公开(公告)号：CN110408676B

公开(公告)日：2023-04-25

申请号：CN201910656506.0

申请日：2019-07-19

Applicant: 海南大学

Inventor： 万逸 ,  宋凤阁 ,  葛晓林

IPC: C12Q1/37 ,  C12Q1/14 ,  C12Q1/10 ,  C12Q1/04 ,  G01N33/48

Abstract: 目前，纳米孔技术已经成为核酸测序和分析的热点方法。然而，以高灵敏度和特异性在宽浓度范围内检测并量化超低水平核酸仍然是一个挑战。本工作拟研发了一种超灵敏的基于胰蛋白酶激活气溶素原成孔的纳米孔策略（tNASA——trypsin‑activated nanopore amplified sandwich assay），通过胰蛋白酶激活气溶素原和使用微型电流放大器eONEHS的信号检测来进行待测样品的信号放大。本工作创新性体现在：利用胰蛋白酶激活气溶素原组装纳米孔作为信号发生器做到了对信号的二次放大，能够进行aM核酸和单细胞水平上的检测，不仅能够满足微生物检测领域中高选择性、高灵敏度和低成本的要求，同时也为病毒的诊断提供了新的见解。

公开(公告)号：CN110684823A

公开(公告)日：2020-01-14

申请号：CN201911013853.8

申请日：2019-10-23

Applicant: 海南大学

Inventor： 万逸 ,  刘红 ,  葛晓林

IPC: C12Q1/6804 ,  C12Q1/689 ,  C12Q1/14 ,  C12Q1/10 ,  C12Q1/04 ,  C12N15/113

Abstract: 将Cas12a检测系统与胶体金快速诊断试纸条技术结合，首先通过PCR或恒温扩增技术实现目的片段的扩增，然后进行Cas12a检测反应，最后试纸条判读结果。此结合意义在于不需要特异性标记引物，避免扩增产物稀释和探针杂交等流程，试纸条可以实现多种微生物的检测，扩大了试纸条的适用性。将Cas12a检测系统的广泛性、稳定性、特异性、灵敏性与试纸条检测的直观、快速、方便性结合，为现场检测提供最佳检测法，利于及时诊断，在核酸分子诊断领域具有重要的应用潜力。

公开(公告)号：CN110408676A

公开(公告)日：2019-11-05

申请号：CN201910656506.0

申请日：2019-07-19

Applicant: 海南大学

Inventor： 万逸 ,  宋凤阁 ,  葛晓林

IPC: C12Q1/37 ,  C12Q1/14 ,  C12Q1/10 ,  C12Q1/04 ,  G01N33/48

Abstract: 目前，纳米孔技术已经成为核酸测序和分析的热点方法。然而，以高灵敏度和特异性在宽浓度范围内检测并量化超低水平核酸仍然是一个挑战。本工作拟研发了一种超灵敏的基于胰蛋白酶激活气溶素原成孔的纳米孔策略（tNASA——trypsin-activated nanopore amplified sandwich assay），通过胰蛋白酶激活气溶素原和使用微型电流放大器eONEHS的信号检测来进行待测样品的信号放大。本工作创新性体现在：利用胰蛋白酶激活气溶素原组装纳米孔作为信号发生器做到了对信号的二次放大，能够进行aM核酸和单细胞水平上的检测，不仅能够满足微生物检测领域中高选择性、高灵敏度和低成本的要求，同时也为病毒的诊断提供了新的见解。