一种基于金属基硅酸盐纳米酶的焦磷酸根及碱性磷酸酶检测方法

    公开(公告)号:CN115629063A

    公开(公告)日:2023-01-20

    申请号:CN202211223318.7

    申请日:2022-10-09

    Abstract: 本发明涉及一种基于金属基硅酸盐纳米酶的焦磷酸根及碱性磷酸酶检测方法,包括:(1)以二氧化硅纳米颗粒为模板加入铁盐、锰盐、铜盐、锌盐、镍盐、铈盐、钴盐中的一种或多种,以掺入铁、锰、铜、锌、镍、铈、钴离子中的一种或多种得到金属基硅酸盐纳米酶;(2)金属基硅酸盐纳米酶表现出类过氧化物酶活性,在H2O2存在下催化显色底物氧化显色;(3)在焦磷酸根PPi存在下,PPi会与金属基硅酸盐纳米酶中的金属离子络合进而抑制其类过氧化物酶活性,无色的显色底物无法被氧化显色;(4)碱性磷酸酶ALP可以水解PPi,使金属基硅酸盐纳米酶的类过氧化物酶活性恢复,无色的显色底物显色;从而制备高特异性、稳定性和灵敏度的金属基硅酸盐纳米酶来实现对PPi及ALP快速简便检测。

    一种高度特异性的单分子荧光检测方法

    公开(公告)号:CN110208226B

    公开(公告)日:2020-06-16

    申请号:CN201910299030.X

    申请日:2019-04-15

    Abstract: 本发明公开了一种高度特异性的单分子荧光检测方法。所述单分子检测方法包括如下步骤:(1)将两条识别探针与待检测的目标物结合,形成复合物;(2)将捕获探针固定于玻片上,并加入复合物,捕获探针与一条识别探针结合;(3)向玻片上加入带荧光标记的信号探针,信号探针与两条识别探针动态结合;(4)将玻片置于显微镜载物台上进行监测,利用电子增强型相机记录单分子荧光时间影像序列,筛选得到荧光强度‑时间轨迹呈现ON‑OFF交替变化且荧光的ton和toff相对较短的单分子点即为目标物。本发明能够在单分子水平直接指认目标物分子,高度可信的区分目标物与非目标物,可以大幅度提高单分子荧光检测的灵敏度、特异性和重复性。

    一种单碱基突变检测方法

    公开(公告)号:CN106755460B

    公开(公告)日:2020-05-05

    申请号:CN201710014617.2

    申请日:2017-01-10

    Abstract: 本发明涉及一种核酸短暂杂交与磁分离相结合的单碱基突变检测方法,其包括以下步骤:A,根据目标基因设计捕获探针与信号探针;B,将与捕获探针偶联的磁球配置成具有较高金属离子浓度的磁球溶液,加入信号探针和待测样本进行核酸杂交;C,核酸杂交结束后进行磁分离,然后将磁球重悬于低浓度金属离子的溶液中;D,再次进行磁分离,对获得上清液进行检测,判断待检样本中是否存在单碱基突变;其中,所述捕获探针与目标基因的非突变部分完全互补;所述信号探针与目标基因的突变型基因完全互补,与目标基因的野生型基因形成单碱基错配。该检测方法快速,能用于低丰度突变检测。

    一种高度特异性的单分子荧光检测方法

    公开(公告)号:CN110208226A

    公开(公告)日:2019-09-06

    申请号:CN201910299030.X

    申请日:2019-04-15

    Abstract: 本发明公开了一种高度特异性的单分子荧光检测方法。所述单分子检测方法包括如下步骤:(1)将两条识别探针与待检测的目标物结合,形成复合物;(2)将捕获探针固定于玻片上,并加入复合物,捕获探针与一条识别探针结合;(3)向玻片上加入带荧光标记的信号探针,信号探针与两条识别探针动态结合;(4)将玻片置于显微镜载物台上进行监测,利用电子增强型相机记录单分子荧光时间影像序列,筛选得到荧光强度-时间轨迹呈现ON-OFF交替变化且荧光的ton和toff相对较短的单分子点即为目标物。本发明能够在单分子水平直接指认目标物分子,高度可信的区分目标物与非目标物,可以大幅度提高单分子荧光检测的灵敏度、特异性和重复性。

