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公开(公告)号:CN113444842B
公开(公告)日:2022-08-02
申请号:CN202110970292.1
申请日:2021-08-23
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院
Abstract: 本发明提供了一种用于狐狸逆转录病毒检测的特异引物组及PCR检测试剂盒的应用,引物组包括两对引物,其中:第一对引物:上游引物1如SEQ ID No.1‑F所示、下游引物1如SEQ ID No.1‑R所示;第二对引物:上游引物2如SEQ ID No.2‑F所示;下游引物2如SEQ ID No.2‑R所示。该特异性引物组在PCR检测中的应用,具体为将该特异性引物组在PCR检测试剂盒中进行应用。使用该特异性引物组,可提高PCR的敏感性和特异性,进而提高对狐狸逆转录病毒检测的准确性,将该特异性引物应用于PCR检测试剂盒中,可实现对该狐狸逆转录病毒进行快速、准确的检测,且样品处理过程和检测过程简单。
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公开(公告)号:CN113444841A
公开(公告)日:2021-09-28
申请号:CN202110970275.8
申请日:2021-08-23
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/686 , C12Q1/6806 , C12R1/93
Abstract: 本发明提供了一种狐狸逆转录病毒SYBR GreenⅠ荧光RT‑PCR试剂盒及使用方法,试剂盒包括核酸释放剂、2×One step TB Green RT‑PCR BufferⅢ、酶混合液、阴性对照、阳性对照和引物组;该引物组核苷酸序列为SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示的特定碱基序列;使用方法包括准备待测样本模板、荧光RT‑PCR扩增和结果分析。将该检测引物用于SYBR GreenⅠ荧光RT‑PCR试剂盒中,使该试剂盒既具有适用性广、适用性强的优点,又具有检测的准确度高、特异性强的优点;另外,使用该试剂盒,一次加样可完成狐狸逆转录病毒检测,检测过程简单、易于操作。
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公开(公告)号:CN113249527A
公开(公告)日:2021-08-13
申请号:CN202110759624.1
申请日:2021-07-05
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院 , 英国佩布赖特动物健康研究所
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12N15/113 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了检测禽网状内皮组织增生症病毒的RPA特异性引物对及其应用。本发明可以在37℃恒温条件下对目的核酸gp90基因进行RPA扩增,对仪器设备要求低,扩增的目的片段转录为RNA后被特异性的crRNA识别,进而被Cas13a切割,Cas13a的“附带切割”活性可以切割体系中的RNA报告分子,本发明的RPA反应时间在30 min左右,SHERLOCK反应时间在40 min左右,总体的检测时间低于2h;本发明配合侧流层析试纸条的应用将检测结果可视化能实现REV的快速检测和鉴别诊断。
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公开(公告)号:CN112481416A
公开(公告)日:2021-03-12
申请号:CN202011453158.6
申请日:2020-12-11
Applicant: 山东绿都生物科技有限公司 , 山东省滨州畜牧兽医研究院
Abstract: 本发明提供了非洲猪瘟病毒和猪传染性胸膜放线杆菌双重荧光PCR检测试剂盒及使用方法,试剂盒包含核酸释放剂、反应预混液Premix Taq、荧光染料LyGreen、阴性对照、阳性对照以及引物混合液,引物混合液中,引物的核苷酸序列为SEQIDNO.1、SEQIDNO.2、SEQIDNO.3和SEQIDNO.4所示;在使用方法中,控制荧光PCR扩增条件为:95℃预变性3min;94℃变性20s;55℃退火20s;72℃延伸20s;40个循环。使该试剂盒具有敏感性和特异性高的优点;可一次性完成对非洲猪瘟病毒和猪传染性胸膜放线杆菌检测,使检测过程更加简单、易于操作。
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公开(公告)号:CN111978410A
公开(公告)日:2020-11-24
申请号:CN202010774513.3
申请日:2020-08-04
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院
IPC: C07K19/00 , C12N15/62 , C12N15/70 , C12N15/66 , C12P21/02 , A61K39/10 , A61P31/04 , G01N33/68 , G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/58 , C07K16/12
Abstract: 本发明公开了一种布鲁氏菌外膜蛋白OMP25与周质蛋白BP26的融合蛋白及其表达和应用,将OMP25蛋白N端信号肽序列与BP26蛋白N端信号肽序列删除,保留其抗原决定簇序列,中间通过Linker序列GGAGGCGGGGGTTCTGGAGGCGGGGGTTCT将之连接成为融合蛋白;所述的OMP25蛋白N端信号肽序列为第1个aa~29个aa,所述的BP26蛋白N端信号肽序列为第1个aa~24个aa。本发明比单独蛋白更经济、方便,抗原性更优。蛋白获得耗时少产量高,避免了活菌的培养和生物安全风险,特异性强,定位布鲁氏菌细胞抗原表位更有利于揭示体液免疫的本质。
