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公开(公告)号：CN101624568A
公开(公告)日：2010-01-13
申请号：CN200910063483.9
申请日：2009-08-07
Applicant: 中国科学院武汉病毒研究所
Abstract: 本发明公开了一种纳米分子生物传感器及其制备方法。该传感器的主要特点是采用成线蛋白质将分子生物传感器自组装成纳米分子传感器，与未组装的分子生物传感器比较，极大地提高了检测灵敏度。其制备利用蛋白质融合技术，将具有自组装功能的成纳米线蛋白与作为生物识别元件的特定酶分子和作为换能器元件的荧光蛋白融合在一起，得到一种同时具有自组装成纳米线、识别和换能输出信号的功能蛋白，该功能蛋白质经表达纯化后，自组装成纳米分子生物传感器，可以用于检测各种临床、环境样品中的目标分子。本发明同时公开了使用该方法制备的纳米分子生物传感器在检测农药甲基对硫磷中的应用。
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公开(公告)号：CN102443595B
公开(公告)日：2013-01-23
申请号：CN201110357357.1
申请日：2011-11-11
Applicant: 中国科学院武汉病毒研究所
Abstract: 本发明公开了一种检测微RNA功能的双荧光报告系统的制备方法及应用，其制备步骤：A、PCR扩增获得mCherry基因序列，插入pEGFP-C1载体替代其EGFP序列，构建成载体pmCherry-C1；B、以RNAi-ReadypSIREN-RetroQ质粒为模板，PCR扩增获得人U6启动子基因，插入载体pmCherry-C1，获得质粒phU6-mCherry-C1；C、PCR扩增获得pAdtrack-CMV质粒上358-1944区间的基因序列，其中带有CMV启动子和EGFP表达框序列，将该序列插入质粒phU6-mCherry-C1中，获得质粒pMGhU6。该pMGhU6质粒即为同时含有mCherry报告基因、内参照EGFP、及微RNA和其靶标序列插入位点的双荧光报告系统。该报告系统可用于微RNA对其靶标序列表达抑制功能检测。检测方法易行，操作简便，只需转染一个质粒既可实现微RNA的功能检测。。借助荧光显微成像，该系统还可以用于可视化检测单个活细胞内微RNA对其靶标的抑制功能。
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公开(公告)号：CN101624568B
公开(公告)日：2012-09-19
申请号：CN200910063483.9
申请日：2009-08-07
Applicant: 中国科学院武汉病毒研究所
Abstract: 本发明公开了一种纳米分子生物传感器及其制备方法。该传感器的主要特点是采用成线蛋白质将分子生物传感器自组装成纳米分子传感器，与未组装的分子生物传感器比较，极大地提高了检测灵敏度。其制备利用蛋白质融合技术，将具有自组装功能的成纳米线蛋白与作为生物识别元件的特定酶分子和作为换能器元件的荧光蛋白融合在一起，得到一种同时具有自组装成纳米线、识别和换能输出信号的功能蛋白，该功能蛋白质经表达纯化后，自组装成纳米分子生物传感器，可以用于检测各种临床、环境样品中的目标分子。本发明同时公开了使用该方法制备的纳米分子生物传感器在检测农药甲基对硫磷中的应用。
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公开(公告)号：CN102443595A
公开(公告)日：2012-05-09
申请号：CN201110357357.1
申请日：2011-11-11
Applicant: 中国科学院武汉病毒研究所
Abstract: 本发明公开了一种检测微RNA功能的双荧光报告系统的制备方法及应用，其制备步骤：A、PCR扩增获得mCherry基因序列，插入pEGFP-C1载体替代其EGFP序列，构建成载体pmCherry-C1；B、以RNAi-ReadypSIREN-RetroQ质粒为模板，PCR扩增获得人U6启动子基因，插入载体pmCherry-C1，获得质粒phU6-mCherry-C1；C、PCR扩增获得pAdtrack-CMV质粒上358-1944区间的基因序列，其中带有CMV启动子和EGFP表达框序列，将该序列插入质粒phU6-mCherry-C1中，获得质粒pMGhU6。该pMGhU6质粒即为同时含有mCherry报告基因、内参照EGFP、及微RNA和其靶标序列插入位点的双荧光报告系统。该报告系统可用于微RNA对其靶标序列表达抑制功能检测。检测方法易行，操作简便，只需转染一个质粒既可实现微RNA的功能检测。借助荧光显微成像，该系统还可以用于可视化检测单个活细胞内微RNA对其靶标的抑制功能。
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