公开(公告)号：CN103689247A

公开(公告)日：2014-04-02

申请号：CN201310594969.1

申请日：2013-11-22

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 唐丽杰 ,  李一经 ,  乔薪瑗 ,  姜艳平 ,  崔文 ,  于慧 ,  刘敏

IPC: A23K1/18 ,  A23K1/00

Abstract: 本发明涉及一种作为断乳仔猪饲料添加剂的表达乳铁蛋白重组乳酸菌组合物，其特征在于，所述组合物将戊糖乳杆菌（Lactobacillus pentosus KLDS1.0413）和植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum KLDS1.0344）作为口服活载体，其中，戊糖乳杆菌和植物乳杆菌中均含有连接有PLF基因的穿梭表达载体pPG612.1。本发明可以替代抗生素，乳铁蛋白还能刺激肠道细胞的生长，增加肠道中有益菌群，如双歧杆菌和乳酸杆菌等的数量，减少大肠杆菌等有害菌群的繁殖，从而保障仔猪肠道健康发育，增强仔猪肠道对营养物质的消化、吸收能力，降低腹泻率，提高其生长性能，促进仔猪生长。

公开(公告)号：CN103555754A

公开(公告)日：2014-02-05

申请号：CN201310521441.1

申请日：2013-10-29

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 乔薪瑗 ,  李一经 ,  唐丽杰 ,  葛俊伟 ,  兰宇

IPC: C12N15/74 ,  C12N1/21 ,  C12N15/34 ,  A61K47/46 ,  C12R1/245

Abstract: 本发明公开了一种干酪乳杆菌菌影及其制备方法和应用，属于生物技术领域。本发明选择干酪乳杆菌作为研究对象，通过分离干酪乳杆菌的噬菌体，预测并克隆其裂解基因，将含有克隆得到的裂解基因的重组载体转化干酪乳杆菌，诱导裂解基因表达后制成菌影。本发明以干酪乳杆菌菌影作为抗原传递载体使用，做到了真正意义上的安全可靠。此外，干酪乳杆菌菌影可通过发酵大量生产，冻干后在室温下可保存较长时间，为进一步应用于生产实践降低了成本，也为进一步设计新型安全有效的药物，特别是疫苗的递送系统，从而应用于预防及治疗疾病提供了一种新的思路和方法。

公开(公告)号：CN102816788A

公开(公告)日：2012-12-12

申请号：CN201210302585.3

申请日：2012-08-23

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 马德星 ,  马春丽 ,  冯兴军 ,  高铭扬 ,  葛俊伟 ,  李广兴 ,  李一经

IPC: C12N15/74 ,  C12R1/01

Abstract: 一种在乳酸乳球菌中表达鸡堆型艾美耳球虫3-1E蛋白的方法，涉及一种表达鸡堆型艾美耳球虫3-1E蛋白的方法。本发明是要解决目前乳酸乳球菌中无法表达鸡艾美耳球虫子孢子/裂殖子阶段表面抗原3-1E的问题。方法：将鸡堆型艾美耳球虫3-1E基因序列依照乳酸乳球菌的密码子偏好性进行优化，插入克隆载体并转化大肠杆菌感受态细胞，得阳性转化子；将阳性转化子和乳酸菌表达载体酶切后连接，构建重组表达载体；转化乳酸菌感受态细胞，鉴定；进行重组菌培养及诱导，即完成在乳酸乳球菌NZ9000中表达3-1E蛋白。本发明将密码子优化后的经人工合成的3-1E蛋白成功的在乳酸乳球菌中进行了表达。本发明方法用于球虫病的预防领域。