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公开(公告)号:CN110699328A
公开(公告)日:2020-01-17
申请号:CN201910772848.9
申请日:2019-08-21
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院
Abstract: 本发明涉及微生物病毒领域,具体的说是一种B型猪肠道病毒及其应用,所述B型猪肠道病毒Porcine enterovirus B,PEV-B,保藏号为:CGMCC No.10405,命名为Ch-SDbz-W2Y以及B型猪肠道病毒在卵黄抗体中的应用,B型猪肠道病毒Porcine enterovirus B,PEV-B基因组全长序列7382bp,其中包含5'端的非编码区为812bp、3'端的非编码区为72bp;本发明提供的一种B型猪肠道病毒,经过筛选、分离的一株新猪源肠道病毒,该分离株的分离筛选为猪源肠道病毒的全基因组变异、重组监测提供生物信息,利用该毒株制备动物免疫血清,为蛋白变异提供新的生物信息,为后续猪源肠道病毒的研究提供依据,对后续的PEV-B的遗传进化信息研究奠定基础,对掌握猪肠道病毒的重组、溯源,丰富病毒库具有重大意义。
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公开(公告)号:CN107561279A
公开(公告)日:2018-01-09
申请号:CN201710557997.4
申请日:2017-07-10
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院
IPC: G01N33/569 , G01N33/531 , G01N33/532
Abstract: 本发明涉及生物检测技术领域,具体涉及一种马链球菌兽疫亚种胶体金抗体检测试纸条。马链球菌兽疫亚种胶体金抗体检测试纸条包括在底板上依次贴附的样品垫、金标结合物垫、带有检测线和质控线的硝酸纤维素膜和吸水垫;结合物垫为包被有金标葡萄球菌A蛋白复合物的玻璃纤维膜;硝酸纤维素膜上的检测线包被有马链球菌兽疫亚种抗原;硝酸纤维素膜上的质控线包被有猪IgG。该胶体金使用马链球菌兽疫亚种冻融超声抗原作为测试线包被抗原,具有特异性强,灵敏度高、方便快捷等特点,对马链球菌兽疫亚种检测不需要复杂的检测仪器,特别适合猪场养殖人员和基层兽医工作者使用。
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公开(公告)号:CN107308445A
公开(公告)日:2017-11-03
申请号:CN201710616191.8
申请日:2017-07-26
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院
CPC classification number: A61K39/08 , A61K2039/552 , A61K2039/70 , C07K14/33 , C07K2319/00 , C12N15/62
Abstract: 本发明公开了一种羊三联四防亚单位疫苗及其制备方法,属于动物疫病防控领域。本发明由产气荚膜梭菌β-ε融合蛋白、腐败梭菌α毒素重组蛋白和佐剂组成。本发明克隆、表达的产气荚膜梭菌C58-1株的β-ε(β和ε融合蛋白)和腐败梭菌C55-2株α毒素蛋白,纯化后与佐剂混合后配制成疫苗免疫小白鼠和家兔,利用《中国兽药典》二〇一五年版三部关于羊“三联四防疫苗”检验标准检验合格,并且攻毒保护试验结果表明,免疫上述蛋白的动物对产气荚膜梭菌B型、C型、D型和腐败梭菌具有100%保护力。因此,本发明可替代传统“三联四防”疫苗。
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公开(公告)号:CN104181297B
公开(公告)日:2016-04-27
申请号:CN201410421835.4
申请日:2014-08-25
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院
IPC: G01N33/569
Abstract: 本发明涉及动物疫病诊断技术领域,更具体的讲是一种用于检测羊的伪狂犬病毒抗体ELISA试剂盒,本发明提供的ELISA试剂盒包括包被板、阳性对照、阴性对照、样品稀释液、酶标结合物、20×浓缩洗涤液、底物液、终止液、封口胶、自封袋、使用说明书,所述的试剂盒能快速、灵敏、准确的检测羊体内的PRV抗体水平,填补了国内外该领域的空白。所述的试剂盒用以代替病毒中和试验等传统的血清学方法,用以实现敏感性高、特异性强、稳定性好的高通量大规模的羊体内PRV抗体的检测。
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公开(公告)号:CN102808039A
公开(公告)日:2012-12-05
申请号:CN201110142792.2
申请日:2011-05-30
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院
Abstract: 本发明涉及一种能够鉴别猪瘟强毒和弱毒疫苗的反转录-复合套式聚合酶链式反应(RT-nPCR)的诊断方法。该方法设计合成了4条引物,引物P1、P2和P4是根据CSFV的高度保守区设计的,用引物P1/P2/P4进行套式PCR能从强毒和弱毒基因组扩增出一条609bp的目的片段,根据此片段的有无,可以判断是否为猪瘟病毒感染;引物P3是根据弱毒的高度保守区设计的,用引物P1/P3/P4进行套式PCR只能从弱毒基因组扩增出一条237bp的目的片段,而以引物P2/P3/P4进行复合PCR,强毒只能扩增出一条609bp的目的片段,而弱毒能同时扩增出一条609bp和一条237bp的目的片段。本方法准确度高,快速便捷,能立即判断发病猪是强毒或者弱毒疫苗感染,并且没有假阴性,减少了对未感染免疫猪的误杀。
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