公开(公告)号：CN118421765A

公开(公告)日：2024-08-02

申请号：CN202410632776.9

申请日：2024-05-21

Applicant: 海南大学

Inventor： 宋凤阁 ,  骆彦池 ,  陈会友 ,  鲁琳 ,  邵宝凯 ,  林志赟 ,  万逸

IPC: C12Q1/6858

Abstract: 本发明公开了一种基于CRISPR‑Cas12系统光激活检测SNP的方法。该方法中，根据待检测(miRNA作为RNA)靶核酸单链信息，设计、合成其PClinker基团修饰的互补ssDNA链，二者杂交后紫外光照射形成立足点，联合CRISPR‑Cas12系统将检测信号转变成荧光信号来实现核酸检测，并且区分单碱基突变。本发明所述方法材料设计简单、成本低、操作方便，并且可以在40min内直接通过荧光信号检测SNP，区分野生型与突变型，对于癌症的个性化生物标记物诊断和基因治疗方面都有重要意义。

公开(公告)号：CN119082370A

公开(公告)日：2024-12-06

申请号：CN202411380517.8

申请日：2024-09-30

Applicant: 海南大学

Inventor： 宋凤阁 ,  阳秀芬 ,  邵宝凯 ,  鲁琳 ,  万逸

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/6844 ,  C12N15/11 ,  C12N15/113 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明提供了一种基于RT‑LAMP‑Cas14a无PAM限制的石斑鱼神经坏死病毒检测方法，所述方法是一种基于一组特异性的神经坏死病毒RNA RT‑LAMP扩增引物，在FIP引物的3’端引入PAM序列，经过60℃恒温扩增后其产物被CRISPR‑Cas14a特异性识别，随后激活Cas14a酶并触发其非特异性反式切割能力的一种方法。具体涉及水产病毒快速诊断领域。由于神经坏死病毒RNA核酸序列不含Cas14a识别的PAM序列，本发明对RT‑LAMP扩增引物进行改造，实现RNA核酸一步法扩增与CRISPR‑Cas14a相结合，使其突破了Cas14a检测技术的限制，为神经坏死病毒提供一种高特异性、高灵敏度的检测技术。