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公开(公告)号:CN102051376A
公开(公告)日:2011-05-11
申请号:CN201010103458.1
申请日:2010-01-27
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于植物转基因技术领域。具体涉及一种甘蓝型油菜转基因的方法。本发明建立了适合以油菜子叶为外植体的叶绿体转化组织培养体系,通过基因枪转化法获得油菜叶绿体转基因植株。本发明还公开了利用油菜叶绿体片段为同源重组片段,构建油菜叶绿体特异性表达载体,对油菜叶绿体进行转化并获得转基因植株的方法。本发明为甘蓝型油菜的转基因提供了一种新途径。
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公开(公告)号:CN1312475C
公开(公告)日:2007-04-25
申请号:CN200410009300.2
申请日:2004-07-02
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于植物检验检疫技术领域,具体地说涉及一种镰刀菌毒素的分子检测技术领域。本发明的特征是,通过自行设计的一对引物,从中国和国外采集得到的镰刀菌中检测分离得到镰刀菌毒素DON和NIV基因片段,该片段全长分别为300bp和360bp。本发明仅仅采用一对特异性引物,进行一次PCR扩增反应,利用2.0%琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物,直接根据产物片断的长度,即可检测出禾谷镰刀菌产生毒素的类型deoxynivalenol(DON)或者nivalenol(NIV),本发明可应用于谷物、饲料和食品安全中毒素DON和NIV污染的检测。
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公开(公告)号:CN1715915A
公开(公告)日:2006-01-04
申请号:CN200410009300.2
申请日:2004-07-02
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于植物检验检疫技术领域,具体地说涉及一种镰刀菌毒素的分子检测技术领域。本发明的特征是,通过自行设计的一对引物,从中国和国外采集得到的镰刀菌中检测分离得到镰刀菌毒素DON和NIV基因片段,该片段全长分别为300bp和360bp。本发明仅仅采用一对特异性引物,进行一次PCR扩增反应,利用2.0%琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物,直接根据产物片断的长度,即可检测出禾谷镰刀菌产生毒素的类型deoxynivalenol(DON)或者nivalenol(NIV),本发明可应用于谷物、饲料和食品安全中毒素DON和NIV污染的检测。
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公开(公告)号:CN113699056A
公开(公告)日:2021-11-26
申请号:CN202010446781.2
申请日:2020-05-22
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种具有镰刀菌毒素脱毒活性的脱亚硫酸杆菌PGC‑3‑9,该菌株的保藏编号为CCTCC M 2020135。接种菌株PGC‑3‑9到含有镰刀菌毒素的培养基中,菌株能够快速完全去除培养基中的毒素,利用气相色谱质谱联用仪分析代谢物,发现镰刀菌毒素的毒性基团环氧结构被打开,形成各自对应的脱环氧形式;粮油产品脱毒效率分析证实,该菌株在有氧和无氧条件下均能快速去除小麦粉中的镰刀菌毒素DON。因此,该菌株在镰刀菌毒素脱毒领域具有广泛的应用前景。
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公开(公告)号:CN107916266B
公开(公告)日:2020-08-11
申请号:CN201711272601.8
申请日:2017-12-05
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了镰刀菌毒素脱毒路径的相关基因ADH、AKR6D1、AKR13B2及其应用,通过原核表达基因ADH、AKR6D1、AKR13B2获得纯化的蛋白,体外实验证实纯化的三个蛋白一起可以催化脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON),形成3‑异构体‑脱氧雪腐镰刀菌烯醇(3‑eip‑DON),其中ADH蛋白可氧化DON,形成3‑酮基‑脱氧雪腐镰刀菌烯醇(3‑oxo‑DON);而AKR6D1、AKR13B2蛋白可进一步还原3‑oxo‑DON,形成目前已知毒性最低的物质3‑epi‑DON。
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公开(公告)号:CN106754994A
公开(公告)日:2017-05-31
申请号:CN201510823894.9
申请日:2015-11-23
