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公开(公告)号：CN110408676A
公开(公告)日：2019-11-05
申请号：CN201910656506.0
申请日：2019-07-19
Applicant: 海南大学
Abstract: 目前，纳米孔技术已经成为核酸测序和分析的热点方法。然而，以高灵敏度和特异性在宽浓度范围内检测并量化超低水平核酸仍然是一个挑战。本工作拟研发了一种超灵敏的基于胰蛋白酶激活气溶素原成孔的纳米孔策略（tNASA——trypsin-activated nanopore amplified sandwich assay），通过胰蛋白酶激活气溶素原和使用微型电流放大器eONEHS的信号检测来进行待测样品的信号放大。本工作创新性体现在：利用胰蛋白酶激活气溶素原组装纳米孔作为信号发生器做到了对信号的二次放大，能够进行aM核酸和单细胞水平上的检测，不仅能够满足微生物检测领域中高选择性、高灵敏度和低成本的要求，同时也为病毒的诊断提供了新的见解。
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公开(公告)号：CN107586825A
公开(公告)日：2018-01-16
申请号：CN201710843414.4
申请日：2017-09-18
Applicant: 海南大学
Abstract: 海洋病害微生物是影响国民经济建设的重要因素之一，开展病害微生物检测和控制研究对国民经济建设有重大意义。本工作拟研发了一种基于季铵盐化磁性纳米材料与脲酶复合传感器平台快速直接分析环境生物样品中微生物。项目主要内容为：重点设计季铵盐化磁性纳米材料-脲酶复合传感器与微生物响应材料识别机制和反应动力学，考察这些识别响应的功能模块在微生物快速检测和微生物即时表达分析中作用规律。本工作创新性体现在：基础研究水平上揭示铵盐化磁性纳米材料-脲酶复合传感器与微生物作用关系，总结一站式微生物分析仪与不同微生物作用的规律，特别为解决涉及微生物检测方法中“便携式”和“全自动”问题提供参考和借鉴。
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公开(公告)号：CN106872341A
公开(公告)日：2017-06-20
申请号：CN201710196158.4
申请日：2017-03-29
Applicant: 海南大学
CPC classification number: G01N15/1431 , H04M1/21
Abstract: 本工作是一种基于智能手机的微生物诊断仪的发明，拟以微生物代谢产物作为功能单元，在微生物选择性培养基孕育基础之上，结合智能手机平台，实现病害微生物的即时检测（Mobile‑based Point‑of‑Care Testing，mPOCT）。项目主要内容为：重点设计功能化的微生物代谢产物与传感器响应材料识别机制和反应动力学，考察这些识别响应的功能模块在微生物快速检测和微生物即时表达分析中作用规律，设计研发基于云服务的智能手机数据采集和分析软件。本工作创新性体现在：基础研究水平上揭示活性小分子识别响应与微生物作用关系，特别为解决涉及微生物检测方法中“在线”、“便携式”和“全自动”的机电工程与生物学复合问题提供参考和借鉴。
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公开(公告)号：CN119662791A
公开(公告)日：2025-03-21
申请号：CN202510012940.0
申请日：2025-01-06
Applicant: 海南大学
Abstract: 本发明公开了一种基于aPCR‑Cas12快速鉴别金黄色葡萄球菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的方法，属于基因检测技术领域。本发明以nuc为目标基因，利用aPCR扩增出单链ssDNA，根据序列合成互补链PC‑ssDNA，并修饰PClinker基团。二者杂交后紫外处理，切断修饰位点形成立足点双链，联合CRISPR‑Cas12系统提高SNP检测能力，通过读取荧光信号，显著性分析P值实现金黄色葡萄球菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的区分检测。该体系无需PAM位点，能够检测到低至9CUF/mL的目标基因，对混合基因中SNP突变率检测的灵敏度达到0.01％。本发明提供的方法对病原菌监控与防治方面都有重要意义。
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公开(公告)号：CN118421765A
公开(公告)日：2024-08-02
申请号：CN202410632776.9
申请日：2024-05-21
Applicant: 海南大学
IPC: C12Q1/6858
