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公开(公告)号：CN102286563B
公开(公告)日：2013-11-06
申请号：CN201110202072.0
申请日：2011-07-19
Applicant: 南开大学
Abstract: 一种采用固定化酶制备L-鸟氨酸的方法。采用构建的精氨酸酶基因工程菌BL21(DE3)-pET35b-Arg，将其诱导表达，破碎细胞，收集上清液，对精氨酸酶的最适反应条件和固定化条件进行了研究。将自制的纤维素微球载体加入到细胞裂解液中，通过CBD的特异性吸附，实现精氨酸酶的固定化，采用交联剂交联之后，优化催化反应条件，最佳的催化反应条件为，pH8；反应时间2h；底物L-精氨酸浓度，40g/L；固定化酶浓度，2mL/L；Mn2+浓度，1mM。在最适反应条件下，重复使用10次，底物L-精氨酸的转化率均达到90%以上。
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公开(公告)号：CN102703370A
公开(公告)日：2012-10-03
申请号：CN201210177959.3
申请日：2012-06-01
Applicant: 南开大学
Abstract: 一株组成型表达精氨酸酶的基因工程菌株及其应用。通过自杀质粒pRE112构建组成型表达精氨酸酶的基因工程菌菌株E.coliDH5α-ARG，其筛选后获得的高活性菌株酶活力为873U/g，该菌株与实验室保存的诱导型表达的菌株相比，酶活力没有显著性差异。优化的最佳催化反应条件为：反应温度，60℃；pH9.0；Mn2+浓度，0.5mM。最适反应条件下，以2g/L细胞为酶源，当底物L-精氨酸浓度为100g/L时，反应12h，底物L-精氨酸的转化率为98.17%。利用该酶源在该条件下转化10gL-精氨酸可制备L-鸟氨酸7.48g，纯度为98.9%，拆分20gDL-精氨酸可制备L-鸟氨酸7.44g和D-精氨酸9.71g，二者纯度均达98.1%以上。
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公开(公告)号：CN102286563A
公开(公告)日：2011-12-21
申请号：CN201110202072.0
申请日：2011-07-19
Applicant: 南开大学
Abstract: 一种采用固定化酶制备L-鸟氨酸的方法。采用构建的精氨酸酶基因工程菌BL21(DE3)-pET35b-Arg，将其诱导表达，破碎细胞，收集上清液，对精氨酸酶的最适反应条件和固定化条件进行了研究。将自制的纤维素微球载体加入到细胞裂解液中，通过CBD的特异性吸附，实现精氨酸酶的固定化，采用交联剂交联之后，优化催化反应条件，最佳的催化反应条件为，pH8；反应时间2h；底物L-精氨酸浓度，40g/L；固定化酶浓度，2mL/L；Mn2+浓度，1mM。在最适反应条件下，重复使用10次，底物L-精氨酸的转化率均达到90%以上。
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公开(公告)号：CN101640085B
公开(公告)日：2011-06-01
申请号：CN200910069541.9
申请日：2009-07-03
Applicant: 南开大学
Abstract: 一种分离mRNA的纤维素磁性微米材料的制备及应用。本发明采用基因工程技术将浅紫灰链霉菌的链霉亲和素基因定向克隆至含有纤维素结合域标签的pET系列载体，构建了同时具有生物素结合活性和纤维素结合活性的双功能融合蛋白CBD-SA的载体，并转入E.coli BL21感受态菌株，经IPTG低温诱导表达，获得高含量的CBD-SA融合表达蛋白。利用CBD-SA作为生物桥联剂，以生物特异性偶联法代替传统的物理吸附法和化学键合法，使纤维素磁性微米材料活化，活化后能够高效率的结合生物素化的试剂，得到可用于蛋白或核酸分离的磁性微米材料。本发明提供的纤维素磁性微米材料可用于生物样品中mRNA的分离提取等。
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公开(公告)号：CN101092614A
公开(公告)日：2007-12-26
申请号：CN200710057435.X
申请日：2007-05-23
Applicant: 南开大学
Abstract: 一种分离和固定化酶的免疫磁性微球的制备方法及其应用。涉及利用免疫磁性微球进行酶的分离纯化和固定化的方法。本发明采用生物特异性耦联的方法，将单克隆或多克隆抗体固定于磁性微球载体上，得到可用于分离纯化和固定化酶的免疫磁性微球；该免疫磁性微球可应用于发酵液、细胞裂解液中目的酶的一步分离纯化，以及采用固定化的酶对其底物进行连续的催化反应。与传统的酶的分离纯化和固定化方法相比较，本方法具有新颖、简便、快捷等优点。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN101054594A
