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公开(公告)号：CN108948159A
公开(公告)日：2018-12-07
申请号：CN201810735941.8
申请日：2018-07-06
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院
CPC classification number: C07K14/005 , C12N15/70 , C12N2740/11022 , G01N33/56983 , G01N33/68 , G01N2333/15
Abstract: 本发明公开了一种A或B亚群禽白血病病毒gp85基因重组原核表达蛋白及其纯化方法和应用，包括下列步骤：（1）设计并合成扩增gp85基因的特异性引物；（2）PCR扩增获得gp85基因片段并纯化；将ALV‑A/B的gp85基因分别克隆至pET‑32a原核表达载体，筛选阳性克隆后测序鉴定；（4）重组表达载体pET‑32a‑A/B‑gp85的表达；（5）尿素法纯化表达的gp85蛋白；（6）重组gp85蛋白的复性。利用本发明的方法获得了高纯度的可溶性gp85蛋白。表达的蛋白可作为包被抗原建立抗体检测方法，还可用于免疫动物制备抗血清，为免疫荧光、免疫组化等提供原材料。
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公开(公告)号：CN105486861B
公开(公告)日：2017-07-11
申请号：CN201510380893.1
申请日：2015-07-02
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院
IPC: G01N33/569
Abstract: 本发明涉及一种兔瘟病毒抗体快速检测卡及其制备方法，具体步骤为：（1）抗兔瘟病毒VP60单克隆抗体的制备，包括免疫程序、细胞融合、杂交瘤筛选及克隆化、抗体制备及纯化；（2）兔瘟病毒抗体快速检测卡的制备，包括胶体金溶液的熬制、抗兔瘟病毒VP60单克隆抗体的标记、金标垫处理、样品垫处理、C,T线确定。本发明可以快速、灵敏、准确的检测兔瘟病毒抗体，克服了国内检测兔瘟抗体主要以红细胞血凝，酶联免疫检测的问题。
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公开(公告)号：CN106834538A
公开(公告)日：2017-06-13
申请号：CN201710018128.4
申请日：2017-01-11
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院
CPC classification number: C12Q1/701 , C12Q1/686 , C12Q2521/107 , C12Q2565/125
Abstract: 本发明提供一种鉴别猪流行性腹泻病毒疫苗弱毒株和/或流行毒株一步法RT‑PCR诊断试剂盒，包括20μL RT‑PCR一步法酶、250μL酶缓冲液、300μL RNase Free dH2O、40μL混合引物、20μL阳性对照、20μL阴性对照、80μL DL2000及25μL 6×Loading Buffer；该试剂盒，与现有技术相比，具有操作简单，反转录与PCR扩增一步完成，减少了反应时间，避免了模板RNA的降解，提高了检测的敏感性等优点。该引物对猪传染性胃肠炎病毒、猪A群轮状病毒、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合症病毒和猪捷申病毒的扩增结果均为阴性，该方法最低能检出1pg的猪流行性腹泻病毒疫苗弱毒株和1pg的流行毒株模板，本试剂盒能广泛应用于基层检测机构，对猪场流行性腹泻病毒病的早期鉴别诊断、防控及净化有重要意义。
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公开(公告)号：CN106399203A
公开(公告)日：2017-02-15
申请号：CN201611024722.6
申请日：2016-11-17
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院
Abstract: 本发明涉及一种山羊支原体肺炎亚种选择性分离培养基及其制备方法，属于兽医生物学技术领域。选择性分离培养基的成分为水解乳蛋白、酵母浸粉、葡萄糖、MEM培养基、PPLO肉汤粉、丙酮酸钠、1％酚红溶液、特异性生长抑制血清和去离子水。制备方法为：按配比称取水解乳蛋白、酵母浸粉、葡萄糖、MEM培养基、PPLO肉汤粉、丙酮酸钠、1％酚红溶液，溶解于去离子水，使用前，加入健康马血清和特异性生长抑制血清。本发明山羊支原体肺炎亚种选择性分离培养基用于临床分离培养山羊支原体肺炎亚种，提高了分离过程中支原体的生长速度，提高了山羊支原体肺炎亚种的分离率，分离率为80％以上。
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公开(公告)号：CN103725644B
公开(公告)日：2016-08-10
申请号：CN201310334797.4
申请日：2013-08-02
