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公开(公告)号:CN110423845B
公开(公告)日:2023-05-23
申请号:CN201910537825.X
申请日:2019-06-20
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明公开了一种用于检测牛轮状病毒(BRV)、牛细小病毒(BPV)和牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的多重纳米PCR引物组及其应用。所述的引物组中含有分别用于检测牛轮状病毒、牛细小病毒和牛病毒性腹泻病毒的DPO引物对。本发明将DPO引物结合纳米PCR技术建立了一种能够同时检测BRV、BPV和BVDV的多重DPO‑nanoPCR检测方法。与常规PCR方法比较,该方法省时省力,能够迅速、准确、特异地检测出病原,在保证特异的基础上,又具有高度的灵敏性。本发明的提出为BRV、BPV和BVDV早期感染和隐性感染的诊断提供了一种新方法,为BRV、BPV和BVDV临床混合感染的检测提供给了一种可靠的技术手段,为疫病排查、筛查净化及综合防制提供了技术支持。
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公开(公告)号:CN109206502B
公开(公告)日:2022-03-04
申请号:CN201811126498.0
申请日:2018-09-26
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明公开了一种猫干扰素ω及其制备方法和在抗病毒中的应用。所述的猫干扰素ω的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。优选的,编码所述的猫干扰素ω的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。此外,本发明还公开了一种制备所述的猫干扰素ω的方法及其在制备抗病毒药物中的应用。本发明采用病毒刺激(猫肠道冠状病毒)结合干扰素诱生剂刺激(聚肌胞poly I:C)方法对宠物猫体进行刺激,进而诱导猫干扰素基因表达。然后通过PCR扩增得到了一条猫干扰素ω基因,细胞试验显示本发明获得的一种猫干扰素ω具有明显的抗病毒活性,并优于现有已知猫干扰素。本发明的提出为猫干扰素制品的进一步研发和应用奠定了基础。
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公开(公告)号:CN109206501B
公开(公告)日:2022-03-04
申请号:CN201811125211.2
申请日:2018-09-26
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明公开了一种猫干扰素ω、其编码基因及其在抗病毒方面的应用。所述的猫干扰素ω的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。优选的编码所述的猫干扰素ω的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。此外,本发明还公开了一种制备所述的猫干扰素ω的方法及其在制备抗病毒药物中的应用。本发明采用病毒刺激(猫肠道冠状病毒)结合干扰素诱生剂刺激(聚肌胞poly I:C)方法对宠物猫体进行刺激,进而诱导猫干扰素基因表达。然后通过PCR扩增得到了一条猫干扰素ω基因,细胞试验显示本发明获得的一种猫干扰素ω具有明显的抗病毒活性,并优于现有已知猫干扰素。本发明的提出为猫干扰素制品的进一步研发和应用奠定了基础。
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公开(公告)号:CN108148814B
公开(公告)日:2021-01-15
申请号:CN201711353547.X
申请日:2017-12-15
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , G01N33/569 , G01N33/543 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一种用于检测牛轮状病毒的双抗体夹心ELISA诊断试剂盒及其应用。所述的试剂盒中含有由菌种保藏编号为CGMCC NO.14726的杂交瘤细胞株分泌产生的单克隆抗体4D10。此外,本发明以纯化的兔抗BRV多抗为捕获抗体,以4D10单抗为检测抗体,建立了BRV双抗体夹心ELISA方法。敏感性实验表明,该方法对BRV的最低检出量为9.884×104TCID50/mL;特异性实验结果表明,该方法具有良好的特异性,与PoRV、PEDV、BPV及TGEV均无交叉反应;批间和批内重复性实验结果显示,该方法具有良好的重复性。使用建立的双抗体夹心ELISA方法对95份临床样品进行检测,与RT‑PCR方法相比,符合率为100%。可见本发明建立的双抗体夹心ELISA方法具有良好的特异性、敏感性和重复性,可用于BRV的快速检测。
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公开(公告)号:CN107271667B
公开(公告)日:2019-01-22
申请号:CN201710415171.4
申请日:2017-06-05
Applicant: 东北农业大学
IPC: G01N33/569 , G01N33/558 , G01N33/577
