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公开(公告)号:CN103674918A
公开(公告)日:2014-03-26
申请号:CN201310680331.X
申请日:2013-12-12
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属生物技术领域,涉及一种基于凝集素液相悬浮芯片检测糖蛋白糖链结构的方法。本发明中,糖链和凝集素在三维环境中的反应,提高了凝集素芯片技术的灵敏度,克服了凝集素芯片技术中凝集素与糖蛋白在二维环境中反应时亲和力弱而难以高效检测糖基化蛋白的弊端。本发明所述方法可快速、简便、特异、高通量地检测蛋白质糖基化特征,使用的样品量较少,有利于不同样品之间的糖基化差异比较,为建立高通量蛋白质糖基化修饰差异谱分析提供技术平台,有利于探讨疾病分子标志物的不同糖基化状态对疾病的预测价值。
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公开(公告)号:CN103645325A
公开(公告)日:2014-03-19
申请号:CN201310676898.X
申请日:2013-12-12
Applicant: 复旦大学
IPC: G01N33/68 , G01N33/531
CPC classification number: G01N33/68 , G01N33/54326 , G01N2400/02 , G01N2570/00
Abstract: 本发明属生物技术领域,涉及一种抗体辅助的凝集素液相悬浮芯片多重检测糖蛋白糖链结构的方法。本发明通过将凝集素偶联在标记有不同染料的磁珠上,利用Bioplex检测系统对偶联有不同凝集素的磁珠进行识别,可通过在一个反应中加入偶联有不同凝集素的不同编号的磁珠,能同时对同一个蛋白上的不同糖型进行检测,显著提高了糖链结构检测的通量。本发明能够快速地,高通量地,特异地检测糖蛋白上的糖链结构,可进一步应用于临床生物标志物的检测当中,为疾病糖组学研究提供高效的手段。
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公开(公告)号:CN101907603A
公开(公告)日:2010-12-08
申请号:CN201010233232.3
申请日:2010-07-19
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属分析化学技术领域,具体为一种基于18O标记的N-糖链相对定量方法。具体是将糖苷内切酶催化生成的同位素18O标记的N-糖链与糖苷内切酶催化生成的不标记的N-糖链按等摩尔比混合为溶液,由生物质谱检测峰强度,再经计算消除同位素峰重叠后,进行相对定量。本发明成功解决了同位素18O标记的糖链与不标记的糖链在质谱中同位素峰重叠的问题。本发明在两个数量级的动态范围内,取得了良好的线性和较低的变异系数,为糖苷内切酶催化同位素标记N-糖链的方法在定量糖组学中的应用提供了有效的修正和计算方法。
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公开(公告)号:CN101906452A
公开(公告)日:2010-12-08
申请号:CN201010222361.2
申请日:2010-07-09
Applicant: 复旦大学
IPC: C12P21/00
Abstract: 本发明属分析化学技术领域,具体为一种糖苷内切酶催化同位素标记N-糖链的方法。本发明采用在18O水中进行糖苷内切酶酶解糖蛋白的反应,在N-糖链被酶切下的同时,在其还原末端标记上一个同位素18O分子;质谱检测结果证明,同位素18O标记的糖链分子量和不标记的糖链分子量之间相差2道尔顿,同位素18O分子被稳定地标记于糖链还原末端。本发明简单、高效,弥补了糖链同位素18O标记技术的空白,可以有效地用于糖链相对定量。
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公开(公告)号:CN101907603B
公开(公告)日:2012-09-05
申请号:CN201010233232.3
申请日:2010-07-19
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属分析化学技术领域,具体为一种基于18O标记的N-糖链相对定量方法。具体是将糖苷内切酶催化生成的同位素18O标记的N-糖链与糖苷内切酶催化生成的不标记的N-糖链按等摩尔比混合为溶液,由生物质谱检测峰强度,再经计算消除同位素峰重叠后,进行相对定量。本发明成功解决了同位素18O标记的糖链与不标记的糖链在质谱中同位素峰重叠的问题。本发明在两个数量级的动态范围内,取得了良好的线性和较低的变异系数,为糖苷内切酶催化同位素标记N-糖链的方法在定量糖组学中的应用提供了有效的修正和计算方法。
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