公开(公告)号：CN101833002A

公开(公告)日：2010-09-15

申请号：CN201010151344.4

申请日：2010-04-21

Applicant: 东北农业大学 ,  中国动物卫生与流行病学中心

Inventor： 邵卫星 ,  李一经 ,  孙庆杰 ,  魏荣 ,  葛俊伟

IPC: G01N33/569 ,  C12N15/44 ,  C12N15/866 ,  C12N7/01 ,  C07K14/11

Abstract: 本发明涉及一种鉴别免疫动物是否感染A型流感病毒的抗体间接免疫荧光试验方法。该方法是用昆虫杆状病毒表达A型流感病毒NA蛋白作为抗原，建立抗体间接免疫荧光试验方法，检测A型流感病毒NA蛋白血清抗体。表达的蛋白可直接作为抗原，不需要纯化。本发明建立的方法是A型流感病毒“标记”疫苗的配套检测方法，用于鉴别接种了A型流感“标记”疫苗的动物，如禽、猪等是否感染相应亚型流感病毒；作为一种筛选方法，该方法可用于临床血清样品检测，判定接种了A型流感“标记”疫苗的动物，如禽、猪等是否感染相应亚型流感病毒，以便尽早采取相应的防控措施，有利于根除和消灭临床上流行的相应A型流感病毒。

公开(公告)号：CN101508969A

公开(公告)日：2009-08-19

申请号：CN200910071260.7

申请日：2009-01-14

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 刘敏 ,  李一经 ,  葛俊伟 ,  乔薪瑗 ,  赵丽丽

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/34 ,  C12N15/74 ,  C12R1/245

Abstract: 本发明提供的是一种表达传染性胰腺坏死病毒(Infectious pancreas necrosis virus，IPNV)VP2蛋白的重组干酪乳杆菌及制法。根据传染性胰腺坏死病毒VP2蛋白的全基因序列及表达载体质粒的基因融合特点，设计一对引物，进行PCR，获得含有IPNV VP2基因主要抗原位点的1095bp目的片段，将扩增得到的IPNV VP2基因与表面表达的载体质粒pPG1进行连接，通过电转化进入宿主菌干酪乳杆菌Lactobacillus casei 393细胞内，含阳性重组质粒pPG1－IPNV VP2的干酪乳杆菌命名为pPG1－IPNV VP2/L.casei 393。将重组pPG1－IPNV VP2/L.casei 393在乳糖的诱导下进行表达。本发明中构建了传染性胰腺坏死病毒VP2蛋白干酪乳杆菌表达载体系统，表达了含有IPNV VP2蛋白主要抗原位点的约40KDa的目的蛋白，免疫印迹实验和间接免疫荧光试验均表明，所表达的外源蛋白能够与IPNV免疫血清发生反应，表明重组VP2蛋白与IPNV天然抗原一样具有相同的抗原性。

公开(公告)号：CN101050450A

公开(公告)日：2007-10-10

申请号：CN200710071893.9

申请日：2007-03-16

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 李一经 ,  唐丽杰 ,  葛俊伟 ,  任晓峰 ,  夏春丽

IPC: C12N1/21 ,  C12N9/24

Abstract: 本发明提供的是一种β－葡萄糖苷酸酶在干酪乳杆菌表达系统中的诱导表达方法。以干酪乳杆菌Lactobacillus casei 393为宿主菌，通过细胞表面表达载体pPG611.1以及细胞外分泌表达载体pPG612.1表达β－葡萄糖苷酸酶。本发明确定目的蛋白均在细胞内产生，细胞表面表达的目的蛋白结合在细胞壁上，而分泌表达的目的蛋白并未在上清中出现，实际上仍然结合在菌体上。本发明使用D－木糖作为诱导物诱导目的蛋白的表达；同时根据干酪乳杆菌的生长特性，从多方面探索了gusA的最佳诱导表达条件，该系统的高效表达为抗原传递奠定了基础。

公开(公告)号：CN1300583C

公开(公告)日：2007-02-14

申请号：CN200510009701.2

申请日：2005-02-02

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 李一经 ,  唐丽杰 ,  马广鹏 ,  田志军

IPC: G01N33/531 ,  G01N33/569 ,  G01N1/28

Abstract: 本发明提供的是取发病猪的粪便与裂解液以1∶8-12的比例进行混合，室温静置10分钟，2000g离心2分钟后，上清液即为含有高滴度病毒的抗原试剂，其中所用的裂解液是含有500mmol/L Tris-HCl，pH8.3，20%PVP-40，1%PEG 6000，140mmol/L NaCl和0.05%Tween 20的溶液。本发明的方法对猪传染性胃肠炎发病猪粪便使用特异的裂解液进行裂解，使病毒从细胞中释放出来从而为诊断本病提供了一种特异性强的诊断抗原，大大缩短了疾病诊断的时间，为猪传染性胃肠炎的及早发现及预防争得了宝贵的时间和经济效益。