Abstract: 本发明公开了一种蓝舌病病毒型特异性竞争ELISA检测试剂盒及其应用。所述试剂盒包括以下两组组分:组分I中包括包被蓝舌病病毒抗原I的酶标板和用于蓝舌病病毒型特异性检测的单克隆抗体I,所述的单克隆抗体I由杂交瘤细胞株8B3G11分泌产生;组分II中包括包被蓝舌病病毒抗原II的酶标板和用于蓝舌病病毒型特异性检测的单克隆抗体II,所述的单克隆抗体II由杂交瘤细胞株8B5D4分泌产生。本发明利用制备的两株8型BTV VP2单克隆抗体8B5D4以及8B3G11建立了蓝舌病病毒型特异性检测的联合竞争ELISA检测方法,该检测方法短时间内可以用于初步区分不同型蓝舌病感染的动物血清,实验条件要求低,适合于大规模的BTV血清抗体检查。
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公开(公告)号:CN108276476A
公开(公告)日:2018-07-13
申请号:CN201711448093.4
申请日:2017-12-27
Applicant: 东北农业大学
IPC: C07K7/08 , C12N15/12 , A61K39/385 , A61K47/42
Abstract: 本发明公开了一种鸡骨髓源树突状细胞靶向肽SP及其用途。所述的鸡骨髓源树突状细胞靶向肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明利用噬菌体随机肽库和全细胞差异筛选技术筛选出鸡骨髓源DC优势结合多肽SP,与已发表的人源DC靶向肽相比,能较强地结合于鸡源DC,显示了良好的靶向性和特异性,因此该靶向肽SP可作为基因导向载体等药物的先导分子,为细胞特异性小分子治疗奠定基础,或与疫苗联合使用,提高禽类疫苗免疫效率,促进机体提早产生免疫力。
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公开(公告)号:CN107937607A
公开(公告)日:2018-04-20
申请号:CN201711241581.8
申请日:2017-11-30
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种用于猪传染性胃肠炎病毒检测的DPO引物组、含有该引物组的试剂盒及其应用。所述的用于猪传染性胃肠炎病毒检测的DPO引物组由上游引物和下游引物组成。此外,本发明采用该DPO引物组结合实时荧光定量PCR方法,建立了一种特异、快速检测猪传染性胃肠炎病毒的DPO-real time RT-PCR检测方法,该方法简单、特异性强、灵敏度高,能够实现现有检测技术所无法完成的定量、快速、特异、敏感的结果判定。因此,本发明的提出为猪传染性胃肠炎病毒的快速准确检测提供了新的技术手段。
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公开(公告)号:CN107619816A
公开(公告)日:2018-01-23
申请号:CN201710762830.1
申请日:2017-08-30
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明公开了一种靶向传递疫苗抗原的基因工程乳酸菌口服疫苗株及其在防治鸡大肠杆菌病中的用途。所述的疫苗株是通过将表达鸡致病性大肠杆菌ompC蛋白和fimA蛋白以及靶向M细胞和DC细胞的靶向肽的融合蛋白的表达载体转入乳酸菌中得到的,其中ompC蛋白和fimA蛋白之间通过柔性序列连接,所述的融合蛋白的连接顺序为ompC-fimA-M细胞靶向肽-DC细胞靶向肽。本发明以鸡致病性大肠杆菌fimA和ompC蛋白为免疫原并融合能够靶向M细胞和DC细胞的靶向肽,利用乳酸菌为抗原传递载体,构建了预防鸡大肠杆菌病的靶向传递疫苗抗原的基因工程乳酸菌亚单位口服疫苗,可有效地抑制鸡致病性大肠杆菌的感染,并且使用方便、安全,对环境友好。
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公开(公告)号:CN107586884A
公开(公告)日:2018-01-16
申请号:CN201711008696.2
申请日:2017-10-25
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种用于猫传染性腹膜炎病毒检测的RT-PCR引物组,含有该引物组的试剂盒及其应用。所述的引物组由上游引物和下游引物组成,所述的上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示,所述的下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。本发明还提出了一种用于猫传染性腹膜炎病毒检测的荧光定量RT-PCR试剂盒,含有所述的引物组以及Eva Green荧光染料反应液。本发明与现有技术相比,最大的优势在于能够区分猫传染性腹膜炎病毒感染以及猫冠状病毒感染,且检测灵敏度高,特异性好,能够实现现有检测技术所无法完成的定量、快速、特异、敏感的结果判定,具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN107475445A
公开(公告)日:2017-12-15
申请号:CN201710703618.8
申请日:2017-08-16
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明公开了一种基于RT-PCR和RFLP技术鉴别鸡传染性法氏囊病病毒强弱毒株的试剂盒及其应用。所述的试剂盒含有用于扩增鸡传染性法氏囊病病毒VP2基因的引物对以及SpeI、SacI和StuI限制性内切酶。本发明所建立的基于RT-PCR和RFLP技术的鉴别诊断方法能够区分IBDV的超强毒株和弱毒株,且步骤简单便于操作,本发明的提出为IBDV强弱毒株的快速鉴别诊断提供了一种新的有效技术手段。
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