公开(公告)号：CN117431336A

公开(公告)日：2024-01-23

申请号：CN202210870980.5

申请日：2022-07-23

Applicant: 海南大学

Inventor： 宋凤阁 ,  阳秀芬 ,  王庆伟 ,  王中飞雪 ,  刘晨辉 ,  王诗悦

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/6851 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

Abstract: 一种检测海水鱼神经坏死病毒的单酶RT‑qPCR体系本发明提供一种利用RTX逆转录酶的RT‑qPCR检测石斑鱼神经坏死病毒的方法，包括以下步骤：1）取感染神经坏死病毒的石斑鱼的新鲜脑组织并提取RNA；2）设计并合成引物；3）制备反应体系；4）以待测的样本RNA为模板进行RT‑qPCR反应；5）获得荧光信号强度并进行结果分析及反应体系特异性试验。本发明利用单酶直接检测RNA病毒，集所有试剂于一管中进行一步反应，不需要分步实验，与常规RT‑qPCR实验相比，具有操作简单、低成本、快速等特点，有潜力成为临床检测和疫情监控的有力工具。

公开(公告)号：CN116970597A

公开(公告)日：2023-10-31

申请号：CN202210434992.3

申请日：2022-04-24

Applicant: 海南大学

Inventor： 王庆伟 ,  阳秀芬 ,  宋凤阁 ,  万逸 ,  周永灿 ,  孙云 ,  蔡慧莹 ,  陶钰玲 ,  林心怡 ,  申逸

IPC: C12N15/10 ,  C12Q1/6806 ,  C12Q1/6844

Abstract: 一种可与磁珠结合进行病毒核酸提取的裂解液本发明涉及一种可与磁珠结合进行病毒核酸提取的裂解液，病毒在裂解液的作用下释放核酸并吸附在磁珠上，吸附在磁珠上的核酸及洗脱下的核酸溶液均可直接进行下游的扩增、检测、分子杂交等实验，此外该病毒裂解液可直接使用全血进行病毒核酸裂解，可适用于畜牧类传染性疾病的快速现场检测。

公开(公告)号：CN116536303A

公开(公告)日：2023-08-04

申请号：CN202210095350.5

申请日：2022-01-26

Applicant: 海南大学

Inventor： 王庆伟 ,  宋凤阁 ,  万逸 ,  杨治庆 ,  肖云祥 ,  申逸

IPC: C12N15/10 ,  C12Q1/6806 ,  C12Q1/689 ,  C12R1/42 ,  C12R1/445

Abstract: 本发明涉及分子生物学技术领域，具体涉及一种细菌核酸释放剂结合磁珠进行酸提取的方法。本发明可实现革兰氏阳性菌与阴性菌的核酸快速提取，该法与溶菌酶进行核酸提取法相比大幅度降低核酸提取时间，此外磁珠上核酸在洗脱下来后，可直接进行下游的PCR扩增、检测、分子杂交等实验，特别适用于传染性疾病的快速检测和爆发重大疫情的现场检测。

公开(公告)号：CN117467800A

公开(公告)日：2024-01-30

申请号：CN202210869600.6

申请日：2022-07-23

Applicant: 海南大学

Inventor： 宋凤阁 ,  王庆伟 ,  孟天 ,  陈会友 ,  张幸悦 ,  黄心怡

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/6844 ,  C12Q1/6806 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

Abstract: 一种基于CRISPR/Cas14a系统的核酸可视化检测方法与应用本发明涉及一种CRISPR/Cas14a基因编辑系统和纳米金信号探针进行核酸可视化检测的方法及其在非洲猪瘟病毒（ASFV）的检测应用，靶标核酸加入含修饰ssDNA的纳米金及CRISPR/Cas14可视化检测体系中，不仅可通过酶标仪检测荧光信号的变化判断结果，也能通过肉眼观察纳米金团聚状态进行结果判读。核酸快提剂和羟基二氧化硅提取ASFV全血核酸，经过环介导等温扩增进行快速放大后加入可视化检测体系，成功实现ASFV的可视化检测。该方法核酸提取扩增无需大型仪器，可视化结果观察，可适用于微生物等的快速现场检测。