一种基于适配体结合crispr-cas12f1检测金黄色葡萄球菌的方法

    公开(公告)号:CN116256509A

    公开(公告)日:2023-06-13

    申请号:CN202111454054.1

    申请日:2021-12-01

    Applicant: 海南大学

    Abstract: 一种基于适配体结合crispr‑cas12f1检测金黄色葡萄球菌的方法本发明是基于核酸适配体单链DNA(45 nt)与靶单链DNA(21 nt)杂交形成双链寡核苷酸链,加入病原微生物后,双链寡核苷酸链释放出靶单链DNA技术,该靶单链DNA激活CRISPR‑Cas12f1酶并引发反式切割能力而开发的一种方法,具体涉及病原微生物的快速诊断领域,本方法操作简单、无核酸提取及核酸扩增,解决了实际现场检测的问题,丰富了crispr‑cas12f系统在检测领域的应用。

    一种基于单引物扩增结合CRISPR-cas12f1诊断病原微生物的方法

    公开(公告)号:CN119061170A

    公开(公告)日:2024-12-03

    申请号:CN202310649976.0

    申请日:2023-05-31

    Applicant: 海南大学

    Abstract: 本发明是使用由RNA与DNA部分组成的扩增引物在BST DNA聚合酶作用下引发基因组扩增,3’端修饰生物素的阻遏子在扩增过程中进行阻挡。然后RNAseH酶降解与基因组结合的扩增引物中的RNA部分,新的扩增引物重新结合基因组并完成循环扩增并产生大量目的单链DNA(ssDNA)。该单链DNA作为Cas12f1‑sgRNA复合物的激活剂,其引发Cas12f1反式切割荧光探针而开发的一种方法,具体涉及病原微生物的快速诊断领域。本方法具有恒温超灵敏性,可以实现对实际样本进行痕量诊断,该方法的发明进一步拓展了CRISPR‑Cas12f1系统在临床诊断中的应用,丰富了病原微生物诊断技术。

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