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公开(公告)号：CN118994310B
公开(公告)日：2025-05-09
申请号：CN202411338223.9
申请日：2024-09-25
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明公开一种具有高蛋白酶稳定性的抗菌短肽及其制备方法和应用，属于生物工程技术领域。抗菌短肽DabDab的氨基酸序列：LWDabLDabWDab‑NH2，其C端采用‑NH2酰胺化，所述的Dab为2,4‑二氨基丁酸。对本发明的抗菌短肽DabDab进行抗菌活性、溶血活性、细胞毒性以及蛋白酶稳定性检测，发现对几种测定的革兰氏阴性菌具有较高抗菌活性，对几种测定的革兰氏阳性菌具有一定的抗菌活性。抗菌短肽DabDab的细胞选择性较高TI＝16.00，且在128μg/mL下并未表现出明显细胞毒性。抗菌短肽DabDab在与胃蛋白酶或胰蛋白酶孵育8h中仍维持原有MIC或MIC仅提高2倍，具有高蛋白酶稳定性。
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公开(公告)号：CN118955633A
公开(公告)日：2024-11-15
申请号：CN202410971350.6
申请日：2024-07-19
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明公开一种富含D‑Arg的抗酶解十四肽2rrr及其制备方法和应用，属于生物工程技术领域。其氨基酸序列如SEQ ID No.1所示，其C端采用‑NH2酰胺化，序列的第3、5、7位置为D型精氨酸。并且公开了本发明的富含D‑Arg的抗酶解十四肽2rrr在制备治疗由革兰氏阳性菌或/和革兰氏阴性菌感染性疾病的药物中的应用。本发明的富含D‑Arg的抗酶解十四肽2rr具较高细胞选择性，并且能够在不同生理浓度的盐离子和高浓度胃蛋白酶、胰蛋白酶中保持较高稳定性。综上，富含D‑Arg的抗酶解十四肽2rrr有潜力成为治疗革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌感染的广谱抗菌药物，并在消化道中维持较高抗菌活性。
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公开(公告)号：CN111960252B
公开(公告)日：2022-08-30
申请号：CN202010823090.X
申请日：2020-08-17
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 成猪快速转移装车用无损绑定装置，属于动物科学技术领域，由背衣(1)、钩环(2)、蒙眼(3)、兜带(4)、沉坠(5)、电击条(6)、环钩(17)组成，其特征在于：所述的背衣(1)是覆盖在成猪背部的兜布，前方连接有蒙眼(3)，背衣(1)两侧连接有3个兜带(4)；3个兜带交替分布，在蒙眼(3)两底角处的圆润边缘各设置1个沉坠(5)，在顶角与底边垂直线下端设置1个电击条(6)，兜带(4)基部相互阻隔，与背衣(1)一起在成猪身体四周形成一个相对宽松的盛猪空间，不至于将成猪勒紧，从而达到可快速随意无损移动成猪到指定位置的目的。本发明结构简单，成本低廉，使用方便，能够大大节省养殖运输成本。
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公开(公告)号：CN110283252A
公开(公告)日：2019-09-27
申请号：CN201910629105.6
申请日：2019-07-12
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明提供一种猪源杂合抗菌肽PP-1及其制备方法和应用，抗菌肽的序列如序列表SEQ ID No.1所示。本发明以PR-39为目标，截取其片段与猪源骨髓抗菌肽PMAP-23或PMAP-36的片段杂合而获得氨基酸长度19至22的3条抗菌肽序列；然后使用多肽合成仪，进行固相合成法合成多肽；进行纯化，并利用电喷雾质谱法进行鉴定；最后，通过最小抑菌浓度和溶血试验测定衍生抗菌肽的抑菌活性和细胞毒性，筛选具有较理想活性的多肽。本发明的抗菌肽PP-1安全性较好，具有广谱抗菌活性、低毒性和低溶血性；该的抗菌肽由19个氨基酸组成，肽链较短，制备方法简单且技术成熟，合成成本低，适合应用于生产。
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公开(公告)号：CN116813712B
公开(公告)日：2024-03-29
申请号：CN202310714576.3
申请日：2023-06-16
Applicant: 东北农业大学
IPC: C07K7/08 , A61K38/10 , A61P31/04 , A23K20/147
Abstract: 本发明提供一种富含Trp的α‑螺旋结构抗菌肽W33及其制备方法和应用。抗菌肽W33，如SEQ ID No.1所示，制备方法是：利用标准α螺旋七肽重复序列“abcdefg”为基础，选择Leu放置在a、d位置上形成Leu拉链结构，在c和f位置添加Trp，其余位置添加Arg，将七肽序列重复2次达到足够的正电荷数，得出抗菌肽W33。该抗菌肽在治疗革兰氏阴性菌和/或革兰氏阳性菌感染性疾病的药物中的应用。抗菌肽W 33治疗指数为98.84，具有良好的细胞选择性，有潜力成为治疗革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌感染的广谱抗菌药物，并有很高的应用价值。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN110283252B