    肿瘤特异性酶响应的光动力治疗纳米材料及其制备与应用

    公开(公告)号:CN115998862A

    公开(公告)日:2023-04-25

    申请号:CN202111225875.8

    申请日:2021-10-21

    Abstract: 本发明提供一种肿瘤特异性酶响应的光动力治疗纳米材料,由金属有机框架材料、名为a链的单链DNA和名为b链的单链DNA构成;所述金属有机框架材料为表面含有丰富的不饱和金属配位点的纳米粒子;所述b链含有与a链的反向互补区域,所述反向互补区域内修饰有淬灭基团并含有脱嘌呤嘧啶位点,所述脱嘌呤嘧啶位点切除后将从所述反向互补区域游离出修饰有淬灭基团的短链;所述a链5’端修饰有磷酸基团,所述a链和所述b链反向互补结合为双链DNA,并通过磷酸基团和金属有机框架材料中的不饱和金属配位点的相互作用固定于所述金属有机框架材料的表面。本发明的纳米材料实现了对肿瘤细胞的特异性光动力治疗。

    一种基于单分子荧光传感的痕量目标物检测方法

    公开(公告)号:CN107858403B

    公开(公告)日:2019-03-12

    申请号:CN201711047656.9

    申请日:2017-10-31

    Abstract: 本发明公开了一种基于单分子荧光传感的痕量目标物检测方法。所述检测方法包括如下步骤:(1)配制含有目标物的标准溶液;(2)将辅助探针固定于玻片上,加入核酸适配体,辅助探针与核酸适配体杂交;(3)向玻片上加入标准溶液,目标物与核酸适配体结合使其从辅助探针上脱离;(4)向玻片上加入信号探针,信号探针与被释放的辅助探针发生短暂杂交;(5)将玻片置于全内反射荧光显微镜的载物台上进行检测,记录荧光态变化次数大于15次的单分子荧光点数,以其为纵坐标,以标准溶液中目标物浓度为横坐标制作标准曲线;(6)将待测样品重复步骤(3)‑(5),记录荧光态变化次数大于15次的单分子荧光点数,根据标准曲线即得待测样品中目标物的浓度。

    用于单碱基突变特异性检测的差异化反应路径探针组合物及相应的检测方法

    公开(公告)号:CN119932168A

    公开(公告)日:2025-05-06

    申请号:CN202311451350.5

    申请日:2023-11-02

    Abstract: 本发明公开了用于单碱基突变特异性检测的探针组合物及相应的检测方法。本发明的检测方法利用差异化反应路径探针组合物和λExo实现野生型目标物和突变型目标物运行不同反应路径,从而产生指纹型荧光信号,这种指纹型荧光信号与野生型目标物和突变型目标物核酸序列严格对应,高度可信地区分野生型目标物、突变型目标物与非目标序列。本发明还将设计的单碱基突变特异性检测探针组合物与机器学习算法程序结合,将获得的指纹型荧光信号数据输入到机器学习算法中从而得到更可靠的检测结果。本发明能够直接指认未知样品,并在20min内得到检测结果,通过机器学习算法程序确认是否含有目标分子,大幅度提高了检测的准确率和检测效率。

    一种用于抗肿瘤药物递送的核酸纳米管及其应用

    公开(公告)号:CN116445473A

    公开(公告)日:2023-07-18

    申请号:CN202210012929.0

    申请日:2022-01-06

    Abstract: 本发明公开了一种核酸纳米管。本发明的核酸纳米管在特定位点含有尿嘧啶碱基,利用癌细胞细胞质中UDG酶和APE1酶活性显著高于正常细胞特性,使尿嘧啶在UDG酶的催化下发生反应,形成AP site,而后在APE1酶的作用下AP site被切割导致DNA单链的断裂、单体上位点的断裂,最终导致整个核酸纳米管解体。具有高度精准性,可将抗癌药物靶向递送到肿瘤细胞中,有效杀伤肿瘤细胞并且避免对正常细胞的伤害。该纳米载体安全无毒、载药量高,并能实时监控,与传统的核酸纳米管相比具有更广泛的应用前景。

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