公开(公告)日：2007-10-17
申请号：CN200710057042.9
申请日：2007-03-30
Applicant: 南开大学
Abstract: 一种双功能融合蛋白CBD－ProA载体及其制备的免疫磁性微球和应用。本发明采用基因工程技术将金黄色葡萄球菌的蛋白A基因定向克隆至含有纤维素结合域标签的pET系列载体，构建了同时具有IgG抗体结合活性和纤维素结合活性的双功能融合蛋白CBD－ProA的载体，并转入E.Coli BL21感受态菌株，经IPTG低温诱导表达，获得高含量的CBD－ProA融合表达蛋白。并利用CBD－ProA作为生物桥联剂，将IgG抗体固定于纤维素磁性微球表面。以生物特异性偶联法代替传统的物理吸附法和化学键合法，即可高效率的结合抗体，得到可用于蛋白分离和病原微生物捕获鉴定的免疫磁性微球。本发明提供的纤维素免疫磁性微球可用于，混合样品中目的蛋白的免疫磁性分离，或污染、或病原样品中微生物的捕获与鉴定以及细胞的分离。
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公开(公告)号：CN1817350A
公开(公告)日：2006-08-16
申请号：CN200510122258.X
申请日：2005-12-09
Applicant: 南开大学
Abstract: 本发明公开了一种蚕沙总生物碱及其制备方法，其制备方法为：向蚕沙中加水，加入果胶酶和纤维素酶至少一种，调节溶液的pH，加热保温提取，醇沉，离心，上清液经交联聚苯乙烯系的碱性型树脂柱，用去离子水冲洗，收集不吸附部分，再经交联聚苯乙烯系的强酸型树脂柱进行纯化，用去离子水洗去不吸附的杂质，氨水洗脱，收集生物碱阳性部分洗脱峰，脱色，脱色液经浓缩、干燥制成蚕沙总生物碱；本发明制备的蚕沙总生物碱为α－糖苷酶抑制剂，具有作用机理清晰、疗效确切、成本低，可用于糖尿病、肥胖症、高血脂等疾病的预防和治疗。
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公开(公告)号：CN1229389C
公开(公告)日：2005-11-30
申请号：CN03144274.9
申请日：2003-09-15
Applicant: 南开大学
IPC: C07K14/555 , C07K1/14
Abstract: 本发明涉及一种基因工程重组蛋白的分离技术，特别是利用免疫磁性分离技术分离纯化基因工程重组干扰素(interferon，IFN)，属于生物技术领域。本发明采用不同材料制备含有羟基的磁性微球，经环氧氯丙烷活化后，导入活性氨基，用戊二醛作为连接臂与抗干扰素抗体连接，即得到可用于干扰素分离纯化的免疫磁性微球。用该免疫磁性微球和磁性分离装置对基因工程重组干扰素的发酵菌体裂解液进行分离纯化，活性回收率超过50%，纯化后的干扰素比活性高于1.0×108IU/mg，SDS-PAGE凝胶电泳分析纯度接近100%。
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公开(公告)号：CN117417266A
公开(公告)日：2024-01-19
申请号：CN202311350038.7
申请日：2023-10-18
Applicant: 南开大学
IPC: C07C247/10 , C09K11/06 , G01N21/64
Abstract: 本发明公开了一种具有示踪定位和靶点蛋白富集捕获双功能的多模态探针及其制备方法和应用，涉及生物化学技术领域。该多模态探针结构式为：本发明基于化学生物学原理，开发了一种同时具有二酮芘结构和叠氮化取代基的多模态探针。该多模态探针在LED灯照射下可与富氧烯烃取代的药物分子反应产生特异荧光。基于叠氮取代基团可以与炔基捕获基团发生点击反应，因此该多模态探针同时具备活体示踪定位和靶点蛋白富集捕获功能，可以在蛋白水平、活细胞、组织以及活体小动物上实现荧光标记及药物靶点的监测。
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公开(公告)号：CN108440293A
公开(公告)日：2018-08-24
申请号：CN201810599731.0
申请日：2018-06-12
Applicant: 南开大学
IPC: C07C67/48 , C07C69/732
Abstract: 本发明公开了一种以忍冬属植物为原料制备高纯度绿原酸的方法。其技术特点是利用忍冬属植物金银花、山银花的地上部分包括花蕾、花、叶和茎为原料，采用超临界萃取或超声波提取技术提取忍冬属植物中的绿原酸。通过乙酸乙酯萃取、碱化沉淀的手段除杂，再经过酸化萃取来富集提取物中的绿原酸，使其纯度可达到50％以上。进一步通过经浓缩结晶可以直接析出高纯度绿原酸晶体。该方法原料来源广泛，操作简单，可省去传统的绿原酸提取和精制过程中的树脂吸附以及柱层析制备等操作过程，既可以得到高纯度绿原酸产品，具有广泛工业化应用的价值。
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