-
公开(公告)号：CN102191213B
公开(公告)日：2012-10-03
申请号：CN201110093484.5
申请日：2011-04-14
Applicant: 中国科学院武汉病毒研究所
Abstract: 本发明一种萤火虫荧光素酶的编码基因及制备方法和应用，包括步骤：1. 突变酶突变位点的引入：2．鉴定重组质粒；3．测序，获得带有1060位突变位点的PCR片段；4．经胶回收纯化后，用限制性内切酶，获得大肠杆菌；5．鉴定重组质粒，得到一种分离的蛋白基因；6．培养大肠杆菌；7．将重组质粒转化BL21感受态细胞，得到表达突变酶的菌株；8．将上述获得的BL21表达菌株培养；9．将5蛋白的菌液离心，再通过超声破碎，离心获取上清；10．测定，获得有高热稳定性又有高酶活的萤火虫荧光素酶。一种萤火虫荧光素酶的基因在食品、医药、菌体检测上的应用。该突变酶的发光强度是野生型的15-20倍左右，并且较野生型具有良好的热稳定性。
-
公开(公告)号：CN102353776A
公开(公告)日：2012-02-15
申请号：CN201110151215.X
申请日：2011-06-07
Applicant: 中国科学院武汉病毒研究所
IPC: G01N33/569 , G01N33/531
Abstract: 本发明公开了一种定量检测样品中炭疽芽孢的磁性免疫层析试纸条及制备方法，硝酸纤维素膜上预包被有炭疽芽孢检测线和质控线，粘贴于底板上的第一层为硝酸纤维素膜，硝酸纤维素膜靠近检测线的一端粘贴有结合垫，另一端粘贴有吸收垫，结合垫远离硝酸纤维素膜的一端上粘贴有样品垫，三层之间相互交错，试纸条装入卡板中，通过卡板的加样孔加入样品。其步骤是：A、抗体的制备；B、抗体偶联超顺磁颗粒的制备；C、将制备好的抗体偶联磁颗粒使用定量喷液于结合垫上；D、硝酸纤维素膜的包被；E、试纸条的组装。简单可靠，操作简易，方便实用。检测下限可达103个芽孢；方便快捷，20分钟可进行信号读取，适合现场检测；信号稳定性好，便于长期保存。
-
公开(公告)号：CN102234679A
公开(公告)日：2011-11-09
申请号：CN201110203537.4
申请日：2011-07-20
Applicant: 中国科学院武汉病毒研究所
Abstract: 本发明公开了一种检测肿瘤纳米探针的制备方法，其步骤：（1）、构建表达铁蛋白重链的表达质粒，大肠杆菌表达、纯化铁蛋白，电子显微镜验证表征其笼型结构。（2）、在铁蛋白氨基端融合一个绿色荧光蛋白，表达纯化制备表面展示了荧光蛋白的铁蛋白笼型结构。（3）、在氨基端融合有绿色荧光蛋白铁蛋白H链的氨基端再融合一段肿瘤靶向短肽RGD，制备出表面同时展示了荧光蛋白和肿瘤靶向肽的铁蛋白笼型结构。（4）、基于表面同时展示了荧光蛋白和肿瘤靶向肽的铁蛋白笼型结构、在其内腔合成Fe3O4纳米颗粒，制备成具有肿瘤靶向、荧光、磁性的铁蛋白多功能探针。该纳米探针把肿瘤靶向、荧光成像、磁共振成像多功能融为一体，能够实现多模式的同步检测。
-
公开(公告)号：CN102230938A
公开(公告)日：2011-11-02
申请号：CN201110168589.2
申请日：2011-06-22
Applicant: 中国科学院武汉病毒研究所
IPC: G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/558
Abstract: 本发明公开了一种基于免疫磁珠富集的甲型流感病毒检测试剂盒及方法，试剂盒包括A、免疫富集反应体系组分；B、环介导的等温核酸扩增体系组分；C、抗体的制备；D、免疫磁珠的制备；E、设计甲型H1N1流感病毒的特异性引物，用于环介导的等温65ºC扩增反应。检测方法是：a、免疫富集；b、热裂解上述产物、经磁力架分离，将含有病毒核酸的上清作为环介导等温扩增反应的模板；c、环介导等温扩增反应；d、结果判定。该试剂盒具有操作简单、快速、特异性好、灵敏度高、对硬件要求低等优势，可广泛应用于各级疾病预防控制机构，流感监测网络实验室，哨点医院等对发热病人鼻咽拭子等标本的甲型H1N1流感病毒的检测和监测。
-
公开(公告)号：CN102220433A
公开(公告)日：2011-10-19
申请号：CN201110132346.3
申请日：2011-05-20
Applicant: 中国科学院武汉病毒研究所
Abstract: 本发明公开了一种细菌中耐药基因新德里β-内酰胺酶的快速检测方法，步骤是：A、裂解或提取测试菌中的DNA用于PCR反应的模板；B、设计PCR引物，扩增全长的新德里β-内酰胺酶基因；C、浓缩扩增的blaNDM-1基因片段并定量；D、采用小麦胚芽无细胞表达系统表达blaNDM-1酶；E、测定表达的新德里β-内酰胺酶（NDM-1）降解抗生素的活性。在于使用一对PCR引物和测定降解抗生素的活性来达到检测和表征细菌中耐药基因新德里β-内酰胺酶。同时公开了扩增全长blaNDM-1基因又适合小麦胚芽无细胞表达系统表达NDM-1的引物序列。方法易行，本发明能快速检测，灵敏度高，操作简便，使用一对PCR引物和测定降解抗生素的活性来达到检测和表征细菌中耐药基因新德里β-内酰胺酶。
