一种单碱基突变检测方法

    公开(公告)号:CN106755460A

    公开(公告)日:2017-05-31

    申请号:CN201710014617.2

    申请日:2017-01-10

    Abstract: 本发明涉及一种核酸短暂杂交与磁分离相结合的单碱基突变检测方法,其包括以下步骤:A,根据目标基因设计捕获探针与信号探针;B,将与捕获探针偶联的磁球配置成磁球溶液,加入信号探针和待测样本进行核酸杂交;C,核酸杂交结束后进行磁分离,然后将磁球重悬于低金属离子的溶液中;D,再次进行磁分离,对获得上清液进行检测,判断待检样本中是否存在单碱基突变;其中,所述捕获探针与目标基因的非突变部分完全互补;所述信号探针与目标基因的突变型基因完全互补,与目标基因的野生型基因形成单碱基错配。该检测方法快速,能用于低丰度突变检测。

    一种高度特异性的单分子荧光检测方法

    公开(公告)号:CN110208226B

    公开(公告)日:2020-06-16

    申请号:CN201910299030.X

    申请日:2019-04-15

    Abstract: 本发明公开了一种高度特异性的单分子荧光检测方法。所述单分子检测方法包括如下步骤:(1)将两条识别探针与待检测的目标物结合,形成复合物;(2)将捕获探针固定于玻片上,并加入复合物,捕获探针与一条识别探针结合;(3)向玻片上加入带荧光标记的信号探针,信号探针与两条识别探针动态结合;(4)将玻片置于显微镜载物台上进行监测,利用电子增强型相机记录单分子荧光时间影像序列,筛选得到荧光强度‑时间轨迹呈现ON‑OFF交替变化且荧光的ton和toff相对较短的单分子点即为目标物。本发明能够在单分子水平直接指认目标物分子,高度可信的区分目标物与非目标物,可以大幅度提高单分子荧光检测的灵敏度、特异性和重复性。

    一种单碱基突变检测方法

    公开(公告)号:CN106755460B

    公开(公告)日:2020-05-05

    申请号:CN201710014617.2

    申请日:2017-01-10

    Abstract: 本发明涉及一种核酸短暂杂交与磁分离相结合的单碱基突变检测方法,其包括以下步骤:A,根据目标基因设计捕获探针与信号探针;B,将与捕获探针偶联的磁球配置成具有较高金属离子浓度的磁球溶液,加入信号探针和待测样本进行核酸杂交;C,核酸杂交结束后进行磁分离,然后将磁球重悬于低浓度金属离子的溶液中;D,再次进行磁分离,对获得上清液进行检测,判断待检样本中是否存在单碱基突变;其中,所述捕获探针与目标基因的非突变部分完全互补;所述信号探针与目标基因的突变型基因完全互补,与目标基因的野生型基因形成单碱基错配。该检测方法快速,能用于低丰度突变检测。

    一种高度特异性的单分子荧光检测方法

    公开(公告)号:CN110208226A

    公开(公告)日:2019-09-06

    申请号:CN201910299030.X

    申请日:2019-04-15

    Abstract: 本发明公开了一种高度特异性的单分子荧光检测方法。所述单分子检测方法包括如下步骤:(1)将两条识别探针与待检测的目标物结合,形成复合物;(2)将捕获探针固定于玻片上,并加入复合物,捕获探针与一条识别探针结合;(3)向玻片上加入带荧光标记的信号探针,信号探针与两条识别探针动态结合;(4)将玻片置于显微镜载物台上进行监测,利用电子增强型相机记录单分子荧光时间影像序列,筛选得到荧光强度-时间轨迹呈现ON-OFF交替变化且荧光的ton和toff相对较短的单分子点即为目标物。本发明能够在单分子水平直接指认目标物分子,高度可信的区分目标物与非目标物,可以大幅度提高单分子荧光检测的灵敏度、特异性和重复性。

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