公开(公告)号：CN101092614A

公开(公告)日：2007-12-26

申请号：CN200710057435.X

申请日：2007-05-23

Applicant: 南开大学

Inventor： 白钢 ,  余养盛 ,  刘春琴 ,  曹宇 ,  杨文博

IPC: C12N11/14 ,  C12N9/00

Abstract: 一种分离和固定化酶的免疫磁性微球的制备方法及其应用。涉及利用免疫磁性微球进行酶的分离纯化和固定化的方法。本发明采用生物特异性耦联的方法，将单克隆或多克隆抗体固定于磁性微球载体上，得到可用于分离纯化和固定化酶的免疫磁性微球；该免疫磁性微球可应用于发酵液、细胞裂解液中目的酶的一步分离纯化，以及采用固定化的酶对其底物进行连续的催化反应。与传统的酶的分离纯化和固定化方法相比较，本方法具有新颖、简便、快捷等优点。

公开(公告)号：CN101525641A

公开(公告)日：2009-09-09

申请号：CN200810053749.7

申请日：2008-07-04

Applicant: 南开大学

Inventor： 白钢 ,  陈宁 ,  杨文博 ,  余养盛 ,  刘春琴 ,  段静静

IPC: C12P13/22 ,  C12P39/00 ,  C07C227/40 ,  C12R1/40 ,  C12R1/19

Abstract: 一种微生物酶法生产L－色氨酸的方法。本发明利用恶臭假单胞菌TS1138(Pseudomonas putidaTS1138)和高效表达色氨酸酶的大肠杆菌菌体的全细胞、菌体裂解液或固定化酶为酶源，从底物DL－2－氨基－Δ2－噻唑啉－4－羧酸(DL－2－amino－Δ2－thiazoline－4－carboxylic acid，DL－ATC)出发，经两步连续的或一步混合的酶促反应转化合成L－色氨酸，其纯化方法是，采用S8型大孔树脂去除含有L－色氨酸反应液中残留的DL－2－氨基－Δ2－噻唑啉－4－羧酸和吲哚，再在pH为5的条件下用NKA－II型大孔树脂吸附L－色氨酸，排除L－半胱氨酸的干扰，最后经乙醇洗脱、减压浓缩干燥，获得L－色氨酸，从而提供了一种新的L－色氨酸的绿色生产工艺路线。由于底物DL－ATC的生产成本较为低廉，因此本发明在L－色氨酸的工业化生产领域具有广阔的应用前景。

公开(公告)号：CN101092614B

公开(公告)日：2011-06-01

申请号：CN200710057435.X

申请日：2007-05-23

Applicant: 南开大学

Inventor： 白钢 ,  余养盛 ,  刘春琴 ,  曹宇 ,  杨文博

IPC: C12N11/14 ,  C12N9/00

Abstract: 一种分离和固定化酶的免疫磁性微球的制备方法及其应用。涉及利用免疫磁性微球进行酶的分离纯化和固定化的方法。本发明采用生物特异性耦联的方法，将单克隆或多克隆抗体固定于磁性微球载体上，得到可用于分离纯化和固定化酶的免疫磁性微球；该免疫磁性微球可应用于发酵液、细胞裂解液中目的酶的一步分离纯化，以及采用固定化的酶对其底物进行连续的催化反应。与传统的酶的分离纯化和固定化方法相比较，本方法具有新颖、简便、快捷等优点。

公开(公告)号：CN101054597A

公开(公告)日：2007-10-17

申请号：CN200710056754.9

申请日：2007-02-09

Applicant: 南开大学

Inventor： 白钢 ,  杨文博 ,  刘春琴 ,  余养盛

IPC: C12P13/12 ,  C12R1/40

Abstract: 一种微生物转化生产胱氨酸的方法。本发明方法包括：在以恶臭假单胞菌TS－1138细胞为酶源的情况下，以羟胺为抑制剂，酶法转化底物DL－2－氨基－Δ2噻唑啉－4羧酸(DL－2－Amino－Δ2thiazoline－4－Carboxylic Acid，ATC)得到L－半胱氨酸水溶液，并通过进一步氧化方式将所述的半胱氨酸转化成胱氨酸的方法。该方法直接利用菌体细胞为酶源催化底物，取缔了固定化酶的方法，并可多次连续使用。而且在使用中可保证5次以上ATC转化为胱氨酸的转化率在90％以上。