公开(公告)日：2020-04-10
申请号：CN201910629105.6
申请日：2019-07-12
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明提供一种猪源杂合抗菌肽PP‑1及其制备方法和应用，抗菌肽的序列如序列表SEQ ID No.1所示。本发明以PR‑39为目标，截取其片段与猪源骨髓抗菌肽PMAP‑23或PMAP‑36的片段杂合而获得氨基酸长度19至22的3条抗菌肽序列；然后使用多肽合成仪，进行固相合成法合成多肽；进行纯化，并利用电喷雾质谱法进行鉴定；最后，通过最小抑菌浓度和溶血试验测定衍生抗菌肽的抑菌活性和细胞毒性，筛选具有较理想活性的多肽。本发明的抗菌肽PP‑1安全性较好，具有广谱抗菌活性、低毒性和低溶血性；该的抗菌肽由19个氨基酸组成，肽链较短，制备方法简单且技术成熟，合成成本低，适合应用于生产。
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公开(公告)号：CN108503702A
公开(公告)日：2018-09-07
申请号：CN201810378808.1
申请日：2018-04-25
Applicant: 东北农业大学
IPC: C07K14/435 , A23K20/147 , A23K50/75
CPC classification number: C07K14/43563 , A23K20/147 , A23K50/75
Abstract: 日本蠼螋抗菌肽DEI及其在鸭饲料中的应用，属于生物工程技术领域，其特征在于：获取日本蠼螋的抗菌肽DEI，采用蛋白自动测序仪测定其氨基酸序列，再采用基因工程的手段，设计其cDNA片段，构建克隆质粒pUC57-TM，转化大肠杆菌DH 5α，PCR和测序进一步鉴定，构建重组表达载体pPICZαC-TM，将重组表达载体线性化后，电转入毕赤酵母SMD1168中，筛选获得高拷贝的重组酵母转化子，将重组酵母转化子的单菌落培养，获得日本蠼螋抗菌肽DEI，并将日本蠼螋抗菌肽DEI应用到鸭饲料中，能增加鸭的抵抗力，大大降低了鸭的发病率，提高了其成活率，从而降低了饲养户的饲养成本。
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公开(公告)号：CN102863539B
公开(公告)日：2014-12-17
申请号：CN201210382354.8
申请日：2012-10-11
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 融合串联抗菌肽及其制备方法，它涉及抗菌肽及其制备方法。本发明解决了现有抗菌肽合成方法中产量低，生产成本高；特别是采用基因工程重组表达抗菌肽过程中抗菌肽分子容易被酶解，导致表达量低或者很难表达的问题。融合串联抗菌肽由Fowlicidin-2、天蚕素B、Cecropin A(1-8)-Melittin(1-18)和死亡素四种抗菌肽串联而成。制备方法：一、设计cDNA片段；二、构建重组表达载体；三、获得转化子；四、诱导，收集上清液，蛋白纯化。本发明用于抗菌肽制备领域。
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公开(公告)号：CN102816788A
公开(公告)日：2012-12-12
申请号：CN201210302585.3
申请日：2012-08-23
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 一种在乳酸乳球菌中表达鸡堆型艾美耳球虫3-1E蛋白的方法，涉及一种表达鸡堆型艾美耳球虫3-1E蛋白的方法。本发明是要解决目前乳酸乳球菌中无法表达鸡艾美耳球虫子孢子/裂殖子阶段表面抗原3-1E的问题。方法：将鸡堆型艾美耳球虫3-1E基因序列依照乳酸乳球菌的密码子偏好性进行优化，插入克隆载体并转化大肠杆菌感受态细胞，得阳性转化子；将阳性转化子和乳酸菌表达载体酶切后连接，构建重组表达载体；转化乳酸菌感受态细胞，鉴定；进行重组菌培养及诱导，即完成在乳酸乳球菌NZ9000中表达3-1E蛋白。本发明将密码子优化后的经人工合成的3-1E蛋白成功的在乳酸乳球菌中进行了表达。本发明方法用于球虫病的预防领域。
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公开(公告)号：CN101717450A
公开(公告)日：2010-06-02
申请号：CN200910073255.X
申请日：2009-11-24
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 抗菌肽LFB-ME及其制备方法，它涉及一种抗菌肽及其制备方法。它解决了现有抗菌肽的抗菌活性不高的问题。抗菌肽LFB-ME的氨基酸序列为：PheLysCysArgArgTrpGlnTrpArgTrpLysLysLeuGlyAlaLysTrpLysLeuPheLysLysIle。方法：一、将牛乳铁蛋白素的活性中心氨基酸序列中第10位氨基酸Met替换为Trp，然后与天蚕素A的活性中心氨基酸序列进行杂合，用多肽合成仪进行固相化学法合成得肽树脂；二、经TFA切割后得多肽，反相高效液相色谱进行纯化。本发明所得抗菌肽LFB-ME的抗菌活性有明显提高，且无溶血毒性和动物毒性。
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