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院
IPC: C12N5/073
Abstract: 本发明“樱桃谷鸭胚上皮细胞系及其建立方法”属于细胞生物学领域。建立方法是无菌取9?12日龄的鸭胚组织，剪成组织块后，将其向下贴于培养孔的底部，然后加入培养液在二氧化碳培养箱中、37℃下进行贴板培养。本发明基于该方法得出了一株高活率、高纯度的樱桃谷鸭胚上皮细胞系株并进行了生物保藏，该细胞系与原代细胞相比，细胞形态以生理特性有明显差异，可以连续稳定传代，营养要求低，生长周期短，适合大规模培养为基因工程、细胞工程、免疫学和分子生物学等生命科学研究提供大量高品质的细胞材料；也可作为家禽体细胞克隆育种的供体细胞；还可作为鸭病毒分离和疫苗生产的主要原材料。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103638449B
公开(公告)日：2015-10-07
申请号：CN201310587632.8
申请日：2013-11-21
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院
IPC: A61K36/9066 , A61P11/02
Abstract: 本发明属于医药技术领域，具体涉及一种治疗马属动物鼻窦炎的中药，该中药由以下重量配比的中药原料药制备而成：鸭跖草90-110份、辛荑20-30份、苍耳子30-40份、白芷30-40份、川芎25-35份、郁金25-35份、防风25-35份、柴胡25-35份、黄芪35-45份、黄芩40-50份、甘草10-20份。该中药服用方便，疗效可靠，解决了年老体弱的马属动物手术不方便的问题。
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公开(公告)号：CN104181297A
公开(公告)日：2014-12-03
申请号：CN201410421835.4
申请日：2014-08-25
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院
IPC: G01N33/569
CPC classification number: G01N33/56994 , G01N33/54373 , G01N33/54393 , G01N2333/032
Abstract: 本发明涉及动物疫病诊断技术领域，更具体的讲是一种用于检测羊的伪狂犬病毒抗体ELISA试剂盒，本发明提供的ELISA试剂盒包括包被板、阳性对照、阴性对照、样品稀释液、酶标结合物、20×浓缩洗涤液、底物液、终止液、封口胶、自封袋、使用说明书，所述的试剂盒能快速、灵敏、准确的检测羊体内的PRV抗体水平，填补了国内外该领域的空白。所述的试剂盒用以代替病毒中和试验等传统的血清学方法，用以实现敏感性高、特异性强、稳定性好的高通量大规模的羊体内PRV抗体的检测。
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公开(公告)号：CN102816864A
公开(公告)日：2012-12-12
申请号：CN201110152681.X
申请日：2011-06-08
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院
Abstract: 本发明根据GenBank上的猪瘟病毒(CSFV)的基因组核酸序列，设计一对猪瘟病毒的特异性检测引物，结合市售的病毒RNA提取试剂盒(TRIZOL)高效的RT-PCR商品化试剂，经过条件优化，组合而成的一种一步法RT-PCR检测试剂盒。该试剂盒能对待检样品进行直接检测，检测过程简单，省时省力。从病料处理到获得结果需要3.5小时，本方法具有灵敏度高，检测结果准确、特异等优点，是目前猪瘟病毒病进行快速检测的一种好方法。
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公开(公告)号：CN102807980A
公开(公告)日：2012-12-05
申请号：CN201110142671.8
申请日：2011-05-30
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院
IPC: C12N15/11 , C12N15/40 , C12N15/70 , C07K14/08 , G01N33/569 , G01N33/543
Abstract: 本发明涉及一种猪瘟抗体PPA-ELISA检测试剂盒及制备方法，该试剂盒的制备是采用RT-PCR扩增E2基因包含A、B、C、D共4个中和抗原区在内的550bp基因片段，将扩增的E2基因片段克隆到pMD18-T载体上，鉴定正确后，将目的片段进一步定向克隆到PGEX-6P-1原核表达载体，转化BL21表达菌，经IPTG诱导表达，获得了以包涵体形式表达的重组蛋白。采用亲和层析法分离纯化重组蛋白，免疫印迹检测纯化蛋白的抗原性和特异性。以该重组蛋白为包被抗原，以辣根过氧化物酶标记葡萄球菌A蛋白(SPA)为二抗，经过间接ELISA反应条件的优化，建立检测猪瘟病毒抗体的间接ELISA检测方法，并组装猪瘟抗体PPA-ELISA检测试剂盒。
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