公开(公告)号：CN118853524B

公开(公告)日：2025-02-11

申请号：CN202411328287.0

申请日：2024-09-24

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 王晓娜 ,  赵海渊 ,  单智夫 ,  刘芯孜 ,  张海琳 ,  王丽 ,  乔薪瑗 ,  唐丽杰 ,  李一经

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/12 ,  C12N15/50 ,  C12N15/74 ,  A61K39/385 ,  A61K39/215 ,  A61K38/17 ,  A61P31/14 ,  C12R1/225

Abstract: 本发明公开了一种共表达猪β‑防御素2与PEDV S1蛋白的重组猪源干酪乳杆菌及其构建方法和应用，属于生物技术领域。本发明以前期构建的表达PEDV S1基因的猪源营养缺陷型副干酪乳杆菌作为口服黏膜传递载体，并通过串联提高pBD2蛋白的外源表达量，构建重组乳杆菌n×pBD2/S1‑ΔHLJ‑27。针对PEDV的肠道黏膜感染，通过该重组乳杆菌对S1蛋白的组成型表达，刺激黏膜特异性免疫应答，从而建立阻断PEDV感染的第一道防线；与此同时，为了增强口服疫苗诱导的黏膜免疫效果，利用该重组乳杆菌进行分泌表达串联的pBD2蛋白，通过外源增加pBD2表达量来增强肠道免疫应答，提高机体获得性免疫水平，进而将口服黏膜疫苗的优势发挥更佳。

公开(公告)号：CN118852420A

公开(公告)日：2024-10-29

申请号：CN202411132881.2

申请日：2024-08-16

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 王丽 ,  乔薪瑗 ,  姜艳平 ,  李佳璇 ,  王亚楠 ,  李一经

IPC: C07K16/10 ,  C12N15/13 ,  A61K39/42 ,  A61P31/14 ,  G01N33/569 ,  G01N33/577

Abstract: 本发明公开了一种猪δ冠状病毒(Porcine deltacoronavirus，PDCoV)中和性单克隆抗体及其应用，涉及生物技术领域。本发明利用纯化的PDCoV免疫BALB/c小鼠，筛选得到一株猪δ冠状病毒单克隆抗体，经过体外中和试验证明，所述的单克隆抗体对猪δ冠状病毒具有中和活性，能够阻断猪δ冠状病毒感染。利用RT‑PCR的方法获得了该中和抗体的基因序列，经测序获得了其编码的氨基酸序列，所述的猪δ冠状病毒中和性单克隆抗体的重链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，轻链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明的提出为预防和治疗PDCoV感染提供了一种有效的新途径。

公开(公告)号：CN117088943A

公开(公告)日：2023-11-21

申请号：CN202310815193.5

申请日：2023-07-04

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 王丽 ,  单智夫 ,  李佳璇 ,  李一经 ,  夏天

IPC: C07K7/06 ,  C12N15/11 ,  A61K39/385 ,  A61K47/64

Abstract: 本发明公开了一种猪源树突状细胞靶向肽KC1及其应用。所述的猪源树突状细胞靶向肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明利用噬菌体随机肽库和全细胞差异筛选技术筛选猪单核源DCs优势结合多肽，得到了猪源DCs靶向肽KC1(KCCYPN)，实验证明该靶向肽能较强地结合于猪源DCs，显示了良好的特异性。该靶向肽可作为基因导向载体等药物先导分子，为细胞特异性小分子治疗奠定基础，或与疫苗联合使用，提高猪病疫苗免疫效率，促进机体提早产生免疫力。本发明的提出为研发猪源DCs靶向疫苗提供了物质基础。