利用单一碳源生产聚3‑羟基丁酸酯‑co‑3‑羟基戊酸酯(PHBV),且3HV的摩尔分数为66%。本发明解决了PHBV生产中辅助碳源丙酸盐的添加带来的成本过高的问题。经过130h的3L发酵罐进行补料分批发酵,本发明提供的谷氨酸棒杆菌基因工程菌在胞内可以产生占细胞干重比例为20%的PHBV,其3HV比例为66%,同时产生异亮氨酸。
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公开(公告)号:CN106086056A
公开(公告)日:2016-11-09
申请号:CN201610415109.0
申请日:2016-06-13
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种恶臭假单胞菌基因敲除和基因组精简系统,属于微生物基因工程领域。本发明的恶臭假单胞菌基因敲除系统和基因组精简系统巧妙结合了自杀质粒敲除系统和位点特异性重组系统,大大提高了二轮筛选正确率,高达90%以上,在用于长达69个基因的基因簇的敲除时仍然表现出90%以上正确率。本发明实现基因簇的连续敲除,操作简便,高效,正确率高,成本低。本发明为精简优化恶臭假单胞菌基因组奠定了分子基础,有利于实现合成生物学底盘细胞的高效构建。
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公开(公告)号:CN103820377B
公开(公告)日:2016-06-29
申请号:CN201410052649.8
申请日:2014-02-17
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种产Kdo2-lipidA的基因工程菌及其构建方法和应用,属于遗传工程领域。所述基因工程菌为WJW00,所述基因工程菌为无抗性E.coliW3110△rfaD,其中rfaD发生缺失突变失活。本发明构建的菌株Kdo2-lipidA结构正确,生长状况良好,没有引入任何外源抗性基因序列,更有利于大规模工业化生产。
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公开(公告)号:CN101985631B
公开(公告)日:2012-05-30
申请号:CN201010108464.6
申请日:2010-02-10
Applicant: 江南大学
IPC: C12N15/77 , C12Q1/68 , C12N15/113 , C12R1/15
Abstract: 本发明公开了一种棒状杆菌启动子探测载体及其构建方法和应用,属于基因工程技术领域。本发明的棒状杆菌启动子探测载体pDXW-11,可用于筛选能在棒状杆菌中高效表达的启动子,通过质粒的探测,筛选到一种棒状杆菌强启动子tac-M,在棒状杆菌中能高效表达,尤其适用于棒状杆菌代谢产物的研究和生产。
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公开(公告)号:CN102399736A
公开(公告)日:2012-04-04
申请号:CN201110316939.5
申请日:2011-10-18
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种产单磷酸类脂A的基因工程菌及其构建方法和应用,属于遗传工程领域。所述基因工程菌为E.coli W3110 ΔlacI lacZ:: FnlpxE,其中lacI发生缺失突变失活,lacZ基因敲入表达FnlpxE基因。本发明构建的菌株在保持类脂结构单一的基础上又降低了生产成本,其没有引入任何外源抗性基因序列,更有利于大规模工业化生产。
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公开(公告)号:CN102154345A
公开(公告)日:2011-08-17
申请号:CN201110020575.6
申请日:2011-01-18
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种谷氨酸脱羧酶基因及其应用,属于基因工程技术领域。是将来源于短乳杆菌的谷氨酸脱羧酶基因gadB2、以及与gadB2相连的转运蛋白基因gadC和调控蛋白基因gadR通过棒状杆菌表达载体pDXW8导入到谷氨酸棒杆菌ATCC13032中,重组谷氨酸棒杆菌能够将其自身积累的谷氨酸直接转化成γ-氨基丁酸。
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公开(公告)号:CN101372713B
公开(公告)日:2011-06-15
申请号:CN200810156663.7
申请日:2008-09-23
Applicant: 江南大学
Abstract: 一种应用多重PCR技术检测土拉弗朗西斯菌的方法,属于生物战剂检测技术领域。本发明以土拉弗朗西斯菌的内毒素相关基因lpxF,lpxE和flmK为特异性靶点,通过NCBI微生物基因组全序列Blastp比对,确立上述三个基因的特异性,设计相关引物,采用多重PCR进行检测;电泳检测出现三条条带,依次为447bp,717bp,1004bp,依据三条特异性条带的出现判为阳性,否则判为阴性。本发明检测方法操作简便,容易推广应用;检验周期短,相对于传统检验方法得到结果所需要的5~7d,本方法的检验周期为3h,远快于传统方法,可以极大提高检验效率;灵敏度高,特异性好;检测限达到了0.01ng/μL和5×105cfu/mL,达到并超过传统的检测方法,同时检出率更高。
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公开(公告)号:CN101985631A
公开(公告)日:2011-03-16
申请号:CN201010108464.6
申请日:2010-02-10
Applicant: 江南大学
IPC: C12N15/77 , C12Q1/68 , C12N15/113 , C12R1/15
Abstract: 本发明公开了一种棒状杆菌启动子探测载体及其构建方法和应用,属于基因工程技术领域。本发明的棒状杆菌启动子探测载体pDXW-11,可用于筛选能在棒状杆菌中高效表达的启动子,通过质粒的探测,筛选到一种棒状杆菌强启动子tac-M,在棒状杆菌中能高效表达,尤其适用于棒状杆菌代谢产物的研究和生产。
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公开(公告)号:CN101372713A
公开(公告)日:2009-02-25
申请号:CN200810156663.7
申请日:2008-09-23
Applicant: 江南大学
Abstract: 一种应用多重PCR技术检测土拉弗朗西斯菌的方法,属于生物战剂检测技术领域。本发明以土拉弗朗西斯菌的内毒素相关基因lpxF,lpxE和flmK为特异性靶点,通过NCBI微生物基因组全序列Blastp比对,确立上述三个基因的特异性,设计相关引物,采用多重PCR进行检测;电泳检测出现三条条带,依次为447bp,717bp,1004bp,依据三条特异性条带的出现判为阳性,否则判为阴性。本发明检测方法操作简便,容易推广应用;检验周期短,相对于传统检验方法得到结果所需要的5~7d,本方法的检验周期为3h,远快于传统方法,可以极大提高检验效率;灵敏度高,特异性好;检测限达到了0.01ng/μL和5×105cfu/mL,达到并超过传统的检测方法,同时检出率更高。
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