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公开(公告)号：CN114934020A
公开(公告)日：2022-08-23
申请号：CN202210113778.8
申请日：2022-01-30
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院
IPC: C12N5/10 , C12N15/85 , C12N15/34 , C12N7/00 , C12Q1/02 , A61K39/12 , A61K39/245 , A61K39/215 , A61P31/20 , A61P31/22 , A61P31/14 , A01N1/02 , C12R1/91 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了猪视网膜上皮细胞系(WWX04‑PR)及其建立方法和应用，该细胞系于2020年7月27日，本发明猪视网膜上皮细胞易于培养，生长速度较快，能稳定传代，细胞活率高、纯度高且能很好保藏；通过无菌获取猪眼球组织分离获得高活力的原代猪视网膜细胞，然后导入含有猪腺病毒E1基因的真核表达质粒pCI‑neo‑E1，筛选和扩大培养，获得一株可稳定传代猪视网膜上皮细胞系；得到的细胞系能够用于生产猪圆环病毒、猪伪狂犬病毒、猪流行性腹泻病毒等疫苗抗原，还可用于临床野毒分离鉴定。该细胞系可作为人类视网膜相关疾病研究的细胞模型，也是研究中枢神经系统发育和功能的经典模型。
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公开(公告)号：CN111849990B
公开(公告)日：2022-06-21
申请号：CN202010770696.1
申请日：2020-08-03
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院 , 山东绿都生物科技有限公司
IPC: C12N15/113 , C12N15/63 , C12N15/90 , C12N15/39 , C12N7/01 , C07K14/065 , C12Q1/70 , C12Q1/686 , G01N33/569 , A61K39/275 , A61P31/20
Abstract: 本发明公开了一种gRNA，所述gRNA序列如SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：2所示，本发明还公开了重组质粒、ORF016基因缺失型山羊痘病毒株及其制备方法和应用。本发明首次通过基因敲除方法获得了ORF016基因缺失型山羊痘病毒株，该方法是首次将CRISPR技术在山羊痘病毒中进行应用，同时本发明采用了反向转染方法对ORF016基因进行了敲除，该方法的敲除效率达到了31.6%，远远高于现有技术中的敲除效率。同时，本发明所获得的SDLVDUORF016毒株是一株仅缺失ORF016的毒株，基因的缺失对其生长特性没有影响，该毒株可用于山羊痘疫苗、检测试剂、山羊痘病毒鉴定等用途。
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公开(公告)号：CN113956351A
公开(公告)日：2022-01-21
申请号：CN202111323477.X
申请日：2021-11-08
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院
Abstract: 本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种抗猪圆环病毒2型Cap蛋白纳米抗体、双价中和纳米抗体及其应用。该抗猪圆环病毒2型Cap蛋白双价中和纳米抗体由两个相同氨基酸序列的单价纳米抗体组成，单价纳米抗体的可变区具有3个特定序列的互补决定区CDR1、CDR2、CDR3。该抗猪圆环病毒2型Cap蛋白双价中和纳米抗体既具有优异的特异性抗原结合能力，又具有稳定的PCV2病毒中和活性；在猪圆环病毒相关疾病防治、尤其是在PCV2感染后作为治疗药物中的应用具有广泛价值。
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公开(公告)号：CN112877479A
公开(公告)日：2021-06-01
申请号：CN202110396251.6
申请日：2021-04-13
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院
Abstract: 本发明提供了一种猪伪狂犬活疫苗中外源病毒快速检测引物及其在试剂盒中的应用，该引物包括针对非洲猪瘟病毒的特异性引物Ⅰ、针对牛病毒性腹泻病毒的特异性引物Ⅱ和针对猪圆环病毒2型的特异性引物Ⅲ；将引物应用于试剂盒中，在一个反应体系中同时完成非洲猪瘟病毒(ASFV)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)和猪圆环病毒2型(PCV2)三种病原快速筛查检测；通过检测引物的设置，可提高检测ASFV、BVDV、PCV2三种病原的特异性、稳定性和灵敏度；该试剂盒在应用时，具有操作简单、检测时间短、且不受检测人员水平和实验室水平限制的优点。
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公开(公告)号：CN111849990A
公开(公告)日：2020-10-30
申请号：CN202010770696.1
申请日：2020-08-03
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院 , 山东绿都生物科技有限公司
IPC: C12N15/113 , C12N15/63 , C12N15/90 , C12N15/39 , C12N7/01 , C07K14/065 , C12Q1/70 , C12Q1/686 , G01N33/569 , A61K39/275 , A61P31/20
