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公开(公告)号:CN103454371A
公开(公告)日:2013-12-18
申请号:CN201310310332.5
申请日:2013-07-23
Applicant: 复旦大学
IPC: G01N30/89
Abstract: 本发明属生物技术领域,涉及基于一维长柱液相色谱串联质谱的蛋白质组分离鉴定方法。该鉴定方法使用50cm的反相色谱柱,采用一维长梯度对蛋白质组学样品进行分离,经电喷雾电离,串联质谱进行一维蛋白质组分离鉴定,使用结果表明,本鉴定方法的实验操作简单、不需预分馏分,一次实验可达到传统二维分离质谱鉴定的效果;特别是对于少量样品的处理,一次实验仅需几微克样品就可完成一次蛋白质组学的数据分析,所需样品量少,对复杂生物蛋白质组的仪器分析效率达到7小时内实现对4000个以上蛋白质的分析鉴定,实现蛋白质的快速高效鉴定。
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公开(公告)号:CN101907603B
公开(公告)日:2012-09-05
申请号:CN201010233232.3
申请日:2010-07-19
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属分析化学技术领域,具体为一种基于18O标记的N-糖链相对定量方法。具体是将糖苷内切酶催化生成的同位素18O标记的N-糖链与糖苷内切酶催化生成的不标记的N-糖链按等摩尔比混合为溶液,由生物质谱检测峰强度,再经计算消除同位素峰重叠后,进行相对定量。本发明成功解决了同位素18O标记的糖链与不标记的糖链在质谱中同位素峰重叠的问题。本发明在两个数量级的动态范围内,取得了良好的线性和较低的变异系数,为糖苷内切酶催化同位素标记N-糖链的方法在定量糖组学中的应用提供了有效的修正和计算方法。
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公开(公告)号:CN101096636B
公开(公告)日:2011-12-14
申请号:CN200710044001.6
申请日:2007-07-19
Applicant: 复旦大学
IPC: C12M1/34
Abstract: 本发明属于微流控芯片技术领域,具体为一种可换芯式微流控芯片蛋白酶解反应器及其制备方法。该反应器由具有双尖端单通道的微流控芯片和固定有蛋白酶的玻璃纤维(即酶芯)组成,其中,酶芯贯穿芯片的微流通道并从两尖端穿出。酶芯由玻璃纤维通过浸涂方式在表面修饰壳聚糖膜等,然后通过吸附、包埋或共价键合等技术将蛋白酶固定在玻璃纤维表面而获得。使用前,将该玻璃纤维酶芯插入微流控芯片的微通道中,即得可换芯式微流控芯片酶反应器。本发明中,玻璃纤维酶芯价格低廉,可以根据需要更换,从而提高了芯片和酶试剂的使用效率,降低了酶法测定的成本。本发明制作的反应器在临床诊断、环境监测、生命科学研究和食品分析等领域有良好的应用前景。
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公开(公告)号:CN102192962A
公开(公告)日:2011-09-21
申请号:CN201010128778.2
申请日:2010-03-18
Applicant: 复旦大学
IPC: G01N30/16
Abstract: 本发明属样品分析领域,涉及一种激光辅助热解析质谱进样装置和方法,所述的进样装置由激光模块与辅助气体组成,激光模块和电源集成在电路板上,安装在质谱仪器中,在探头上开有3个孔,加有3路管路,所述激光模块加热样品,样品挥发后,由辅助气体吹扫进入质谱。本发明使用小功率近红外激光加热表面,促使有机物挥发,用于将固体或者液体等有机样品直接送入质谱检测,具有快速、直接进样的优点。本发明装置体积小、进样速度快,不需要额外的配备装置,非常适用于便携式质谱的快速检测在线分析以及常规实验室的快速测定。
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公开(公告)号:CN101363779A
公开(公告)日:2009-02-11
申请号:CN200810039698.2
申请日:2008-06-26
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属生化分析领域,涉及一种提高肽段离子化效率的方法。本发明利用碱性和疏水性有机化合物对蛋白质或肽段羧基衍生,提高肽段离子化效率,并对所衍生的样品直接进行质谱分析和鉴定。本发明选用的有机化合物能高效率、高特异性地与肽段的羧基形成共价键,从而有效地提高肽段与质子的结合能力和肽段的疏水性,极大地提高肽段的离子化效率,促使低丰度、难电离的肽段得到检测。本发明具有反应特异性高、副反应少、步骤简单、经济和省时等特点,可广泛用于蛋白质组学领域,大大提高了质谱对低丰度及难电离肽段的检测能力。
