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公开(公告)号：CN103784969A
公开(公告)日：2014-05-14
申请号：CN201310505297.2
申请日：2013-10-18
Applicant: 东北农业大学
IPC: A61K48/00 , A61K39/225 , A61K39/39 , A61P1/00 , A61P31/14
Abstract: 本发明涉及一种猪传染性胃肠炎核酸疫苗及其免疫增强剂和制备方法，猪传染性胃肠炎核酸疫苗，如序列表SEQ？ID？No.1所示。对猪传染性胃肠炎核酸疫苗的免疫增强剂，序列如序列表SEQ？ID？No.2所示。本发明采用核酸疫苗的方式进行免疫，制备简单，易于保存以及运输，成本低廉适于规模化生产，保证的疫苗的安全性，稳定性。免疫原为主要的抗原位点TGEV-S1，使得此核酸疫苗更加特异。并且应用pIL12作为免疫增强剂，其提高了此核酸疫苗的CD4，CD8的免疫水平，提高了抗体的效价同时也延长了抗体持续的时间，在各方面都提高TGEV-S1核酸疫苗的免疫效果。
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公开(公告)号：CN103301476A
公开(公告)日：2013-09-18
申请号：CN201310145903.4
申请日：2013-04-25
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明涉及一种猪流行性腹泻病基因重组疫苗及其构建引物和方法，猪流行性腹泻病基因重组疫苗，其序列如序列表Seq No.1所示。用于构建猪流行性腹泻病基因重组疫苗的引物对，上引物P1：如序列表Seq No.2所示；下引物P2：如序列表Seq No.3所示。构建方法，包括如下步骤：根据现有质粒EasyT-S的核苷酸序列设计引物对；进行常规链式聚合酶反应扩增PEDV S基因；构建重组质粒pVAX1-PEDV S。本试验首次将PEDV S基因插入真核载体中构建质粒并将其作为预防猪流行性腹泻病的核酸疫苗。本发明具有制备简单，省时省力，成本低，稳定性好的优点。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102021249A
公开(公告)日：2011-04-20
申请号：CN201010553870.3
申请日：2010-11-22
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明提供一种反转录-环介导等温扩增检测猪流行性腹泻的方法。根据PEDV N蛋白保守区域基因，设计针对靶基因上6个区域的3对引物，合成两条RT-PCR引物，使用RT-LAMP技术鉴定PED病毒；RT-PCR反应；获得的RNA进行反转录；获得的cDNA用于PCR反应；确保了扩增的特异性，扩增速度快，可在30～60min内获得结果，无需电泳实现肉眼观察扩增效果。使用酶混合物，可在恒温65℃情况下，1h内实现反转录和核酸扩增，RT-LAMP的检测是在LAMP扩增DNA的基础上，加入了反转录酶而实现扩增检测RNA，反转录和扩增一步完成，省去了传统RT-PCR要先进行的反转录步骤。
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公开(公告)号：CN101050450A
公开(公告)日：2007-10-10
申请号：CN200710071893.9
申请日：2007-03-16
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明提供的是一种β－葡萄糖苷酸酶在干酪乳杆菌表达系统中的诱导表达方法。以干酪乳杆菌Lactobacillus casei 393为宿主菌，通过细胞表面表达载体pPG611.1以及细胞外分泌表达载体pPG612.1表达β－葡萄糖苷酸酶。本发明确定目的蛋白均在细胞内产生，细胞表面表达的目的蛋白结合在细胞壁上，而分泌表达的目的蛋白并未在上清中出现，实际上仍然结合在菌体上。本发明使用D－木糖作为诱导物诱导目的蛋白的表达；同时根据干酪乳杆菌的生长特性，从多方面探索了gusA的最佳诱导表达条件，该系统的高效表达为抗原传递奠定了基础。
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公开(公告)号：CN103394097A
公开(公告)日：2013-11-20
申请号：CN201310242648.5
申请日：2013-06-09
Applicant: 东北农业大学
IPC: A61K48/00 , A61K39/225 , A61K39/215 , A61P31/14 , C12N15/50
Abstract: 本发明涉及一种猪传染性胃肠炎和流行性腹泻两联疫苗的引物及制备方法，猪传染性胃肠炎和流行性腹泻两联疫苗，其序列如序列表Seq No.1所示。其中，用于扩增猪传染性胃肠炎病毒TGEV S2106的引物对，上引物P1：如序列表SeqNo.2所示，下引物P2：如序列表Seq No.3所示；用于扩增猪流行性腹泻病毒的S基因PEDV S4155的引物对，上引物P3：如序列表SeqNo.4所示，下引物P4：如序列表Seq No.5所示。该核酸疫苗制备方法简单，省时省力，成本低，稳定性好，储存和运输方便，而且没有毒力丢失和毒力返祖的现象。
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公开(公告)号：CN103145804A
公开(公告)日：2013-06-12
申请号：CN201310028148.1
申请日：2013-01-25
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明涉及一种猪细小病毒VP2亲和肽A和B及其编码核苷酸，猪细小病毒VP2亲和肽A，氨基酸序列如序列表SEQ ID No.1所示，其核苷酸序列如序列表SEQ ID No.2所示。猪细小病毒VP2亲和肽B，氨基酸序列如序列表SEQ ID No.3所示，其核苷酸序列如序列表SEQ ID No.4所示。还涉及到一对引物VP2-3和VP2-4的核苷酸序列。本发明的多肽由于分子量较小，易穿透进入组织，比大蛋白渗透能力更强；半衰期短，在组织中蓄积很少；结构稳定且生产成本较低。
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公开(公告)号：CN102021249B
公开(公告)日：2013-01-23
申请号：CN201010553870.3
申请日：2010-11-22
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明提供一种反转录-环介导等温扩增检测猪流行性腹泻的方法。根据PEDV N蛋白保守区域基因，设计针对靶基因上6个区域的3对引物，合成两条RT-PCR引物，使用RT-LAMP技术鉴定PED病毒；RT-PCR反应；获得的RNA进行反转录；获得的cDNA用于PCR反应；确保了扩增的特异性，扩增速度快，可在30～60min内获得结果，无需电泳实现肉眼观察扩增效果。使用酶混合物，可在恒温65℃情况下，1h内实现反转录和核酸扩增，RT-LAMP的检测是在LAMP扩增DNA的基础上，加入了反转录酶而实现扩增检测RNA，反转录和扩增一步完成，省去了传统RT-PCR要先进行的反转录步骤。
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