Abstract: 本发明公开了一种基于CRISPR‑Cas12系统光激活检测SNP的方法。该方法中，根据待检测(miRNA作为RNA)靶核酸单链信息，设计、合成其PClinker基团修饰的互补ssDNA链，二者杂交后紫外光照射形成立足点，联合CRISPR‑Cas12系统将检测信号转变成荧光信号来实现核酸检测，并且区分单碱基突变。本发明所述方法材料设计简单、成本低、操作方便，并且可以在40min内直接通过荧光信号检测SNP，区分野生型与突变型，对于癌症的个性化生物标记物诊断和基因治疗方面都有重要意义。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN118389649A
公开(公告)日：2024-07-26
申请号：CN202410575796.7
申请日：2024-05-10
Applicant: 海南大学
IPC: C12Q1/6827
Abstract: 本发明公开了一种通用型‘枷锁’CRISPR/Cas单碱基核酸检测系统并对microRNA进行单碱基检测的方法及应用。该方法针对靶标突变链（与靶标miRNA有1个碱基不同）也能激活Cas13a/crRNA复合体反式剪切活性并造成检测假阳性以及当前单碱基检测方法检测位点局限性的问题，引入肽核酸（PNA），利用PNA与核酸具有较强的亲和力的特性，通过Watson‑Crick碱基互补配对原则，将突变链进行“封闭”，实现只有靶标miRNA才能激活Cas13a/crRNA复合体反式剪切活性，通过剪切带有荧光基团和猝灭剂的RNA链，释放荧光信号，最终实现单碱基检测的特异性需求，达到去除或者降低非特异性信号（假阳性）的目的；同时，并实现在miRNA序列上几乎所有单碱基检测位点都可检测区分。
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公开(公告)号：CN116987804A
公开(公告)日：2023-11-03
申请号：CN202310976531.3
申请日：2023-08-03
Applicant: 海南大学
Abstract: 本申请涉及生物技术领域，公开了一种海洋致病菌的可视化检测组合物及其应用和检测方法。本申请以副溶血性弧菌核酸适配体为识别分子，与HCR反应引发链I链杂交，构建核酸适配体探针。当副溶血弧菌存在时，其将与核酸适配体探针特异性结合，HCR反应引发链I链得以脱离并诱导H1和H2探针交替打开形成一条长双链共聚物，同时形成大量G‑四链体结构，实现信号放大，加入显色体系后进行可视化检测。本申请基于检测组合物的检测方法简便易行，具有高稳定性、高灵敏度和特异性，可实现对副溶血性弧菌的定性定量可视化检测，对海水养殖动物病原微生物感染性疾病早期预警防控具有重要的现实指导意义。
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公开(公告)号：CN111063391B
公开(公告)日：2023-04-25
申请号：CN201911328120.3
申请日：2019-12-20
Applicant: 海南大学
IPC: G16B20/00
Abstract: 本发明公开了一种基于生成式对抗网络原理的不可培养微生物筛选系统，该系统将不可培养微生物进行数据处理得到代谢网络和基因组数据，输入如图一所示模型，得到一系列培养基成分，系统自动取样、封板、培养、检测，得出培养结果。将这些结果输入训练网络改进参数优化模型，由于不可培养微生物和可培养微生物之间存在数据分布上的差异，利用迁移学习，基于生成式对抗网络的原理，将不可培养微生物作为目标域数据集，可培养微生物数据集作为源域数据集，通过生成式对抗网络的判别器原理，缩小源域与目标域之间的特征空间分布差异，完成可培养微生物到不可培养微生物的知识迁移，使我们的自动化系统更加完善，达到提高预测培养基配方准确率的目的。
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公开(公告)号：CN110408676B
公开(公告)日：2023-04-25
申请号：CN201910656506.0
申请日：2019-07-19
Applicant: 海南大学
Abstract: 目前，纳米孔技术已经成为核酸测序和分析的热点方法。然而，以高灵敏度和特异性在宽浓度范围内检测并量化超低水平核酸仍然是一个挑战。本工作拟研发了一种超灵敏的基于胰蛋白酶激活气溶素原成孔的纳米孔策略（tNASA——trypsin‑activated nanopore amplified sandwich assay），通过胰蛋白酶激活气溶素原和使用微型电流放大器eONEHS的信号检测来进行待测样品的信号放大。本工作创新性体现在：利用胰蛋白酶激活气溶素原组装纳米孔作为信号发生器做到了对信号的二次放大，能够进行aM核酸和单细胞水平上的检测，不仅能够满足微生物检测领域中高选择性、高灵敏度和低成本的要求，同时也为病毒的诊断提供了新的见解。
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