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公开(公告)号：CN111718937B
公开(公告)日：2021-10-26
申请号：CN202010632561.9
申请日：2020-07-03
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/11 , C12N15/82 , A01H5/08 , A01H6/74
Abstract: 本发明公开了梨果实抗衰老microRNA及其应用。本发明获得了一种分离自‘丰水梨’在高温诱导下产生的具有调控果实衰老的microRNA(Novel_115)，其前体核苷酸序列为SEQ ID NO.2所示。通过农杆菌介导转化方法将Novel_115瞬时转化成熟梨，经生物学功能验证，表明本发明克隆的Novel_115基因具有延缓果实衰老的功能。Novel_115的发现，为调控果实衰老的分子育种提供新的基因资源。由于Novel_115基因具有同时调控多个基因的优点，为分子育种提供更高效地途径。
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公开(公告)号：CN112048516A
公开(公告)日：2020-12-08
申请号：CN202010892698.8
申请日：2020-08-31
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一个梨质子泵基因PbrVHA‑c4及其在调控果肉柠檬酸含量中的应用，属于植物基因工程技术领域。所述的梨质子泵编码基因PbrVHA‑c4具有如序列表SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列；其编码的氨基酸序列如序列表中SEQ ID NO:2所示。本发明从砀山酥梨中克隆得到一个新的VHA‑c4基因PbrVHA‑c4，利用农杆菌介导的遗传转化方法将该基因转化番茄，获得的转基因番茄果实中柠檬酸的含量明显增加，经生物学功能验证，表明本发明克隆的PbrVHA‑c4基因具有调控果实果肉柠檬酸含量的功能。本发明所述的梨质子泵编码基因PbrVHA‑c4可在果实酸度性状改良或构建高酸转基因果实中应用。
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公开(公告)号：CN111996197A
公开(公告)日：2020-11-27
申请号：CN202010783793.4
申请日：2020-08-06
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种杜梨耐盐基因、蛋白及重组载体和应用，涉及基因工程技术领域。本发明所述耐盐基因PbbHLH67的序列如SEQ ID NO.1所示。本发明将该基因构建超表达载体和沉默载体，通过农杆菌介导的遗传转化分别使其在拟南芥中稳定遗传和在杜梨中瞬时转化表达，对获得的阳性植株苗进行耐盐功能验证。结果显示，PbbHLH67基因能够有效的增加植株的耐盐性。该基因的发现，为植物抗逆分子育种提供了新的基因资源，为我国乃至世界盐碱地植物培育提供参考，有利于提高我国盐碱地利用率。
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公开(公告)号：CN111718937A
公开(公告)日：2020-09-29
申请号：CN202010632561.9
申请日：2020-07-03
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/11 , C12N15/82 , A01H5/08 , A01H6/74
Abstract: 本发明公开了梨果实抗衰老microRNA及其应用。本发明获得了一种分离自‘丰水梨’在高温诱导下产生的具有调控果实衰老的microRNA(Novel_115)，其前体核苷酸序列为SEQ ID NO.2所示。通过农杆菌介导转化方法将Novel_115瞬时转化成熟梨，经生物学功能验证，表明本发明克隆的Novel_115基因具有延缓果实衰老的功能。Novel_115的发现，为调控果实衰老的分子育种提供新的基因资源。由于Novel_115基因具有同时调控多个基因的优点，为分子育种提供更高效地途径。
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公开(公告)号：CN111454986A
公开(公告)日：2020-07-28
申请号：CN202010287373.7
申请日：2020-04-13
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种梨遗传转化方法，该方法包括以下步骤：(1)播种与育苗；(2)挑取含有目的基因的发根农杆菌菌株在液体培养基中振荡培养得到侵染液，将侵染液注射至梨苗距根部1～3cm的位置，然后将梨苗用脱脂棉沾取侵染液包裹伤口继续培养；(3)经过筛选及鉴定获得转化成功的阳性植株。本发明通过直接侵染实生梨苗的方法，成功实现了外源基因在梨中的表达，该方法克服了梨遗传背景复杂、童期长、缺乏高效稳定的遗传转化方法等困难，操作简便，转化率高，周期较短，为梨树基因功能研究和遗传改良提供了新型工具，为提高梨树遗传转化成功率奠定了基础。
