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公开(公告)号：CN107858403B
公开(公告)日：2019-03-12
申请号：CN201711047656.9
申请日：2017-10-31
Applicant: 中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所 , 北京化工大学
IPC: C12Q1/6834
Abstract: 本发明公开了一种基于单分子荧光传感的痕量目标物检测方法。所述检测方法包括如下步骤：(1)配制含有目标物的标准溶液；(2)将辅助探针固定于玻片上，加入核酸适配体，辅助探针与核酸适配体杂交；(3)向玻片上加入标准溶液，目标物与核酸适配体结合使其从辅助探针上脱离；(4)向玻片上加入信号探针，信号探针与被释放的辅助探针发生短暂杂交；(5)将玻片置于全内反射荧光显微镜的载物台上进行检测，记录荧光态变化次数大于15次的单分子荧光点数，以其为纵坐标，以标准溶液中目标物浓度为横坐标制作标准曲线；(6)将待测样品重复步骤(3)‑(5)，记录荧光态变化次数大于15次的单分子荧光点数，根据标准曲线即得待测样品中目标物的浓度。
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公开(公告)号：CN107858403A
公开(公告)日：2018-03-30
申请号：CN201711047656.9
申请日：2017-10-31
Applicant: 中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所 , 北京化工大学
IPC: C12Q1/6834
CPC classification number: C12Q1/6834 , C12Q2525/205 , C12Q2563/107
Abstract: 本发明公开了一种基于单分子荧光传感的痕量目标物检测方法。所述检测方法包括如下步骤：(1)配制含有目标物的标准溶液；(2)将辅助探针固定于玻片上，加入核酸适配体，辅助探针与核酸适配体杂交；(3)向玻片上加入标准溶液，目标物与核酸适配体结合使其从辅助探针上脱离；(4)向玻片上加入信号探针，信号探针与被释放的辅助探针发生短暂杂交；(5)将玻片置于全内反射荧光显微镜的载物台上进行检测，记录荧光态变化次数大于15次的单分子荧光点数，以其为纵坐标，以标准溶液中目标物浓度为横坐标制作标准曲线；(6)将待测样品重复步骤(3)-(5)，记录荧光态变化次数大于15次的单分子荧光点数，根据标准曲线即得待测样品中目标物的浓度。
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公开(公告)号：CN112305131A
公开(公告)日：2021-02-02
申请号：CN202011329130.1
申请日：2020-11-24
Applicant: 中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所
Abstract: 本发明公开了一种动物源性食品中农药残留的GC‑Orbitrap‑MS筛查分析方法。所述方法包括如下步骤：(1)提取：将动物源性食品试样均质后与提取溶剂和提取盐混合，经振荡提取得到提取液，取上清液Ⅰ；(2)净化：将步骤(1)得到的上清液Ⅰ与净化剂混合进行净化，收集上清液Ⅱ，经过滤得到待液样液；(3)色谱质谱检测：采用气相色谱法分离待测样液中的农药残留，然后采用带有EI离子源的Orbitrap‑MS进行检测，即得到动物源性食品中的农药残留含量。本发明方法具有回收率高、精密度好、适用性强、有机试剂用量少等特点，各项技术指标均能满足多类动物源性食品日常检测分析的要求，为食品安全领域提供了重要的技术支持。
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公开(公告)号：CN111676269A
公开(公告)日：2020-09-18
申请号：CN202010544295.4
申请日：2020-06-15
Applicant: 中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所
Abstract: 本发明公开了一种核酸纳米结构探针及其制备方法和应用，涉及分子检测技术领域。所述纳米核酸探针包括：a.由4条主链DNA单链构成的具有四面体结构的纳米分子笼；其中2条主链DNA单链分别具有延伸出四面体结构的支链α和支链β；b.与所述支链α通过碱基互补配对结合的2条非主链DNA单链，其中一条修饰有荧光基团，另一条修饰有AP位点和淬灭基团；c.与所述支链β通过碱基互补配对结合的另外1条包含二氢乙锭的非主链DNA单链。本发明还公开了所述核酸纳米结构的制备方法和应用。本发明的核酸纳米探针可同时探测细胞中APE1和O2·-，可用于同时测定核酸修复酶和活性氧小分子。通过共聚焦成像仪，可对细胞中的目标检测物APE1和O2·-进行空间分布上的检测。
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公开(公告)号：CN111676269B
公开(公告)日：2021-09-17
申请号：CN202010544295.4
申请日：2020-06-15
Applicant: 中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所
Abstract: 本发明公开了一种核酸纳米结构探针及其制备方法和应用，涉及分子检测技术领域。所述纳米核酸探针包括：a.由4条主链DNA单链构成的具有四面体结构的纳米分子笼；其中2条主链DNA单链分别具有延伸出四面体结构的支链α和支链β；b.与所述支链α通过碱基互补配对结合的2条非主链DNA单链，其中一条修饰有荧光基团，另一条修饰有AP位点和淬灭基团；c.与所述支链β通过碱基互补配对结合的另外1条包含二氢乙锭的非主链DNA单链。本发明还公开了所述核酸纳米结构的制备方法和应用。本发明的核酸纳米探针可同时探测细胞中APE1和O2·‑，可用于同时测定核酸修复酶和活性氧小分子。通过共聚焦成像仪，可对细胞中的目标检测物APE1和O2·‑进行空间分布上的检测。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN112305131B
