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公开(公告)号：CN107723341A
公开(公告)日：2018-02-23
申请号：CN201711045243.7
申请日：2017-10-31
Applicant: 北京化工大学
IPC: C12Q1/6827
CPC classification number: C12Q1/6827 , C12Q2563/107 , C12Q2521/319
Abstract: 本发明涉及基因突变检测领域的一种检测单碱基突变的方法。该方法其包括以下步骤：S1，根据目标基因设计荧光信号探针；所述荧光信号探针与目标基因的突变型基因完全互补，与目标基因的野生型基因形成单碱基错配；S2，在含荧光信号探针的溶液中加入目标基因的待测样本和λ核酸外切酶，形成反应体系；S3，获取反应体系在反应过程中的实时荧光曲线，判断目标基因的待测样本中是否存在单碱基突变。本发明所述方法可以快速准确地对单碱基突变基因序列进行检测，且对单碱基突变基因序列具有高度的选择性，可用于低丰度突变检测。另外，所述方法的检测成本低廉、易于制备，操作简便，重复性高，易于推广到非专业人员操作。
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公开(公告)号：CN110208226B
公开(公告)日：2020-06-16
申请号：CN201910299030.X
申请日：2019-04-15
Applicant: 北京化工大学
Abstract: 本发明公开了一种高度特异性的单分子荧光检测方法。所述单分子检测方法包括如下步骤：(1)将两条识别探针与待检测的目标物结合，形成复合物；(2)将捕获探针固定于玻片上，并加入复合物，捕获探针与一条识别探针结合；(3)向玻片上加入带荧光标记的信号探针，信号探针与两条识别探针动态结合；(4)将玻片置于显微镜载物台上进行监测，利用电子增强型相机记录单分子荧光时间影像序列，筛选得到荧光强度‑时间轨迹呈现ON‑OFF交替变化且荧光的ton和toff相对较短的单分子点即为目标物。本发明能够在单分子水平直接指认目标物分子，高度可信的区分目标物与非目标物，可以大幅度提高单分子荧光检测的灵敏度、特异性和重复性。
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公开(公告)号：CN110208226A
公开(公告)日：2019-09-06
申请号：CN201910299030.X
申请日：2019-04-15
Applicant: 北京化工大学
Abstract: 本发明公开了一种高度特异性的单分子荧光检测方法。所述单分子检测方法包括如下步骤：(1)将两条识别探针与待检测的目标物结合，形成复合物；(2)将捕获探针固定于玻片上，并加入复合物，捕获探针与一条识别探针结合；(3)向玻片上加入带荧光标记的信号探针，信号探针与两条识别探针动态结合；(4)将玻片置于显微镜载物台上进行监测，利用电子增强型相机记录单分子荧光时间影像序列，筛选得到荧光强度-时间轨迹呈现ON-OFF交替变化且荧光的ton和toff相对较短的单分子点即为目标物。本发明能够在单分子水平直接指认目标物分子，高度可信的区分目标物与非目标物，可以大幅度提高单分子荧光检测的灵敏度、特异性和重复性。
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公开(公告)号：CN107723341B
公开(公告)日：2021-04-06
申请号：CN201711045243.7
申请日：2017-10-31
Applicant: 北京化工大学
IPC: C12Q1/6827
Abstract: 本发明涉及基因突变检测领域的一种检测单碱基突变的方法。该方法其包括以下步骤：S1，根据目标基因设计荧光信号探针；所述荧光信号探针与目标基因的突变型基因完全互补，与目标基因的野生型基因形成单碱基错配；S2，在含荧光信号探针的溶液中加入目标基因的待测样本和λ核酸外切酶，形成反应体系；S3，获取反应体系在反应过程中的实时荧光曲线，判断目标基因的待测样本中是否存在单碱基突变。本发明所述方法可以快速准确地对单碱基突变基因序列进行检测，且对单碱基突变基因序列具有高度的选择性，可用于低丰度突变检测。另外，所述方法的检测成本低廉、易于制备，操作简便，重复性高，易于推广到非专业人员操作。
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