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Patent Agency Ranking
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公开(公告)号：CN108250281B
公开(公告)日：2020-06-05
申请号：CN201810196311.8
申请日：2018-03-09
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明提供了杜梨中钠、氢逆向转运蛋白PbrNHX2及其在提高植物耐盐能力的应用，属于基因工程技术领域。本发明提供了杜梨中钠、氢逆向转运蛋白、编码基因及用于克隆所述编码基因cDNA序列的引物对。所述的杜梨中钠、氢逆向转运蛋白、所述的编码基因或所述的引物对克隆的编码基因对在提高植物耐盐能力中的应用。构建烟草转化载体和秋子梨转化载体，获得的阳性植株苗进行盐处理，发现阳性植株苗的电导率较野生型显著降低，叶绿素含量较野生型显著升高，成活率比野生型显著提高，同时阳性植株苗比野生型有更强的抗ROS的能力。过表达的编码基因能够有效的增强转基因植株的活性氧清除能力，从而提高了植株的耐盐性。
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公开(公告)号：CN107267522B
公开(公告)日：2020-04-21
申请号：CN201710485838.8
申请日：2017-06-23
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N15/29 , C07K14/415 , C12N15/82 , A01H5/08 , A01H6/82
Abstract: 本发明公开了梨转录因子PyMYB114及其重组表达载体和应用。一种分离自‘八月红’梨具有促进植物器官脱落功能的转录因子PyMYB114基因，其核苷酸序列为SEQ ID No.1所示，其编码的氨基酸序列为序列表SEQ ID No.2所示。通过农杆菌介导遗传瞬时转化方法把PyMYB114与它的辅助因子PybHLH3共同转化到烟草叶片，草莓和梨果实，都能促进花青苷的生物合成。这些结果表明本发明克隆的PyMYB114基因具有促进花青苷生物合成的功能。PyMYB114基因的发现，为促进红皮梨花青苷生物合成的分子育种提供新的基因资源，为实施绿色农业提供新的遗传资源。
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公开(公告)号：CN107686840B
公开(公告)日：2019-11-05
申请号：CN201710768517.9
申请日：2017-08-31
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了梨转录因子PyERF3及其重组表达载体和应用。一种分离自‘红茄’梨具有促进梨果皮花青苷生物合成功能的转录因子PyERF3基因，其核苷酸序列为SEQ ID No.1所示，其编码的氨基酸序列为序列表SEQ ID No.2所示。通过农杆菌介导遗传转化方法将转录因子瞬时转化烟草，草莓和梨果实，经生物学功能验证，表明本发明克隆的PyERF3基因与其它的转录因子PyMYB114和PybHLH3形成转录调控复合体促进梨果皮花青苷的生物合成的功能。PyERF3基因的发现，为促进梨果皮花青苷合成的分子育种提供新的基因资源，为实施绿色农业提供新的遗传资源，该遗传资源的开发利用有利于降低农业成本和实现环境友好。
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公开(公告)号：CN109797157A
公开(公告)日：2019-05-24
申请号：CN201811174607.6
申请日：2018-10-09
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明提供了一种抗非生物逆境转录因子PbrbHLH92，属于植物基因工程技术领域，其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明从杜梨中筛选到一种能够提高植物抗非生物逆境能力的转录因子PbrbHLH92，其编码的蛋白质属于核蛋白。试验表明，本发明提供的抗非生物逆境转录因子PbrbHLH92在植物抗旱、抗盐胁迫能力中起到重要作用，并且能够提高植物对于脱落酸的敏感性，在多种非生物逆境对抗中具有重要作用。本发明将所述抗非生物逆境转录因子PbrbHLH92转入到烟草或杜梨中，所得的转基因植物与野生株相比能够有效增强转基因植株的活性氧清除能力，有效提高了转基因烟草的抗旱性能。
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