一种水产品病原菌的超灵敏检测组合物及其应用和检测方法

    公开(公告)号:CN117431327A

    公开(公告)日:2024-01-23

    申请号:CN202210858051.2

    申请日:2022-07-20

    Abstract: 一种水产品病原菌的超灵敏检测组合物及其应用和检测方法本发明涉及生物技术领域,公开了一种水产品病原菌的超灵敏检测组合物及其应用和检测方法。本发明所述组合物包括如SEQ ID No.1‑2所示序列的扩增引物,以及在SEQ ID No.3所示核苷酸序列上修饰有荧光基团和淬灭基团的发卡探针H1和如SEQ ID No.4所示序列的发卡探针H2。与细菌培养法、仪器分析法、分子生物学法和免疫学法等常规检测技术相比,本发明基于HCR提供了一套扩增引物和发卡探针,在检测水产品大肠杆菌时具有较高的特异性,能够避免金黄色葡萄球菌、酿脓链球菌、铜绿假单胞菌以及沙门氏菌的影响;同时具有较佳的灵敏度,检测限可达0.4 CFU/mL;此外,与其他发卡探针相比能够避免假阳性和提高反应效率。

    一种基于CRISPR/Cas14a系统的核酸可视化检测方法与应用

    公开(公告)号:CN117467800A

    公开(公告)日:2024-01-30

    申请号:CN202210869600.6

    申请日:2022-07-23

    Applicant: 海南大学

    Abstract: 一种基于CRISPR/Cas14a系统的核酸可视化检测方法与应用本发明涉及一种CRISPR/Cas14a基因编辑系统和纳米金信号探针进行核酸可视化检测的方法及其在非洲猪瘟病毒(ASFV)的检测应用,靶标核酸加入含修饰ssDNA的纳米金及CRISPR/Cas14可视化检测体系中,不仅可通过酶标仪检测荧光信号的变化判断结果,也能通过肉眼观察纳米金团聚状态进行结果判读。核酸快提剂和羟基二氧化硅提取ASFV全血核酸,经过环介导等温扩增进行快速放大后加入可视化检测体系,成功实现ASFV的可视化检测。该方法核酸提取扩增无需大型仪器,可视化结果观察,可适用于微生物等的快速现场检测。

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