公开(公告)日：2021-09-21
申请号：CN202011329130.1
申请日：2020-11-24
Applicant: 中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所
Abstract: 本发明公开了一种动物源性食品中农药残留的GC‑Orbitrap‑MS筛查分析方法。所述方法包括如下步骤：(1)提取：将动物源性食品试样均质后与提取溶剂和提取盐混合，经振荡提取得到提取液，取上清液Ⅰ；(2)净化：将步骤(1)得到的上清液Ⅰ与净化剂混合进行净化，收集上清液Ⅱ，经过滤得到待液样液；(3)色谱质谱检测：采用气相色谱法分离待测样液中的农药残留，然后采用带有EI离子源的Orbitrap‑MS进行检测，即得到动物源性食品中的农药残留含量。本发明方法具有回收率高、精密度好、适用性强、有机试剂用量少等特点，各项技术指标均能满足多类动物源性食品日常检测分析的要求，为食品安全领域提供了重要的技术支持。
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公开(公告)号：CN113862274B
公开(公告)日：2023-10-03
申请号：CN202111148342.4
申请日：2021-09-29
IPC: C12N15/115 , G01N33/573 , G01N33/574 , C12Q1/686 , C12Q1/6886 , A61K31/7088 , A61P35/00
Abstract: 一种高特异性识别APE1的寡核苷酸适配体APT‑D1及其制备方法和应用，属于分子生物医药技术领域。本发明提供了寡核苷酸适配体APT‑D1的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。还提供了其在制备治疗癌症疾病药物中的应用；其在制备癌症诊断试剂盒或生物传感器中的应用；其在制备判断癌症分期或分型药物、癌症诊断试剂中的应用；一种抗癌药物包含寡核苷酸适配体APT‑D1；一种试剂盒包含寡核苷酸适配体APT‑D1。本专利首次筛选出所述核酸适配体APT‑D1，能够特异性识别结直肠癌血清中过表达的APE1，并且能够抑制APE1的DNA损伤修复功能。本发明方法简单，迅速，灵敏。
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公开(公告)号：CN115629063A
公开(公告)日：2023-01-20
申请号：CN202211223318.7
申请日：2022-10-09
Applicant: 北京化工大学
Abstract: 本发明涉及一种基于金属基硅酸盐纳米酶的焦磷酸根及碱性磷酸酶检测方法，包括：(1)以二氧化硅纳米颗粒为模板加入铁盐、锰盐、铜盐、锌盐、镍盐、铈盐、钴盐中的一种或多种，以掺入铁、锰、铜、锌、镍、铈、钴离子中的一种或多种得到金属基硅酸盐纳米酶；(2)金属基硅酸盐纳米酶表现出类过氧化物酶活性，在H2O2存在下催化显色底物氧化显色；(3)在焦磷酸根PPi存在下，PPi会与金属基硅酸盐纳米酶中的金属离子络合进而抑制其类过氧化物酶活性，无色的显色底物无法被氧化显色；(4)碱性磷酸酶ALP可以水解PPi，使金属基硅酸盐纳米酶的类过氧化物酶活性恢复，无色的显色底物显色；从而制备高特异性、稳定性和灵敏度的金属基硅酸盐纳米酶来实现对PPi及ALP快速简便检测。
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公开(公告)号：CN110208226B
公开(公告)日：2020-06-16
申请号：CN201910299030.X
申请日：2019-04-15
Applicant: 北京化工大学
Abstract: 本发明公开了一种高度特异性的单分子荧光检测方法。所述单分子检测方法包括如下步骤：(1)将两条识别探针与待检测的目标物结合，形成复合物；(2)将捕获探针固定于玻片上，并加入复合物，捕获探针与一条识别探针结合；(3)向玻片上加入带荧光标记的信号探针，信号探针与两条识别探针动态结合；(4)将玻片置于显微镜载物台上进行监测，利用电子增强型相机记录单分子荧光时间影像序列，筛选得到荧光强度‑时间轨迹呈现ON‑OFF交替变化且荧光的ton和toff相对较短的单分子点即为目标物。本发明能够在单分子水平直接指认目标物分子，高度可信的区分目标物与非目标物，可以大幅度提高单分子荧光检测的灵敏度、特异性和重复性。
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公开(公告)号：CN106755460B
公开(公告)日：2020-05-05
申请号：CN201710014617.2
申请日：2017-01-10
Applicant: 北京化工大学
IPC: C12Q1/6827
Abstract: 本发明涉及一种核酸短暂杂交与磁分离相结合的单碱基突变检测方法，其包括以下步骤：A，根据目标基因设计捕获探针与信号探针；B，将与捕获探针偶联的磁球配置成具有较高金属离子浓度的磁球溶液，加入信号探针和待测样本进行核酸杂交；C，核酸杂交结束后进行磁分离，然后将磁球重悬于低浓度金属离子的溶液中；D，再次进行磁分离，对获得上清液进行检测，判断待检样本中是否存在单碱基突变；其中，所述捕获探针与目标基因的非突变部分完全互补；所述信号探针与目标基因的突变型基因完全互补，与目标基因的野生型基因形成单碱基错配。该检测方法快速，能用于低丰度突变检测。
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