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于植物基因工程技术领域,具体涉及一种禾谷镰刀菌葡聚糖合成酶基因GLS及应用。该基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示,其编码的蛋白质序列如SEQ ID NO:2所示。将在禾谷镰刀菌中RNAi干扰效果最为明显的GLS-2,GLS-3,GLS-6区段分别以Linker相连,构建得到植物RNAi载体,利用基因枪方法共转化小麦,转基因小麦株系能产生相应的siRNA,通过RNAi途径沉默入侵禾谷镰刀菌GLS基因的表达,达到抑制病原菌侵染。花期接种禾谷镰刀菌表明,转基因小麦抗赤霉病能力有了很大提高,与非转基因植株相比,转基因植株病小穗率降低了42~59%。本发明还公开了该基因在植物抗病性状中的用途。
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公开(公告)号:CN102321657B
公开(公告)日:2015-09-16
申请号:CN201110267782.1
申请日:2011-09-09
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/66
Abstract: 本发明公开了一种Viviparous 1基因及其启动子表达载体的构建方法和应用,其步骤:A、目的基因及其启动子的克隆:合成引物VpromoterF、VpromoterR以玉米851213-1×HE124B基因组DNA为模板,扩增出目的基因Vp1的启动子序列Vpromoter.剥离玉米胚,在含10μmABA MS培养基中,摇床培养,提取mRNA,反转录合成cDNA,引物VgCF和VgCR,扩增出Vp1基因的编码序列Vp1cds,PCR产物经酶切后连接到pBluescript SK+/-,测序;B、载体构建:以pBML-PMI载体为基础,Vpromoter和Vp1cds经酶切后,与pBML-PMI质粒连接,构建成pBML-PMI-Vp1表达载体。C、Viviparous 1基因及其启动子在小麦穗发芽抗性育种中的应用。利用农杆菌介导,转化小麦愈伤,获得转基因小麦。提高了ABA信号传递的敏感性,增强了小麦种子的休眠性,获得的转基因阳性材料穗发芽抗性显著提高。
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公开(公告)号:CN104673705A
公开(公告)日:2015-06-03
申请号:CN201410778424.0
申请日:2014-12-15
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于植物病害防治技术领域,涉及一株防治小麦赤霉病的解淀粉芽孢杆菌菌株的及其应用。本发明分离的解淀粉芽孢杆菌S76-3,保藏号为CCTCC NO:M2014315;其16S rDNA的核苷酸如SEQ ID NO:1所示。公开了该菌株的分离、鉴定、广谱抑菌作用、芽孢产量发酵优化以及在防治小麦赤霉病的田间应用。本发明的解淀粉芽孢杆菌发酵稀释液的液体菌剂可以有效的抑制田间小麦赤霉病的发生和危害,减少了麦穗中毒素的产生。该菌株的抗逆性强,菌剂对环境危害少,可作高效生防菌剂,本发明的解淀粉芽孢杆菌抑菌谱广,可抑制包括禾谷镰刀菌在内的10种植物病原真菌的生长,具有良好的开发和应用前景。
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公开(公告)号:CN103374614B
公开(公告)日:2014-07-30
申请号:CN201210113251.1
申请日:2012-04-18
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种转基因小麦定量检测单拷贝RPL21内标准引物及应用,其步骤:A、通过不同数据库筛选结构基因,以非同源区段设计引物,并通过NCBI中Primer-Blast生物信息学工具检测设计引物的物种特异性,并验证其引物在不同数据库中的产物;B、灭菌消毒萌发35种不同小麦品种与15个不同物种种子,取叶片CTAB法提取DNA,并通过普通定性PCR验证其在不同物种间的种属特异性和不同小麦品种中的品种间稳定性,内标准基因引物序列为:通过与Southern Blot结果进行比照,可以进行拷贝数精确定量,并且转基因小麦定性检测极限为0.2%,定量检测极限阈值为2%,拷贝数为5个六倍体小麦基因组,与预测的小麦理论检测极限一致。
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公开(公告)号:CN103421837A
公开(公告)日:2013-12-04
申请号:CN201310075279.5
申请日:2013-03-08
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于植物转基因技术领域,具体涉及一种农杆菌介导的以大麦幼苗叶基诱导愈伤获得转基因植物的方法。本发明的要点是,以大麦叶基为外植体,诱导愈伤组织,通过农杆菌介导的遗传转化方法,利用Bar基因作为筛选基因,以除草剂草铵膦作为选择剂,对转化后的愈伤组织及分化植株进行筛选,经PCR和Southern杂交分析,证实外源基因已整合到大麦基因组中,获得了转基因大麦植株,与现有技术相比,本发明的转基因的外植体(愈伤组织)可周年供应;与经典的以幼胚为受体的转化方法相比,获得受体的时间从150天缩短到3天,克服了幼胚取材时间限制;与茎尖转化方法相比,本发明对技术要求降低,操作简单。
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