公开(公告)号：CN116987804A

公开(公告)日：2023-11-03

申请号：CN202310976531.3

申请日：2023-08-03

Applicant: 海南大学

Inventor： 曾姝 ,  王佳丽 ,  万逸 ,  韩诗雅

IPC: C12Q1/689 ,  C12Q1/682 ,  C12Q1/30 ,  C12N15/115 ,  C12N15/11 ,  C12R1/63

Abstract: 本申请涉及生物技术领域，公开了一种海洋致病菌的可视化检测组合物及其应用和检测方法。本申请以副溶血性弧菌核酸适配体为识别分子，与HCR反应引发链I链杂交，构建核酸适配体探针。当副溶血弧菌存在时，其将与核酸适配体探针特异性结合，HCR反应引发链I链得以脱离并诱导H1和H2探针交替打开形成一条长双链共聚物，同时形成大量G‑四链体结构，实现信号放大，加入显色体系后进行可视化检测。本申请基于检测组合物的检测方法简便易行，具有高稳定性、高灵敏度和特异性，可实现对副溶血性弧菌的定性定量可视化检测，对海水养殖动物病原微生物感染性疾病早期预警防控具有重要的现实指导意义。

公开(公告)号：CN120060510A

公开(公告)日：2025-05-30

申请号：CN202510120311.X

申请日：2025-01-25

Applicant: 海南大学

Inventor： 曾姝 ,  何源 ,  万逸 ,  陈菲

IPC: C12Q1/689 ,  C12Q1/6816 ,  C12N9/22 ,  C12N9/12 ,  C12N15/113 ,  C07K19/00 ,  C12R1/63

Abstract: 本申请涉及生物技术领域，公开了一种基于OAS1‑Cas13aREC融合蛋白的可视化检测器及其应用。本申请将CRISPR‑Cas系统中的Cas13蛋白与OAS蛋白重组构建融合蛋白，以Cas13蛋白中REC结构域作为crRNA识别器，crRNA的二级结构中凸起的茎环结构作为直接重复序列与Cas13蛋白中REC结构域结合，同时crRNA包含的靶RNA特异性互补序列与检测样本靶链结合形成RNA双链激活OAS蛋白部分，OAS蛋白在短dsRNA和ATP的结合下所产生的PPi可以通显色测定，从而可以定量、定性测定食品样本中的霍乱弧菌。本申请基于融合蛋白的检测方法操作简便，具有极高的灵敏度和特异性，为食品中病原菌的检测提供了一种高效的新策略。

公开(公告)号：CN120060207A

公开(公告)日：2025-05-30

申请号：CN202510120312.4

申请日：2025-01-25

Applicant: 海南大学

Inventor： 曾姝 ,  何源 ,  万逸 ,  辛煜 ,  崔倩

IPC: C12N9/22 ,  C12N9/12 ,  C12N15/70 ,  C07K19/00 ,  C07K1/22 ,  C07K1/14 ,  C12R1/19

Abstract: 本申请涉及生物技术领域，公开了一种OAS1‑Cas13aREC融合蛋白的纯化工艺。本申请根据常规蛋白纯化工艺中的试剂进行优化，提供了一种在大肠杆菌中表达的OAS1‑Cas13aREC融合蛋白的纯化工艺，对细菌裂解液以及层析柱中的亲和平衡液、亲和洗脱液进行改进优化，不仅提高OAS1‑Cas13aREC融合蛋白的产量和蛋白纯度，而且防止蛋白氧化和稳定蛋白结构，使其不易变性。

公开(公告)号：CN117431327A

公开(公告)日：2024-01-23

申请号：CN202210858051.2

申请日：2022-07-20

Applicant: 海南大学 ,  海南微氪生物科技股份有限公司

Inventor： 曾姝 ,  柳嘉欣 ,  甘善群 ,  万逸 ,  张幸悦 ,  林宝儿

IPC: C12Q1/689 ,  C12Q1/6851 ,  C12N15/11 ,  C12R1/19

Abstract: 一种水产品病原菌的超灵敏检测组合物及其应用和检测方法本发明涉及生物技术领域，公开了一种水产品病原菌的超灵敏检测组合物及其应用和检测方法。本发明所述组合物包括如SEQ ID No.1‑2所示序列的扩增引物，以及在SEQ ID No.3所示核苷酸序列上修饰有荧光基团和淬灭基团的发卡探针H1和如SEQ ID No.4所示序列的发卡探针H2。与细菌培养法、仪器分析法、分子生物学法和免疫学法等常规检测技术相比，本发明基于HCR提供了一套扩增引物和发卡探针，在检测水产品大肠杆菌时具有较高的特异性，能够避免金黄色葡萄球菌、酿脓链球菌、铜绿假单胞菌以及沙门氏菌的影响；同时具有较佳的灵敏度，检测限可达0.4 CFU/mL；此外，与其他发卡探针相比能够避免假阳性和提高反应效率。

公开(公告)号：CN118191024A

公开(公告)日：2024-06-14

申请号：CN202311861543.8

申请日：2023-12-29

Applicant: 海南大学

Inventor： 曾姝 ,  陈菲 ,  万逸 ,  何源

IPC: G01N27/02 ,  G01N27/36 ,  G01N27/327 ,  C12Q1/6883 ,  C12Q1/6886 ,  C12Q1/6844

Abstract: 本申请涉及生物技术领域，公开了一种基于CRISPR/dCas9的电化学生物传感器及其在线粒体DNA检测中的应用。本申请借助CRISPR原理，以dCas9‑sgRNA复合物作为识别分子修饰在工作电极表面特异性捕获目标DNA，释放目标DNA的非结合链作为引发链发生HCR反应，在工作电极表面引发了发夹自组装产生dsDNA聚合物；聚乙烯亚胺‑银纳米粒子沉积在dsDNA聚合物骨架上加速电子转移速率，从而显著放大电化学信号，实现了目标物的灵敏、快速和特异检测。