公开(公告)号：CN104630365A

公开(公告)日：2015-05-20

申请号：CN201510064328.4

申请日：2015-02-09

Applicant: 云南农业大学

Inventor： 张以芳 ,  秦波 ,  王生奎 ,  王清露 ,  史宪伟 ,  张辰宇 ,  柴俊 ,  柳桐 ,  王有涛

IPC: C12Q1/68 ,  C12N15/11

CPC classification number: C12Q1/6883 ,  C12Q1/6827 ,  C12Q2600/156

Abstract: 本发明涉及一种用于检测奶牛结核病易感性的检测标靶及引物，属于生物医学技术领域。本发明通过所述引物对奶牛外周血基因组中BOLA-DRB3.2基因的多态性进行检测，并以所述SNP位点为标靶设计引物：上游：5’-CTCTGTCTGTTGAGCGAAGATG-3’，下游:5’-AGTCACGCATTGACAAAATCAC-3’，测定样品基因型，通过测定样品中上述基因的基因型来评估患结核病的风险，为实现对个体患结核病预警风险的评估提供一种方案，为奶牛结核病净化及抗结核健康奶牛种群选育提供一种方法。

公开(公告)号：CN103981189A

公开(公告)日：2014-08-13

申请号：CN201410211944.3

申请日：2014-05-20

Applicant: 云南农业大学

Inventor： 张以芳 ,  柳桐 ,  史宪伟 ,  王生奎 ,  柴俊 ,  马志亮 ,  孙亭亭 ,  秦波 ,  王有涛

IPC: C12N15/12 ,  C12Q1/68

Abstract: 本发明属于分子生物学动物疾病诊断技术领域，具体涉及一种奶牛结核病候选基因CARD15基因及其功能突变检测方法。本发明提供的奶牛结核病候选基因CARD15基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明所提供的奶牛结核病候选基因CARD15基因功能突变检测方法，采用上述奶牛结核病候选基因CARD15基因序列，与牛基因组序列比对，针对存在的变异，采用创造酶切位点PCR-RFLP法，用下述引物对奶牛的总DNA进行PCR扩增，然后用StyⅠ酶进行单核苷酸多态性检测，正向引物：5，CCCAGCCTGGCTAATTCACCCAAG3，,反向引物：5，TATTCCCTCAGCTCTCACCTCTAAC3，。本发明巧妙地利用创造酶切位点PCR-RFLP法检测SNPs，发现奶牛结核病候选基因CARD15基因的特异性突变位点。采用标记辅助选择是一大发展趋势。