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公开(公告)号:CN101323874A
公开(公告)日:2008-12-17
申请号:CN200810036916.7
申请日:2008-04-30
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属蛋白质组学技术领域,具体为一种红外线辅助蛋白快速酶解方法。本发明将红外线灯泡安装在一有通气孔的箱子中,在箱的侧壁安装风扇以调节箱内温度,风扇的启动和关闭通过连有热电偶的温度控制仪控制,热电偶探头置于箱中以探测其中的温度,从而构成可控温的红外线辅助蛋白酶解装置。将蛋白质与蛋白水解酶如胰蛋白酶溶解于缓冲溶液中,于上述酶解装置中进行红外线辅助酶解,酶解时间缩短为5到10分钟,而酶解结果与传统的溶液酶解相当。本发明用红外线代替传统蛋白溶液酶解技术中使用的水浴,显著提高了酶解效率,设备简单,可用于批量蛋白样品的高通量酶解和鉴定。本发明提出在蛋白质研究、生物医学研究以及食品药品分析等领域有良好的应用前景。
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公开(公告)号:CN100439918C
公开(公告)日:2008-12-03
申请号:CN200610028369.9
申请日:2006-06-29
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属生化分析鉴定技术领域,具体是一种以氧化硅纳米粒子作为吸附剂,对痕量蛋白质以及蛋白质酶解样品脱盐富集并直接进行基质辅助激光解吸离子化/质谱(MALDI/MS)分析的方法。氧化硅纳米粒子能克服高浓度盐的干扰,对蛋白质以及蛋白质酶解多肽有很好的吸附效果。与传统耙上洗涤脱盐以及商业ZipTipTM脱盐比较,纳米材料脱盐效果最好。而且由于氧化硅纳米粒子与MALDI-MS有很好的相容性,被氧化硅纳米粒子吸附的样品无需样品洗脱步骤可直接进行MALDI-TOF/MS分析,操作简单,避免了洗脱过程带来的样品损失。本发明对浓度为10-10M的蛋白质酶解含盐样品进行鉴定,也可克服4M氯化钠或8M尿素对质谱的干扰,对蛋白质的富集效率可达100倍。
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公开(公告)号:CN1873407A
公开(公告)日:2006-12-06
申请号:CN200610028369.9
申请日:2006-06-29
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属生化分析鉴定技术领域,具体是一种以氧化硅纳米粒子作为吸附剂,对痕量蛋白质以及蛋白质酶解样品脱盐富集并直接进行基质辅助激光解吸离子化/质谱(MALDI/MS)分析的方法。氧化硅纳米粒子能克服高浓度盐的干扰,对蛋白质以及蛋白质酶解多肽有很好的吸附效果。与传统耙上洗涤脱盐以及商业ZipTipTM脱盐比较,纳米材料脱盐效果最好。而且由于氧化硅纳米粒子与MALDI-MS有很好的相容性,被氧化硅纳米粒子吸附的样品无需样品洗脱步骤可直接进行MALDI-TOF/MS分析,操作简单,避免了洗脱过程带来的样品损失。本发明对浓度为10-10M的蛋白质酶解含盐样品进行鉴定,也可克服4M氯化钠或8M尿素对质谱的干扰,对蛋白质的富集效率可达100倍。
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公开(公告)号:CN1683931A
公开(公告)日:2005-10-19
申请号:CN200510024053.8
申请日:2005-02-25
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明涉及一种聚二甲基硅氧烷阳模原位聚合制备有机玻璃微流控芯片的方法。采用光刻和微复制技术制作含有微流控芯片微流通道结构的聚二甲基硅氧烷阳模。将甲基丙烯酸甲酯与少量热引发剂和光引发剂混合、加热,使单体溶液预聚成甘油状清亮溶液。将一中间镂空为芯片尺寸的矩形的聚二甲基硅氧烷片放在聚二甲基硅氧烷阳模上,构成芯片模具,将上述预聚溶液注满模具空腔,再将一有机玻璃片盖在模具空腔上,用紫外光照射预聚溶液引发本体聚合,制得含微流通道的微流控芯片基片。基片与相同材料的盖片或盖膜通过溶剂辅助热压封装后,得有机玻璃微流控芯片。本发明方法操作简便、价格低廉,可进行批量生产。该芯片在环境监测、临床诊断和食品分析等领域中有良好的应用前景。
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