Abstract: 本发明公开了一种gRNA，所述gRNA序列如SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：2所示，本发明还公开了重组质粒、ORF016基因缺失型山羊痘病毒株及其制备方法和应用。本发明首次通过基因敲除方法获得了ORF016基因缺失型山羊痘病毒株，该方法是首次将CRISPR技术在山羊痘病毒中进行应用，同时本发明采用了反向转染方法对ORF016基因进行了敲除，该方法的敲除效率达到了31.6%，远远高于现有技术中的敲除效率。同时，本发明所获得的SDLVDUORF016毒株是一株仅缺失ORF016的毒株，基因的缺失对其生长特性没有影响，该毒株可用于山羊痘疫苗、检测试剂、山羊痘病毒鉴定等用途。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103849602A
公开(公告)日：2014-06-11
申请号：CN201310285025.6
申请日：2013-07-08
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院
Abstract: 本发明提供了一种牛睾丸细胞系。本发明还提供了该细胞系的建立方法，主要步骤为：(1)原代培养：无菌获取初生犊牛睾丸，清除粘附组织，采用胰酶消化法分离获得高活力的牛睾丸细胞；将分离得到的高活力的牛睾丸细胞培养于DMEM培养基中，置于37℃，5％CO2条件下培养，得原代牛睾丸细胞；(2)转染和筛选：提取纯化含有hTERT基因的真核表达质粒pCI-neo-hTERT，采用脂质体转染法，将提取纯化的的真核表达质粒pCI-neo-hTERT导入步骤(1)原代培养的牛睾丸细胞进行转染；(3)筛选和扩大培养。本发明牛睾丸细胞易于培养，生长速度较快，能稳定传代，细胞活率高、纯度高且能很好保藏；本发明方法操作简便，便于推广应用。本细胞系可应用于生产猪瘟疫苗、羊痘、羊口疮疫苗等。
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公开(公告)号：CN110438264B
公开(公告)日：2023-10-27
申请号：CN201910733836.5
申请日：2019-08-09
Applicant: 深圳市康百得生物科技有限公司 , 山东省滨州畜牧兽医研究院
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及病毒检测技术领域，具体涉及利用二重实时荧光定量RT‑PCR检测猪流行性腹泻病毒和B型猪肠道病毒的方法。本发明提供用于猪流行性腹泻病毒和B型猪肠道病毒的二重实时荧光定量RT‑PCR检测的引物和探针组，以及包含该引物和探针组的检测试剂盒和检测方法。该方法的检测特异性高、重复性好、灵敏度高，同时具有操作简便，检测时间短等优势，可实现对猪流行性腹泻病毒和B型猪肠道病毒的鉴别诊断和排除检测，在猪流行性腹泻病毒和B型猪肠道病毒的快速检测中具有较高的应用价值。
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公开(公告)号：CN110699328A
公开(公告)日：2020-01-17
申请号：CN201910772848.9
申请日：2019-08-21
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院
Abstract: 本发明涉及微生物病毒领域，具体的说是一种B型猪肠道病毒及其应用，所述B型猪肠道病毒Porcine enterovirus B,PEV-B，保藏号为：CGMCC No.10405，命名为Ch-SDbz-W2Y以及B型猪肠道病毒在卵黄抗体中的应用，B型猪肠道病毒Porcine enterovirus B,PEV-B基因组全长序列7382bp，其中包含5'端的非编码区为812bp、3'端的非编码区为72bp；本发明提供的一种B型猪肠道病毒，经过筛选、分离的一株新猪源肠道病毒，该分离株的分离筛选为猪源肠道病毒的全基因组变异、重组监测提供生物信息，利用该毒株制备动物免疫血清，为蛋白变异提供新的生物信息，为后续猪源肠道病毒的研究提供依据，对后续的PEV-B的遗传进化信息研究奠定基础，对掌握猪肠道病毒的重组、溯源，丰富病毒库具有重大意义。
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公开(公告)号：CN110438264A
公开(公告)日：2019-11-12
申请号：CN201910733836.5
申请日：2019-08-09
Applicant: 深圳市康百得生物科技有限公司 , 山东省滨州畜牧兽医研究院
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及病毒检测技术领域，具体涉及利用二重实时荧光定量RT-PCR检测猪流行性腹泻病毒和B型猪肠道病毒的方法。本发明提供用于猪流行性腹泻病毒和B型猪肠道病毒的二重实时荧光定量RT-PCR检测的引物和探针组，以及包含该引物和探针组的检测试剂盒和检测方法。该方法的检测特异性高、重复性好、灵敏度高，同时具有操作简便，检测时间短等优势，可实现对猪流行性腹泻病毒和B型猪肠道病毒的鉴别诊断和排除检测，在猪流行性腹泻病毒和B型猪肠道病毒的快速检测中具有较高的应用价值。
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公开(公告)号：CN104181297B
公开(公告)日：2016-04-27
申请号：CN201410421835.4
申请日：2014-08-25
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院
IPC: G01N33/569
Abstract: 本发明涉及动物疫病诊断技术领域，更具体的讲是一种用于检测羊的伪狂犬病毒抗体ELISA试剂盒，本发明提供的ELISA试剂盒包括包被板、阳性对照、阴性对照、样品稀释液、酶标结合物、20×浓缩洗涤液、底物液、终止液、封口胶、自封袋、使用说明书，所述的试剂盒能快速、灵敏、准确的检测羊体内的PRV抗体水平，填补了国内外该领域的空白。所述的试剂盒用以代替病毒中和试验等传统的血清学方法，用以实现敏感性高、特异性强、稳定性好的高通量大规模的羊体内PRV抗体的检测。
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