-
Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102174652A
公开(公告)日：2011-09-07
申请号：CN201110047792.4
申请日：2011-02-28
Applicant: 中国科学院武汉病毒研究所
CPC classification number: C12Q1/689 , C12Q2600/106
Abstract: 本发明公开了一种结核分枝杆菌吡嗪酰胺耐药性检测方法，步骤是：A、裂解结核分枝杆菌用于PCR反应的模板；B、设计PCR引物，扩增全长的吡嗪酰胺酶（pncA）基因；C、浓缩扩增的pncA基因片段并定量；D、采用小麦胚芽无细胞表达系统表达pncA酶；F、测定表达的pncA酶转化吡嗪酰胺为吡嗪酸的活性，并与同样表达的结核杆菌标准敏感株和耐药株的pncA酶活性比较，测定结核分枝杆菌吡嗪酰胺耐药性。其特征在于使用一对引物就能测定因pncA基因突变导致的耐药性；同时公开了即能从结核杆菌基因组上扩增全长pncA基因又适合小麦胚芽无细胞表达系统表达吡嗪酰胺酶的引物序列。本发明能快速、灵敏检测结核分枝杆菌吡嗪酰胺耐药性，无需细菌培养。
-
公开(公告)号：CN101624568A
公开(公告)日：2010-01-13
申请号：CN200910063483.9
申请日：2009-08-07
Applicant: 中国科学院武汉病毒研究所
Abstract: 本发明公开了一种纳米分子生物传感器及其制备方法。该传感器的主要特点是采用成线蛋白质将分子生物传感器自组装成纳米分子传感器，与未组装的分子生物传感器比较，极大地提高了检测灵敏度。其制备利用蛋白质融合技术，将具有自组装功能的成纳米线蛋白与作为生物识别元件的特定酶分子和作为换能器元件的荧光蛋白融合在一起，得到一种同时具有自组装成纳米线、识别和换能输出信号的功能蛋白，该功能蛋白质经表达纯化后，自组装成纳米分子生物传感器，可以用于检测各种临床、环境样品中的目标分子。本发明同时公开了使用该方法制备的纳米分子生物传感器在检测农药甲基对硫磷中的应用。
-
公开(公告)号：CN101348795A
公开(公告)日：2009-01-21
申请号：CN200710052784.2
申请日：2007-07-19
Applicant: 中国科学院武汉病毒研究所
Abstract: 本发明公开了一种葡萄糖氧化酶突变体编码基因及制备方法和应用。这种高活力葡萄糖氧化酶突变体的编码基因具有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列，其编码的蛋白具有SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列，其步骤是：首先设计一对诱变引物；第二是获得大肠杆菌菌株DH5α/GOD－A137S；第三是鉴定重组质粒pPIC9kGOD－A137S；第四是培养大肠杆菌菌株DH5α/GOD－A137S；第五是得到含突变基因的线性DNA；第六是获得毕赤酵母菌株GS115/GOD－A137S；第七是诱导纯化获得目的蛋白。本发明方法易行，成本低廉，高酶活葡萄糖氧化酶突变株蛋白在食品糖类检测和保鲜中的应用，具有很高的实用价值。
-
公开(公告)号：CN1710100A
公开(公告)日：2005-12-21
申请号：CN200510018969.2
申请日：2005-06-23
Applicant: 中国科学院武汉病毒研究所
Abstract: 本发明公开了一种高通量检测环境中二恶英类化学物质的方法。其步骤是：首先是探针的设计；其次是探针的退火；第三是探针的固定；第四是提取含有AhR和ARNT受体蛋白的SD小鼠肝脏胞液；第五是将SD小鼠肝脏细胞液与含有二恶英类化学物质待测样品混合；第六是FITC的荧光检测。根据荧光值增加的多少来确定样品中二恶英类化学物质的含量。本发明能快速准确的检测二恶英类化学物质，检测成本低，应用前景广泛。
-
公开(公告)号：CN1162552C
公开(公告)日：2004-08-18
申请号：CN02115833.9
申请日：2002-05-14
Applicant: 中国科学院武汉病毒研究所
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种基因芯片上的酶标信号检测方法，涉及基因芯片信号检测技术领域。其步骤是制作好有关基因芯片；进行芯片生化反应，并在反应过程中引入生物素；芯片生化反应结束后，采用碱性磷酸酶-亲和素复合物或自行制备的碱性磷酸酶-连接肽-链霉结合肽-链霉亲和素复合物进行在片信号检测。在信号检测过程中，对酶标信号检测方法的反应条件进行优化，简化反应步骤，提高了信号检测的稳定性和重复性；通过采用自行制备的碱性磷酸酶-连接肽-链霉结合肽-链霉亲和素定向交联复合物进行信号检测，提高了信号检测灵敏度。本发明适用于中、低密度基因基因芯片的信号检测。
-
-
-
-
-
-
-
-
-
Search Results
116
records
(took 0.032 seconds)
